PCR per animali. Diagnostica PCR delle infezioni virali e batteriche degli animali domestici

Nella diagnostica di laboratorio clinica veterinariaÈ disponibile "Stella": complessi PCR per la rilevazione del DNA di agenti patogeni che causano infezioni, infestazioni da elminti e malattie della pelle nei cani e nei gatti, nonché la diagnostica PCR per determinare il sesso negli uccelli e identificare il circovirus aviario. Inoltre, la diagnosi di clamidia/micoplasmosi/ureaplasmosi viene ora effettuata isolando le cellule in coltura, il che consente un approccio più razionale al trattamento di queste infezioni.

Complessi PCR per cani

Il costo di ciascun complesso varia da 1.500 a 2.000 rubli, che è molto più economico della diagnostica PCR eseguita per diversi agenti patogeni. Il tempo di studio è di 1-2 giorni.

Complesso respiratorio PCR per cani n. 1 (coronavirus respiratorio, virus parainfluenzali, peste, streptococco, stafilococco) – analisi esaustiva per identificare agenti patogeni infettivi nei cani con sintomi agli arti superiori vie respiratorie(tosse, rinite, congiuntivite, linfoadenite, ipertermia). Rilevante per i cuccioli raccolti per strada o prelevati dai rifugi. La prima fase per la diagnosi " tosse dei canili", poiché può essere causato da uno qualsiasi degli agenti patogeni elencati.

Complesso respiratorio PCR per cani n. 2(adenovirosi, bordetellosi, herpesvirus, clamidia, micoplasmosi) – complesso diagnostico per identificare gli agenti patogeni, il più delle volte causando infiammazione vie respiratorie superiori e congiuntiva. È la seconda fase per la diagnosi della “tosse dei canili”, previa ricezione di un test negativo per il complesso n. 1.

Complesso PCR per cani n. 3 virale(parvovirus, coronavirus, rotavirus, peste, borreliosi) - questo tipo di test è preferibile per i cani, soprattutto i cuccioli, che presentano sintomi di danno tratto gastrointestinale– diarrea, vomito, temperatura elevata, grave perdita di peso, artrite. Parvovirus e coronavirus

Complesso PCR per cani n. 4 infezioni che colpiscono il fegato(toxoplasmosi, babesiosi, epatite infettiva, leptospirosi, emobartonellosi) - l'analisi viene effettuata per cani che presentano segni di danno epatico - anemia, vomito, diarrea, ingiallimento delle mucose, segni di epatomegalia agli ultrasuoni.

Complesso PCR per cani n. 5 infezioni trasmesse da zecche(Ehrlichiosi di tipo 1, theileriosi, babesiosi, anaplasmosi) - l'analisi viene effettuata su cani con una storia di punture di zecca, anemia ad eziologia sconosciuta, epatite.

Complesso PCR per cani n. 6 infezioni trasmesse da zecche(epatozoonosi, ehrlichiosi di tipo 2, bartonellosi, borreliosi - malattia di Lyme) - l'analisi viene effettuata su cani con una storia di punture di zecca, anemia di eziologia sconosciuta, artrite (poliartrite), epatite e anche nel secondo stadio dopo il complesso No 5, quando fallisce scoprire la causa dell'anemia.

Complessi PCR per gatti

Complesso respiratorio PCR per gatti n. 1(adenovirus, toxoplasmosi, rinotracheite, clamidia, micoplasmosi) - necessari per identificare l'agente patogeno che causa congiuntivite, rinite (lacrimazione, starnuti, tosse). Queste infezioni sono più comuni nei gatti acquistati dagli allevamenti e raccolti per strada. Se viene rilevato il micoplasma, si consiglia di sottoporsi ulteriormente ad un'analisi per determinare la sensibilità agli antibiotici.

Complesso PCR urogenitale per gatti n. 2(ureaplasmosi, toxoplasmosi, clamidia, micoplasmosi, citomegalovirus) - si consiglia di esaminare il gatto prima dell'accoppiamento, così come il gatto, per evitare infezioni intrauterine dei feti. Il gatto viene esaminato anche se gli accoppiamenti non hanno avuto successo o se il veterinario diagnostica cistite o piometra.

Complesso PCR per gatti n. 3 virale(immunodeficienza, peritonite infettiva, leucemia, emobartonellosi, panleucopenia) – questo tipo esame completoè consigliabile effettuare gatti di razza– Razze inglesi e scozzesi, abissini, persiani. Ma non dimenticare i gatti domestici! In quale caso? Se è presente diarrea ad eziologia sconosciuta, esaurimento, anemia, gengivite, dermatite, aumento del volume addominale. È molto comune avere più infezioni contemporaneamente.

Complesso PCR per gatti n. 4 infezioni delle mucose(papilloma virus tipi 1 e 2, sarcoma virus, streptococco e stafilococco) - per la diagnosi viene effettuato un tampone se il gatto ha sviluppato papillomi, ulcere o tumori al cavità orale(se il veterinario ha escluso un'infezione da calicivirus o fase terminale insufficienza renale).

Complessi generali per cani e gatti:

Complesso PCR per il rilevamento della microflora che causa la parodontite(treponema, actinobacillus, porphyronomas gingivalis e altri) – il dentista può prescrivere questo tipo di diagnosi se rileva depositi eccessivi di placca, stomatite, periodontite, carie o denti mobili nell'animale. L'isolamento dell'agente patogeno consente di prescrivere correttamente il trattamento e selezionare gli antibiotici.

Complesso PCR per il rilevamento microflora batterica pelle (Staphylococcus aureus, streptococco, coli, Proteus mirabilis) – è rilevante per la dermatite di cani, gatti, furetti, quando l'animale soffre a lungo e la situazione non consente di attendere i risultati della coltura batterica.

Complesso PCR per l'identificazione dei dermatofiti cutanei(piede d'atleta, tricofitosi, microsporia, malassezia) - i funghi elencati sono i patogeni più comuni che causano infezioni fungine pelle ( tigna, dermatite atopica, otite esterna e dermatite interdigitale). È necessaria una differenziazione molto precisa mediante la diagnostica PCR, poiché uno striscio regolare non sempre lo consente.

Complesso PCR per la rilevazione degli elminti(infezioni da anchilostomi, toxocariasi, criptosporidiosi, opistorchiasi) – molto spesso nei cuccioli e nei gattini le infestazioni da elminti si verificano nascoste. L'animale sembra sano e mangia bene. Le uova di elminti non vengono sempre escrete nelle feci. Pertanto, un test convenzionale per i vermi delle uova a volte risulta essere un falso negativo. IN in questo casoÈ meglio condurre un test PCR per la presenza di elminti.

La PCR è una reazione a catena della polimerasi basata sul principio della copia di una sezione specifica di un filamento di DNA. Grazie al multiplo aumento del volume del materiale DNA, diventa possibile rilevare i batteri desiderati al microscopio. Il vantaggio della PCR è:

alta sensibilità;
alta specificità;
rilevamento di infezioni acute e latenti;
la capacità di identificare uno qualsiasi degli agenti patogeni attualmente conosciuti.

La PCR in medicina veterinaria

Attualmente il metodo Diagnostica PCR trovato ampia applicazione nella medicina veterinaria. Questo metodo di ricerca consente poco tempo ottenere una risposta affidabile. Inoltre richiede una piccolissima quantità di materiale biologico, a differenza, ad esempio, analisi generale sangue, che semplifica notevolmente il lavoro dei veterinari. Sia negli esseri umani che negli animali, il materiale per la PCR può essere:

sangue e suoi componenti;
urina;
biopsia dello stomaco;
saliva;
raschiamento delle cellule epiteliali.

Esecuzione della diagnostica PCR per i gatti

Durante l'esame del gatto da parte di un veterinario, per confermare o smentire la diagnosi sospetta, potrebbe essere necessario sottoporre il gatto al test PCR. La ragione per prescrivere tale studio può essere la malattia più comune e allo stesso tempo difficile da diagnosticare, come peritonite, rinotracheite, coronavirus, toxoplasmosi, ecc.

Una malattia particolarmente grave che richiede il metodo PCR è l’immunodeficienza virale felina. Questo virus colpisce non solo il sistema immunitario, ma anche sistema nervoso animale. Il corpo del gatto diventa indebolito e indifeso contro batteri e virus, a seguito dei quali l'animale muore per infezioni secondarie. E per escludere la presenza di questo virus, veterinario consiglia di eseguire una reazione a catena della polimerasi sul gatto.

Questo metodo, oltre ai suoi numerosi vantaggi, presenta una serie di svantaggi. Tutti i dispositivi diagnostici PCR sono molto sensibili e pertanto la minima contaminazione può dare una risposta falsa positiva. Anche l'alto costo delle attrezzature e dei reagenti è considerato importante, quindi non tutte le cliniche veterinarie di Mosca possono acquistarle. Tuttavia, diagnosticare le malattie senza questo metodo sta diventando sempre più difficile, quindi i test PCR nei gatti a Mosca possono essere eseguiti nella nostra clinica chiamando i nostri numeri di contatto o lasciando una richiesta sul sito web.

I. Quali esami dovrebbero essere effettuati per un gatto maschio raccolto per strada?

A rigor di termini, il medico curante dovrebbe prescrivere i test in base alle condizioni dell'animale, ma uno specialista competente prescriverà comunque alcune combinazioni dall'elenco seguente. Consiglio di sottoporsi al test anche per animali dall'aspetto completamente sano. Il motivo diventerà chiaro leggendo questo articolo. Ma non ha senso eseguire esami del sangue su gattini fino a 2 mesi, incluso per verificare la presenza di infezioni.

Diamo priorità ai test:

Per la panleucopenia ( Metodo PCR).
Per quelli pigri infezione virale(mediante metodo PCR).
Esame clinico generale del sangue (è richiesto il digiuno di 4 ore prima della donazione)
Analisi del sangue biochimica (è richiesto il digiuno per 8-12 ore prima della donazione).
Analisi delle urine. (clinico generale, nonché rapporto proteina-creatinina).

Diamo uno sguardo più da vicino:

Panleucopenia o cimurro felino (infezione da parvovirus). La malattia più contagiosa e mortale dei gatti. Non si trasmette all'uomo o ad altre specie animali. Se non trattata, spesso porta alla morte, soprattutto nei gattini. La vaccinazione con un farmaco importato, effettuata annualmente secondo tutte le regole (con doppia sverminazione), protegge efficacemente da questa malattia. Pertanto, se in casa hai gatti non vaccinati, l'analisi è estremamente importante. Ma anche se non hai altri gatti in casa o sono vaccinati, ti consiglio comunque vivamente di fare questo test.

Anche un animale dall’aspetto completamente sano può essere portatore di questo pericoloso virus ( periodo di incubazione varia da 4 a 21 giorni) e se il test rileva un virus, i medici possono adottare misure adeguate per attenuare il decorso della malattia. Fino all'ottenimento del risultato, consiglio di seguire.

Test per infezioni indolenti. Le 4 infezioni più comuni sono: leucemia virale gatti, immunodeficienza felina, peritonite virale gatti (FIP) e coronavirus (enterite virale). Non trasmesso all'uomo e ad altre specie animali. Fare il test è estremamente necessario se hai i tuoi gatti (e non importa se sono vaccinati o meno, perché... vaccinazioni efficaci questi virus non esistono). Se nell’appartamento non ci sono altri gatti è comunque opportuno informarsi sulla presenza del virus nell’organismo dell’animale perché queste infezioni possono rimanere “dormienti” per anni senza alcuna manifestazione visibile, ma diventano più attive in caso di stress dell’organismo (da gravi antielmintico prima dell'anestesia durante l'intervento chirurgico) ed entrare nella fase acuta. Trattamento efficace della leucemia, dell'immunodeficienza e della FIP fase acuta NO. Esiste una terapia di mantenimento, ma non è sempre efficace. Fino all'ottenimento del risultato, consiglio di seguire.

Il costo dell'analisi con il metodo PCR (io consiglio solo questo metodo) è di 300-600 rubli, escluso il costo del prelievo di sangue per ciascuno (striscio rettale), a seconda del laboratorio o della clinica. Il risultato richiede 1-3 giorni, anche a seconda del laboratorio. Alcuni laboratori combinano questi test in un cosiddetto. profilo, che consente di risparmiare denaro. Ad esempio, il laboratorio Nucleom, attraverso la clinica veterinaria Zoo Academy, offre la possibilità di effettuare test per infezioni indolenti utilizzando il metodo PCR come parte di un profilo per 900 rubli (e NON include il coronavirus, per il quale si consiglia di sottoporsi al test altri 300 rubli, ma è inclusa la panleucopenia (!) e viene aggiunta l'emobartonellosi). Ad oggi, questa è l'offerta più redditizia a Mosca che io conosca. In altri laboratori e cliniche veterinarie, tale studio può costare 2 volte di più.

Esame del sangue clinico generale. Prima della donazione è necessario digiunare per 4 ore. Molto informativo per i medici. Te ne parlerò condizioni acute, ad esempio, circa processi infiammatori nel corpo e aiuterà il medico a scegliere i farmaci giusti per il trattamento, se necessario. Confermare o confutare i risultati degli studi n. 1-2. Allo stesso tempo, costa poco 300-600 rubli (escluso il costo del prelievo di sangue), quindi è strettamente raccomandato per la donazione durante qualsiasi prelievo di sangue, ad esempio per gli studi n. 1-2.

Esame del sangue biochimico. Prima della donazione è necessario digiunare per 8-12 ore. Mostrerà lo stato organi interni e aiuterà il medico a prescrivere trattamento corretto se necessario. Proprio come lo Studio 3, l’analisi può aiutare a confermare i risultati dello Studio 2. È un insieme di indicatori, quindi il costo varia a seconda della loro quantità e del laboratorio. Di norma, non è necessario scervellarsi su quali indicatori prendere perché... qualsiasi laboratorio li combina in profili speciali. Puoi scegliere il corso standard o avanzato. Il costo varia a seconda della clinica e del laboratorio. Un profilo standard costa da 900 rubli, un profilo esteso da 1.200 rubli, escluso il costo del prelievo di sangue.

Nota importante. Non ha senso donare i dati biochimici del sangue a: a) donne incinte, b) gattini fino a 4 mesi, c) prima di un mese dall'intervento in anestesia! Il risultato sarà notevolmente distorto e potrebbe indurre in errore il medico, che prescriverà cure non necessarie.

Analisi delle urine. 5.1. Clinica generale. 5.2. Rapporto proteine/creatinina.

La cosa più difficile in termini di ottenimento del materiale è la ricerca. Ma per ritirarlo non è necessario portare l'animale in clinica. Uno studio molto importante che può rivelarlo fase iniziale problemi o segni renali urolitiasi, qualcosa che lo Studio n. 3 non potrebbe mai mostrare. Allo stesso tempo, non ha la stessa urgenza degli studi n. 1-3. L'urina deve essere raccolta in un vassoio pulito(!). Puoi utilizzare un kit speciale per la raccolta dell'urina (costo 300-400 rubli), composto da granuli che non assorbono liquidi e un contenitore per l'urina. Per raccogliere l'urina dalla vaschetta è possibile utilizzare anche una normale siringa (20 ml) senza ago. Puoi anche trasportarlo in un laboratorio o in una clinica veterinaria. È necessario soddisfare determinate condizioni. L'analisi non deve essere conservata per più di 5 ore dal momento della raccolta al momento della collocazione nelle apparecchiature di laboratorio. Deve essere conservato e trasportato al freddo. Durante il trasporto, consiglio di utilizzare un pacchetto termico e un liquido refrigerante. Se non si dispone di refrigerante, è possibile utilizzare verdure surgelate J. costo medio- circa 600 rubli.

II. Dove fare il test?

R) È possibile in clinica, in combinazione con appuntamento iniziale medico In ogni caso dovrai andare dal medico con i risultati degli esami, perché... l'interpretazione dei test n. 3-5 richiede qualifiche mediche.

B) Direttamente in laboratori specializzati. In questo caso dovrai decidere tu stesso cosa prendere e cosa no.

Allo stesso tempo, molte cliniche veterinarie dispongono di propri laboratori in grado di condurre le ricerche n. 3-5, mentre la ricerca sui virus richiede di più attrezzature costose, quindi le cliniche, non disponendone, inviano il materiale raccolto a laboratori specializzati con i quali collaborano. I laboratori più famosi di Mosca (in ordine alfabetico): Vettest, Neovet, Nucleom, Pasteur, TsMD (autostrada Zvenigorod), Chance bio (rete). Consiglio di informarsi in anticipo con quali laboratori collabora una determinata clinica veterinaria (è consigliabile averne più di uno), nonché il costo dei test. Di norma, tutti i laboratori dispongono di attrezzature di alta qualità, ma purtroppo la qualità dei risultati ottenuti dipende fortemente dal fattore umano. Quindi questa è in una certa misura una lotteria e talvolta è necessario ripetere i test in diversi laboratori per confermare o confutare questo o quel risultato.

Leggi le regole in un articolo separato.

Peritonite infettiva felina– sistemico malattia virale(Coronavirus), che colpisce molti tessuti del corpo. Sono state identificate due forme della malattia: umida e secca. A forma bagnata, il liquido infiammatorio si accumula nella cavità addominale. Nella forma secca il virus attacca diversi organi come i reni e la milza. Non esiste una cura per questa malattia e l’esito è quasi sempre fatale. La FIP viene spesso diagnosticata nei gattini e nei gatti adulti di età inferiore ai 3 anni. I gatti nei canili o nelle case con più animali domestici hanno il rischio più elevato di sviluppare la malattia.

Informazioni aggiuntive
La CPI è una malattia virale sistemica caratterizzata da esordio latente, febbre periodica incontrollata, reazione piogranulomatosa, accumulo di essudato nelle cavità corporee ed elevata mortalità.

Fisiopatologia
Il virus IPK si replica localmente nelle cellule epiteliali vie respiratorie o orofaringe. I corpi virali iniziano a essere prodotti e il virus viene assorbito dai macrofagi. Il virus viene trasportato dai macrofagi/monociti in tutto il corpo, localizzandosi nelle pareti di varie vene e nello spazio perivascolare. La replicazione perivascolare locale del virus e la successiva reazione piogranulomatosa da parte del tessuto costituiscono un quadro caratteristico delle lesioni nella IPC.

Sistemi di destinazione

Multisistemico: lesioni piogranulomatose o granulomatose si verificano nell'omento, su membrane sierose organi cavità addominale, come il fegato, i reni, l'intestino, i linfonodi addominali e lo strato sottomucoso dell'intestino.
Respiratorio: lesioni sulla superficie dei polmoni, versamento pleurico nella forma umida di IPC.
Lesioni nervose-vascolari compaiono in tutto il sistema nervoso centrale, soprattutto sulle membrane
Oftalmologico: il danno può manifestarsi come uveite e coreoretinite.

Predisposizione genetica
NO.

Prevalenza
La prevalenza di anticorpi contro il coronavirus felino (FCoV) è elevata nella maggior parte delle popolazioni, soprattutto dove molti gatti vivono insieme. L’incidenza della malattia clinica è bassa nella maggior parte delle popolazioni, soprattutto nei gatti tenuti da soli. A causa della difficoltà di diagnosi, controllo e prevenzione, un’epidemia di FTI negli hotel per gatti può essere catastrofica.

Segni peritonite virale infettiva del gatto (IPK, VIPK, FIP)

I gatti domestici e i gatti esotici sono predisposti all’infezione da FPV.

Predisposizione di razza
Alcune famiglie o linee di gatti mostrano una maggiore predisposizione allo sviluppo forma clinica malattie dopo l'infezione da HIV. Tra i gatti esotici, i ghepardi sono particolarmente predisposti a sviluppare la FIP fatale.

Età media e fascia d'età
L'elevata prevalenza della FIP si manifesta nei gattini a 3 mesi di età. fino a 3 anni. La prevalenza diminuisce dopo che il gatto raggiunge i 3 anni di età.

Predisposizione sessuale
NO

Anamnesi
Commenti generali
Può manifestarsi un'ampia gamma di sintomi a seconda della virulenza e della patogenicità del ceppo virale coinvolto e dell'efficacia sistema immunitario sistemi host e target. Ci sono due forme classiche malattie umide, con versamento di essudati nelle cavità corporee e secche, che colpiscono vari organi.
Anamnesi

C'è un inizio nascosto
Graduale esaurimento e perdita di appetito
Crescita stentata
Aumento graduale del volume addominale, sviluppo di idropisia, ascite, aspetto panciuto dell'animale
Febbre persistente senza risposta agli antibiotici

Risultati dell'esame fisico

Depressione, bassa statura
Cattivo stato generale– perdita di peso e cattiva condizione lana
Versamenti addominali e pleurici
La palpazione può rivelare masse addominali (granulomi o piogranulomi) sull'omento, sulla superficie degli organi interni, soprattutto sui reni, e sulle pareti intestinali. Mesenterico I linfonodi può essere aumentato.
Occhi: cambiamento nel colore dell'iride, forma irregolare allievo.
I segni neurologici possono includere varie variazioni.

Cause
La FIPV è causata da uno dei due tipi di coronavirus felino. La maggior parte delle infezioni, forse l’85%, sono causate dal virus di tipo 1 (FCoV-1), il resto dal virus di tipo 2 (FCoV-2). È molto importante distinguere tra due biotipi del virus, meno virulento e avirulento specie intestinali virus (coronavirus enterico felino o FECV) e specie virulente che danno origine a FIE. Infatti, PVVC e PVVC possono diventare di tipo 1 o di tipo 2. In ciascun tipo esiste uno spettro di virulenza da virus avirulenti che formano infezioni asintomatiche e lesioni fatali del PVVC.

Fattori di rischio

Ingresso di un gatto positivo agli anticorpi FCoV nella popolazione di gatti negativi agli anticorpi FCoV (non protetti da anticorpi contro FPV)
Gatti tenuti in gruppi

Diagnosi di HIPC

La forma umida dell'IPPC può essere facilmente rilevata clinicamente, mentre la forma secca è difficile da diagnosticare con precisione. Non esiste un unico test di laboratorio per diagnosticare la FIP perché la malattia varia da caso a caso.

Diagnosi differenziale

Febbre di origine sconosciuta. Questa diagnosi può essere fatta quando tutte le altre vengono rifiutate possibili ragioni ipertermia.
Malattia cardiaca che causa versamento pleurico. Questo versamento avrà una densità relativa e un numero di cellule bassi rispetto a alta densità e un enorme contenuto cellulare nell'effusione HIPC.
Le lesioni del linfoma, soprattutto dei reni, possono essere simili a quelle del VIP alla palpazione. I tumori del sistema nervoso centrale possono mostrare segni argomenti simili, come con VPK. La maggior parte dei gatti risulta positiva all’antigene HIPC. Nei gatti con un risultato negativo del test, le biopsie delle lesioni (se possibile) dovrebbero essere sottoposte ad analisi istopatologica o immunochimica per l'antigene HIPC.
Malattie respiratorie causate da calicivirus felino e herpesvirus felino, clamidia o batteri vari.
Pansteatite (malattia del grasso giallo). Dolore alla palpazione dell'addome e dieta a base di solo pesce.
Panleucopenia che causa enterite. Il numero dei globuli bianchi dovrebbe essere basso.
Diagnosi
Questa malattia viene sospettata in assenza di risposta febbrile agli antibiotici, in presenza di essudati nel torace e nelle cavità peritoneali senza segni evidenti agenti infettivi, iperglobulinemia e aumento del contenuto proteico nell'effusione in forma umida.
Insufficienza cardiaca, linfosarcoma e rottura dei dotti linfatici, ecc. le malattie con segni di versamento toracico e addominale dovrebbero essere attentamente considerate e testate, così come la leucemia felina, il virus dell'immunodeficienza felina e la panleucopenia felina.
Di ragioni varie isolare il virus non è pratico.
Procedure sierologiche: alcuni laboratori diagnostici non sono in grado di eseguire test per il VIP a causa della difficoltà di interpretare i risultati. Un risultato positivo VPK dell'analisi di immunofluorescenza (IFA) indica solo che l'animale è entrato in contatto con il virus, senza confermare la presenza del virus. Tuttavia, esistono prove considerevoli che molti gatti sierologicamente positivi hanno eliminato il coronavirus, possibilmente nel tratto respiratorio o gastrointestinale. Test positivi l'utilizzo di ELISA o ELISA non fornisce una diagnosi garantita per la FIP.
Un risultato positivo del test ELISA per VIPK (titolo da 1:50 a 1:6000) insieme a segni clinici di VIPK indica la corretta manifestazione di VIPK. Sebbene insoliti, alcuni gatti che mostrano segni di FIP ne hanno risultato negativo per i test sierologici.

Molti laboratori diagnostici preferiscono l'ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima).ELISA.

Sono disponibili kit diagnostici ELISA e ELISA da utilizzare per il coronavirus felino, ma i risultati devono essere interpretati con cautela.
Le proteine totali, determinate mediante elettroforesi, risultano notevolmente aumentate.
Un risultato positivo della colorazione dei campioni (da polmoni, fegato, reni, linfonodi mesenterici e pleurici) con anticorpi fluorescenti specifici per VIPK è considerato la diagnosi finale. Il coronavirus enterico reagisce in modo crociato al test VPK.
Durante la vita negli animali è possibile rilevarla nel sangue grave anemia, neutrofilia e leucopenia.
È anche disponibile in commercio un test PRC per facilitare l’identificazione del virus in vari tessuti.

Esami del sangue e delle urine

I gatti affetti da FIP tendono a sviluppare leucopenia nelle prime fasi dell'infezione, ma successivamente sviluppano leucocitosi con neutrofilia e linfopenia.
Può essere rilevata anemia gradi diversi gravità: da moderata a grave.
Di solito è evidente un aumento dei livelli plasmatici totali di globuline.
Spesso è presente iperbilirubiuria.

Test di laboratorio

Il test degli anticorpi sierici rileva gli anticorpi contro i coronavirus felini. Un risultato positivo non è diagnostico e indica preferenzialmente una precedente infezione da IPV. La correlazione tra il valore del titolo superiore e la potenziale conferma dell'HIPC non è elevata.
La PCR (reazione a catena della polimerasi) consente di determinare l'antigene virale. L'accuratezza di un test positivo è correlata alla manifestazione clinica della malattia.
Sono disponibili test immunoistochimici (immunoperossidasi) per rilevare l'antigene HIPC in cellule specifiche in campioni istopatologici provenienti da campioni post-mortem e bioptici di gatti fatali. Questo test è eccellente per confermare l'HIPC.

Metodi diagnostici visivi di solito non è necessario, ma può aiutare a rilevare versamenti addominali e pleurici, nonché lesioni piogranulomatose.
Il fluido sotto forma umida di IPPC può essere trovato anche nella cavità addominale (ascite).
L'ecografia dà Informazioni aggiuntive, che non può essere ottenuto mediante radiografia. In questo caso, linfonodi ingrossati al centro dell'intestino.

Raggi X: 1 . Opacità diffusa nella parte inferiore del torace dovuta a versamento pleurico, che oscura i confini del cuore 2 non visibile, ma leggero 4 spostato verso la colonna vertebrale e poco ventilato, 3 – trachea, 5 - fegato, 6 - stomaco, 7 - intestini

Altre procedure diagnostiche

Il liquido ottenuto dal torace e dalle cavità addominali è pallido o paglierino, viscoso, spesso intervallato da fibrina, e dopo la sedimentazione si depositano dei coaguli. La densità specifica di tale liquido è solitamente elevata (1.030-1.040).
La laparoscopia può essere utile per rilevare lesioni specifiche nella cavità addominale e ottenere campioni di tessuto per la conferma istopatologica e immunochimica.
La laparotomia diagnostica può rivelare la verità se vi è difficoltà nel fare la diagnosi e se la laparoscopia non è disponibile.

Cambiamenti esterni e istopatologici

Monitoraggio del paziente
In un gatto affetto da VIPK è necessario controllare l'accumulo di essudato nella cavità pleurica.

Prevenzione

Il vaccino intranasale MLV contro la FTI è disponibile in commercio. Tuttavia, l’efficacia di questo vaccino è bassa, pertanto non è possibile fare affidamento interamente su di esso per il controllo della VTI.
Il principale metodo di trasmissione del FPV è dai gatti portatori asintomatici del virus ai gattini all'età di 5-7 settimane, quando l'immunità colostrale inizia a indebolirsi. Pertanto, è consigliabile lo svezzamento precoce dei gattini a 4-5 settimane di età con l'allevamento dei gattini isolati contatto diretto con altri gatti comprese le madri, interromperà il ciclo di trasmissione del virus dalla madre alla prole.
La disinfezione sistematica dell'habitat del gatto e dei prodotti per la cura e l'alimentazione inattiva rapidamente il virus e riduce il rischio di trasmissione da gatto a gatto.
Solo anticorpi FCoV gatti negativi dovrebbero essere introdotti in un allevamento o in una colonia di gatti come garanzia dell’indipendenza dell’organismo dal virus. La vaccinazione può rendere i gatti positivi agli anticorpi e può rendere difficile il controllo del virus nella popolazione.

Possibili complicazioni
Per il versamento pleurico, la toracentesi è necessaria come trattamento.

Corso previsto e previsioni
VPK può innescare la manifestazione Segni clinici nel giro di pochi giorni o diversi mesi. La prognosi è fatale dopo la comparsa dei segni tipici dell'infezione da IPV, raggiungendo una mortalità del 100%.

I segni clinici si manifestano tipicamente in questa malattia.

Tensione ridotta sull'ECG, attenuazione dei complessi e bassa ampiezza.
Rumori cardiaci ovattati
Tachicardia, aumento della frequenza cardiaca
Allungamento addominale
Anoressia, riduzione o perdita di appetito
Ascite
Diminuzione del volume fecale, stitichezza, assenza di feci
Diarrea
Disfagia
Epatosplenomegalia, splenomegalia, epatomegalia
Polifagia, appetito eccessivo
Posizionamento propriocettivo anormale
Atassia, incoordinazione, cadute
Cianosi
Disidratazione
Dismetria, ipermetria, ipometria
Intolleranza all'esercizio fisico
Febbre
Zoppia degli arti anteriori
Diagnostica generalizzata
Debolezza generalizzata
Debolezza alla testa, al collo, paresi, paralisi
Emiparesi
Zoppia arti posteriori
Masse addominali
Mancanza di crescita
Linfoadenopatia
Opistotono
Pelle e mucose pallide
Polidipsia
Gonfiore nella zona del prepuzio, dei testicoli, del pene, dello scroto
Tetraparesi, debolezza, paralisi di 4 arti
Tremore, tremore, fascicolazione
Perdita di peso
Comportamento anomalo, aggressività, cambiamento delle abitudini
Riflessi anormali degli arti anteriori, aumentati o diminuiti
Riflessi anormali degli arti posteriori, aumentati o diminuiti
Vorticoso
Disorientamento, perdita di memoria
Stupidità, depressione, letargia
Delirio, delirio, mania, agitazione
Ipoestesia degli arti anteriori, anestesia
Inclinare la testa

Iperestesia, iperattività
Ipertensione muscolare, miotonia
Ipotensione muscolare
Propulsione, fermentazione senza scopo
Convulsioni o svenimenti, convulsioni, collasso
Tremore
Riflesso pupillare anormale alla luce
Riflettività retinica anormale
Dimensioni anormali dei vasi retinici
Anisocoria
Blefarospasmo
Cecità
Chemosi, gonfiore della congiuntiva, della cornea
Vascolarizzazione anormale della congiuntiva e della cornea
Arrossamento della congiuntiva, cornea
Edema corneale
Panno
Ifema, "occhio nero"
Ipopion
Strappo
Miosi, contrazione della pupilla
Midriasi, dilatazione della pupilla
Nistagmo
Opacizzazione del vitreo
Atrofia ottica, riduzione delle dimensioni del nervo ottico
Secrezione purulenta dagli occhi
Distacco delle fibre
Pieghe e protuberanze sulla retina
Emorragie retiniche
Sinechia
Mal di schiena
Dolore al collo
Dolore da pressione esterna sull'addome
Dimensioni anomale dei testicoli
Tosse
Attenuazione dei suoni polmonari
Dispnea
Tachipnea
Secrezione nasale mucosa, sierosa, acquosa
Secrezione nasale purulenta
Pelliccia ruvida e incolta
Glicosuria
Chetonuria
Poliuria

Trattamento

A seconda della gravità della malattia, l'animale deve essere sottoposto a cure ospedaliere o ambulatoriali e al desiderio e alla capacità dei proprietari di fornire un buon trattamento di supporto.

Attività
L'attività dell'animale deve essere ridotta per ridurre la diffusione del virus ad altri gatti.

Dieta
L'anoressia e la perdita di peso sono i principali problemi della FIP. Qualsiasi dieta che incoraggi l'animale a mangiare è la benvenuta.

Formazione del proprietario
Discutere i vari aspetti del WIPC. Inclusa una prognosi fatale al momento della diagnosi finale.

Aspetti chirurgici
NO

Farmaci

Non esistono farmaci per trattamento efficace VIPK. I gatti con infezione generalizzata da PVD muoiono quasi sempre.
I farmaci immunosoppressori come il prednisolone e la ciclofosfamide sono stati utilizzati con scarso successo. I corticosteroidi come iniezioni sottocongiuntivali sono efficaci solo per le manifestazioni oftalmologiche della malattia.
Gli interferoni, sebbene efficaci in vitro, hanno successo limitato nel trattamento dell’HIPC. Si stima che l'interferone ricombinante abbia avuto un certo successo nel trattamento della FIP in Giappone.
Gli antibiotici non sono efficaci perché le infezioni batteriche secondarie non fanno parte della manifestazione clinica della malattia.

Controindicazioni
NO

Avvertenze
NO

Possibili interazioni
NO

Droghe alternative
Non efficace farmaci antivirali contro VPK.

Previsione
Il WIPC è in corso manifestazione clinica nel giro di pochi giorni o diversi mesi. La prognosi è fatale quando compaiono i segni clinici caratteristici, la mortalità è del 100%.

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è un metodo diagnostico molecolare che è diventato il “gold standard” per molte infezioni, testato nel tempo e accuratamente testato clinicamente. L'elevata sensibilità e specificità del metodo consentono di rilevare in modo affidabile singoli agenti patogeni nel materiale biologico in base alla loro informazioni genetiche. La sensibilità analitica della PCR per la maggior parte dei virus e dei batteri è di 1000 microrganismi per 1 ml di campione. Specificità della PCR per virus virali, clamidia, micoplasmi e molti altri infezioni batteriche raggiunge il 100%.

Il metodo PCR è stato sviluppato relativamente di recente, ma ora ha assunto una posizione di primo piano nella diagnostica di laboratorio sia medica che veterinaria delle malattie infettive e malattie invasive. I principi di base della PCR furono scoperti nel 1983 dal chimico americano Carey B. Mullis, per il quale gli fu assegnato il Premio Nobel.

L'analisi PCR consiste di diverse fasi. La prima fase - preparazione del campione - consiste nel trattamento del materiale in esame (preparazione di una sospensione, centrifugazione). Nella seconda fase, il materiale ereditario - DNA o RNA - viene isolato dalle cellule. In questo caso, dopo la lisi cellulare e la distruzione del complesso DNA-proteina, il DNA o l'RNA vengono depositati sul sorbente e quindi trasferiti nel tampone di eluizione. Nella terza fase viene effettuata l'amplificazione, ovvero il numero di sezioni specifiche del DNA viene moltiplicato. A questo scopo vengono utilizzati sistemi di test che includono primer: oligonucleotidi specifici per ciascun agente patogeno. I campioni e i controlli vengono aggiunti alla miscela PCR versata in microprovette, che vengono posizionate in un termociclatore o termociclatore, un termostato programmabile con alta velocità e precisione della temperatura impostata. Il processo di amplificazione consiste di tre fasi: denaturazione, ricottura ed allungamento. Quando vengono rilevati virus a RNA in campioni clinici, l'amplificazione è preceduta da una fase di trascrizione inversa in cui l'RNA viene convertito in DNA utilizzando l'enzima trascrittasi inversa, o reversetasi. La quarta fase della diagnostica PCR consiste nel rilevamento elettroforetico dei prodotti della PCR: gli ampliconi. In questo caso, i prodotti della PCR vengono posti nei pozzetti di un gel di agarosio ed esposti a costante corrente elettrica, facendo sì che la molecola di DNA caricata negativamente si sposti verso l'elettrodo positivo. Il gel contiene bromuro di etidio che, formando un complesso stabile con il DNA, rende queste bande chiaramente visibili se osservate sotto irradiazione ultravioletta(Fig. 1).

Riso. 1. Fasi della PCR

Va notato che per ottenere un risultato affidabile dell'analisi PCR una condizione necessariaè il rispetto delle regole per la selezione, conservazione e trasporto del materiale clinico. Nonostante la PCR sia un metodo molto sensibile, è auspicabile che nel campione sia presente una certa quantità di agente patogeno.

Prelievo di materiale per la ricerca sulla PCR deve essere effettuata con guanti monouso privi di talco (poiché il talco inibisce la PCR). Quando si effettuano raschiature e lavaggi, è opportuno utilizzare sonde sterili monouso ad assorbimento maggiorato (con uno spazzolino all'estremità), poiché assorbono quantità ottimale Materiale.

Raschiature e lavaggi dalle mucose del naso, della cavità orale, della vagina, della congiuntiva, vengono raccolti in microtubi di plastica usa e getta - provette Eppendorf - con un volume di 1,5 ml, in cui vengono versati 0,5 ml di soluzione salina sterile. Si consiglia di non utilizzare sonde con punte in cotone. Dovresti anche evitare di rompere la punta della sonda nella provetta. soluzione salina, poiché ciò complica l'ulteriore elaborazione e aumenta il rischio di contaminazione incrociata dei campioni. Per ottenere la quantità di materiale richiesta è sufficiente ruotare la sonda nella provetta per 1-2 minuti, evitando schizzi di liquido. Il campione dovrebbe avere un aspetto torbido e, una volta sedimentato, dovrebbe formarsi un piccolo precipitato.

Raccolta del sangue effettuato con un ago monouso in una siringa monouso o in una provetta di vetro senza anticoagulante. Quando viene aspirato in una siringa, il sangue da essa viene trasferito con cura (senza formazione di schiuma) in un tubo di vetro monouso. È possibile utilizzare sistemi di vuoto (“Vacuette”) per il prelievo del sangue. Per la ricerca è possibile fornire siero sanguigno: le provette con il sangue possono essere depositate temperatura ambiente per 30 minuti fino alla completa formazione del coagulo, quindi centrifugato a 3mila giri per 10 minuti e trasferito in una quantità di almeno 1 ml in provette Eppendorf sterili con un volume di 1,5 ml.

sperma raccolti in provette o fiale sterili monouso.

Urina. Raccogliere la prima porzione di urina del mattino in una quantità di almeno 20-40 ml in una bottiglia o provetta sterile e asciutta.

Feci. I campioni del peso di 1-3 grammi vengono prelevati da un vassoio pre-disinfettato e lavato e trasferiti in un flacone sterile con spatole monouso.

Pezzi di organi colpiti dagli animali morti vengono raccolti in contenitori sterili usa e getta o in contenitori puliti di vetro o plastica.

Le condizioni di temperatura per la conservazione e il trasporto del materiale selezionato devono essere rigorosamente rispettate. Il trasporto viene effettuato in un contenitore termico con elementi refrigeranti o in un thermos con ghiaccio. Se il materiale viene conservato per più di un giorno, deve essere congelato a T meno 20°C.

Le malattie più comuni nei cani e nei gatti sono la congiuntivite, la rinotracheite e l'enterite. Per scoprire l'eziologia della malattia, è necessario condurre una diagnostica di laboratorio di alta qualità.

La congiuntivite o le infezioni delle vie respiratorie superiori nei gatti possono essere causate dall'infezione dei seguenti microrganismi: herpesvirus di tipo 1 (FHV1), calicivirus felino, Chlamediapcittaci. Mycoplasma felis, Bordetella bronchiseptica, Reovirus felino, Staphylococcus aureus, Streptococco broemolitico e Salmonella tephimurium.

La causa più comune, secondo diversi autori e metodi di ricerca, sono il virus dell'herpes di tipo FHY1 (dal 10% al 34%) e il calicivirus felino (dal 20% al 53%). Chlamydia pcttaci (dal 10% al 35%).

Infezione da virus dell'herpes, è associata ad aborti, elevata mortalità neonatale (infezione in quasi il 60% dei casi) con segni di polmonite interstiziale.
Il calicivirus è grave nei gattini, mentre il 25-80% degli animali adulti guariti diventa portatore e costituisce una fonte di infezione, trasmettendo il virus attraverso la saliva.

Panleucopenia- una malattia virale contagiosa dei gatti, caratterizzata da un forte calo del livello dei leucociti, gastroenterite, rinite con congiuntivite, elevata mortalità (30-90% dei gattini malati).

Una vera piaga per gli asili nido è peritonite infettiva felina - grave malattia, il cui agente eziologico è un virus altamente patogeno contenente RNA. Il virus si replica nelle tonsille e negli enterociti intestino tenue, dissipandosi in tutto il corpo attraverso macrofagi e monociti. I coronavirus a bassa virulenza provocano enteriti gravità moderata, più spesso nei gattini dopo lo svezzamento. Il coronavirus altamente virulento può portare allo sviluppo di peritonite secca o effusionale. La peritonite è spesso accompagnata da insufficienza renale, sintomi epatici e neurologici.

Quando infetto adenovirus entrambi i tipi e virus peste canina i cani presentano un complesso generale di sintomi: febbre, congiuntivite e rinotracheite, disturbi del tratto gastrointestinale e danni al sistema nervoso.

A piaga dei carnivori I segni clinici possono includere secrezione sieromucosa nasale e congiuntivale, tosse, dispnea, polmonite, vomito e diarrea, nonché febbre e ipercheratosi.

Adenovirus carnivoro. L'agente eziologico è un adenovirus carnivoro contenente DNA di tipo 1 (causa l'epatite infettiva dei carnivori) e di tipo 2 (causa l'adenovirus canino). Si osservano febbre, apatia, anoressia, sete, vomito e diarrea, dolore parete addominale alla palpazione. Talvolta si sviluppano congiuntivite, cheratite e fotofobia. Possono verificarsi emorragie puntiformi sulla mucosa e sulla pelle. Raramente osservato disordini neurologici.

Tutte queste malattie hanno un alto indice di contagiosità e sono associate ad un'elevata mortalità tra i cuccioli, a partire dal Enterite da parvovirus Il 10-50% dei cuccioli malati muore; quando i cuccioli non vaccinati vengono infettati dal virus del cimurro, il tasso di mortalità raggiunge il 100%.

Toxoplasmosi. L'agente eziologico è il protozoo Toxoplasma gondii. L'agente patogeno si moltiplica nei gatti sulle pareti intestinali. Vengono escreti con le feci ambiente esterno oocisti.

Le cisti tissutali possono causare anoressia, depressione, cheratite, ittero, vomito, diarrea e sintomi neurologici a seconda degli organi colpiti. Nei cani i sintomi clinici dipendono dagli organi colpiti: si possono osservare disturbi neurologici (tremore, atassia, paralisi) o miosite da toxoplasmosi (disturbi dell'andatura, atrofia muscolare, rigidità), nonché miocardite ed epatite.

Clamidia e psittacosi. Agenti patogeni nei gatti - Chlamydophila feltri, nei cani - Chlamydophila abortus, cap. pecorum, in entrambi i casi la malattia può essere causata dal cap. psittaci. Negli uccelli - cap. psittaci.
Nei gatti la malattia si manifesta principalmente sotto forma di congiuntivite purulenta e non purulenta e si possono osservare anche riniti, polmoniti, vaginiti, aborti e infertilità; La congiuntivite neonatale da clamidia si verifica nei gattini. I sintomi nei cani variano e variano malattie infiammatorie congiuntiva, genitali, gastrite, artrite, aborto e infertilità. Esistono prove del ruolo della clamidia nella patogenesi dell'aterosclerosi nei cani.

Micoplasmosi. Gli agenti patogeni sono microrganismi del genere Mycoplasma. Si manifesta con segni di broncopolmonite, cheratocongiuntivite e cheratite.

Virus Immunodeficienza sonnolenta nei gatti. L'immunodeficienza felina è una malattia grave causata da un virus della famiglia Retrovoridae, genere Lentivirus. Il virus attacca il sistema immunitario e nervoso. Ha tropismo per i linfociti T. Come risultato dell’immunosoppressione, il corpo diventa indifeso contro batteri, funghi, virus e muore a causa di un’infezione secondaria.
I segni clinici si sviluppano lentamente e la malattia viene segnalata più spesso nei gatti di età compresa tra 6 e 10 anni.

Malattie come la leptospirosi canina, la listeriosi nei cani e nei gatti, la yersiniosi nei cuccioli, la brucellosi, l'enterite da rotavirus e la rabbia si riscontrano anche negli animali domestici.

La correttezza dell'analisi PCR e l'isolamento di alta qualità dell'infezione dipendono, innanzitutto, dalla correttezza del prelievo del materiale e, in secondo luogo, dalla conformità regime di temperatura conservazione e trasporto dei campioni. Un campione ricevuto dal laboratorio viene registrato, passa attraverso tutte le fasi della PCR, viene sottoposto a rilevazione elettroforetica e quindi produce il risultato finale.

Pertanto, l'elevata sensibilità e specificità del metodo PCR consente di rilevare in modo affidabile singoli agenti patogeni nel materiale biologico in un breve periodo di tempo, il che rende possibile effettuare una diagnosi accurata, prescrivere un trattamento adeguato e sviluppare misure preventive.

LORO. Donnik, membro corrispondente dell'Accademia russa delle scienze agrarie, dottore in scienze biologiche, professore, N.A. Pelevina, ricercatore junior, O.G. Bodrova, ricercatrice junior,
Istituto scientifico statale Istituto veterinario di ricerca statale degli Urali dell'Accademia russa delle scienze agrarie