Corinebacterium difterite. Coltura per la difterite (Corynebacterium diphtheriae)

Il genere Corynebacterium diphtheriae comprende il patogeno diphtheriae e i corinebatteri opportunisti. pseudodiphtheria corynebacteria C. pseudodiphtheriticum, C. xerosis e C. ulcerans, che vivono nel corpo umano.

Corynehactcrium diphtheriae fu scoperto nel 1883 da E. Clsbs. isolato nel 1884 da F. Leffler.

Morfologia, culturale, proprietà biochimiche. I corinebatteri difterite sono bastoncini gram-positivi sottili, leggermente ricurvi, lunghi 1-5 µm, non formano flagelli, spore o capsule; Caratteristiche morfologiche caratteristiche di questi batteri: ispessimenti a forma di mazza alle estremità in cui si trovano i grani di volutin, la disposizione dei bastoncini nello striscio di iodio ad angolo l'uno rispetto all'altro, sotto forma della lettera V. I grani di volutin vengono rilevati mediante colorazione con il blu di Leffler (si colorano più intensamente del corpo del batterio) o secondo Psysser (si colora il corpo del batterio giallo, grani a voluta - blu scuro) (inserto a colori, Fig. 34).

Anaerobio facoltativo. Temperatura ottimale per crescita 37°C, pH 7,6. Cresce su terreni nutritivi speciali: su terreno elettivo - siero di latte coagulato, su terreno di Clauberg. contenente siero di latte coagulato e tellurito di potassio. A seconda delle proprietà biologiche, si distinguono i biovarianti dei bacilli difterici: i bacilli biovar gravis formano grandi colonie grigie sul terreno di Clauberg con bordi irregolari, striature radiali, che ricordano un fiore di margherita; biovar mitis: colonie piccole, nere, convesse con bordi lisci; intermedius - colonie di tipo intermedio. Il tipo gravis ha la maggiore virulenza. La crescita sul siero di latte arrotolato smussato è caratteristica: anche con semina abbondante, non si forma una crescita continua, le colonie non si uniscono, la crescita ricorda una strada di ciottoli o una pelle di shagreen.

Differenze nelle proprietà enzimatiche singole specie i corinebatteri vengono utilizzati nella loro differenziazione (Tabella 10).

Antigeni. Sulla base dell'antigene O, C. diphtheriae è divisa in 11 sierotipi. Fattori di patogenicità. La proprietà principale dell'agente eziologico della difterite

Tossigenicità. L'esotossina del bacillo della difterite provoca una reazione infiammatoria locale e un'intossicazione generale del corpo con danni alle ghiandole surrenali, al miocardio, sistema nervoso. Esistono ceppi tossigeni e non tossigeni di C. diphtheriae. La difterite è causata da ceppi tossigeni. La capacità di produrre esotossina è associata alla presenza nella cellula di un profago portatore del gene tox+, responsabile della sintesi della tossina.

La forza della tossina è misurata in Dim, la quantità più piccola di tossina che uccide una cavia del peso di 250 g entro 3-4 giorni. La tossina di tutti i bacilli della difterite è antigenicamente identica; non esistono sierotipi.

Oltre alla tossina, il Corynebacterium diphtheria produce enzimi: ialuronidasi, neuraminidasi, fibrinolisina, che ne garantiscono la distribuzione nei tessuti, ma la batteriemia non si manifesta clinicamente.

Sostenibilità. I bacilli della difterite sono resistenti all'essiccazione e alle basse temperature. Quando i giocattoli per bambini entrano nei piatti con saliva e pellicole, possono rimanere lì per molto tempo. Sono sensibili ai disinfettanti e muoiono immediatamente quando vengono bolliti.

Malattia negli esseri umani. La fonte dell'infezione sono i malati e i portatori. La principale via di trasmissione sono le goccioline trasportate dall'aria, ma è possibile anche il contatto e il contatto domestico, attraverso piatti e giocattoli. Le malattie si verificano in individui che non hanno l’immunità antitossica. Nelle persone che hanno l'immunità antitossica, in assenza di immunità antimicrobica contro la difterite corinebatterica, può svilupparsi il trasporto di questi agenti patogeni, localizzati sulla mucosa della faringe o del naso.

Il periodo di incubazione della malattia è di 2-10 giorni. Nel sito di penetrazione si sviluppa un'infiammazione e si forma un film difterico. L'esotossina entra nel sangue e si sviluppa la tossinemia. Forme cliniche difterite: difterite della faringe (85-90% dei casi), del naso, della laringe, degli occhi, dei genitali esterni, della pelle, delle ferite, ecc.

Immunità. Dopo la malattia abbiamo una forte immunità antitossica, ma casi ripetuti sono ancora osservati. Il livello di antitossina nel sangue può essere determinato utilizzando RNGA con un diapausticum eritrocitario contenente eritrociti su cui è adsorbito il tossoide difterico.

Diagnostica di laboratorio. La diagnosi precoce è importante per poter iniziare tempestivamente il trattamento. Il materiale per la ricerca viene prelevato dalle aree interessate utilizzando due tamponi di cotone sterili. Durante il test per la portabilità, viene prelevato il muco dalla gola e dal naso. È molto importante inviare immediatamente il materiale al laboratorio.

Uno dei tamponi viene utilizzato per la coltura e con l'altro tampone vengono realizzati gli strisci esame microscopico, ma raramente darà un risultato positivo. La cosa principale è uno studio batteriologico: inoculazione su una piastra con un mezzo nutritivo, esame delle colonie coltivate: strisci, studio della morfologia, determinazione della tossigenicità mediante precipitazione in agar con siero antitossico. La specie C. diphhlheriae è determinata dalle proprietà biochimiche. I risultati dello studio batteriologico indicano: “è stato isolato C. diphtheriae tossigenico” o “è stato isolato C. diphtheriae non tossigenico”. Poiché l'efficacia del trattamento dipende dal più presto possibile, viene utilizzato metodo accelerato rilevamento della tossina difterica direttamente nel materiale di prova utilizzando la reazione di ritardo RIGA. Principio di reazione: il materiale da testare in diverse diluizioni viene aggiunto ad una certa quantità di siero antitossico, quindi viene aggiunto un kit diagnostico per eritrociti contenente il tossoide difterico. Nel controllo (senza materiale di prova), il siero antitossico provoca l'agglutinazione degli eritrociti. Se il materiale del test contiene una tossina, questa si combina con il siero e provoca la ritenzione di PHHA.

Farmaci preventivi e terapeutici. L'importanza principale nella prevenzione della difterite è l'immunizzazione attiva, che viene effettuata, a partire dall'età di tre mesi, con un vaccino contenente il tossoide difterico: DTP, ADS. In futuro, la rivaccinazione verrà effettuata sui bambini e poi sugli adulti. Le controindicazioni alle vaccinazioni sono molto limitate.

Esistono vaccini con un contenuto ridotto di antigeni: DTP-m, ADS-m, AD-m. utilizzato per l'immunizzazione di persone per le quali la dose completa di vaccino è controindicata.

Per il trattamento dei pazienti è molto importante la sieroterapia specifica precoce con siero difterico antitossico utilizzando dosi dipendenti dalla localizzazione del processo. Il siero viene somministrato utilizzando il metodo Bezredka. Allo stesso tempo viene effettuata la terapia antibiotica (benzilpenicillina, eritromicina, rifampicina, ecc.).

Altri corinebatteri

Corinebacterium vaginale. CON. vaginale è isolato da donne sane e da vaginiti associate a batteri anaerobici. Il metronidazolo è usato per trattare la vaginite.

MICOBATTERI

Il genere Mycobacterium comprende rappresentanti patogeni: agenti patogeni della tubercolosi, agenti patogeni della micobatteriosi non tubercolare, agenti patogeni della lebbra, nonché un gran numero di saprofiti e specie opportunistiche, per esempio. M. smegmatis è un abitante dei genitali esterni, M. phlei è un abitante di oggetti ambientali.

1. CORINEBATTERI

Al genere Corynebacterium appartengono batteri che presentano ispessimenti clavati alle estremità: corinebatteri, patogeni per l'uomo e gli animali, e difteroidi (corinebatteri non patogeni ed opportunistici).

L'agente eziologico della difterite

La scoperta dell'agente eziologico della difterite è stata preceduta da approfonditi studi clinici, patologici, epidemiologici ed studi sperimentali, che aprì in gran parte la strada alla sua scoperta (Klebs E., 1883), isolamento in coltura pura (Leffler F., 1884), produzione della tossina (Ru E. e Yersen A., 1888), siero antitossico (Bering E , Kitazato, 1890, Ru E., 1894) e il tossoide difterico (Ramon G., 1923).

Morfologia. Difterite corinebatteri - Corynebacterium diphtheriae (lat. soguna club, diphthera - pellicola, pelle) bastoncini diritti o leggermente ricurvi lunghi 1-8 micron e larghi 0,3-0,8 micron, polimorfi, meglio colorati ai poli su cui si trovano granuli metacromatici di volutina (Babes granules ) si trovano Ernst, polimetafosfati) Nei corinebatteri della difterite si osservano ispessimenti clavati alle estremità contenenti grani di volutina, talvolta compaiono forme ramificate e filamentose, nonché brevi formazioni, quasi coccoidi e simili a lieviti. Nei tratti sono disposti a forma di V (ad angolo), assumendo la forma di dita allargate. Non formano spore, capsule o flagelli e sono Gram-positivi.

Coltivazione. L'agente eziologico della difterite è un aerobio o un anaerobio facoltativo, ben coltivato su terreni contenenti proteine ​​(siero di latte coagulato, agar sangue, agar siero di latte), nonché su brodo di zucchero. Su Ru medio (crollato siero di cavallo) e terreno di Leffler (3 parti di siero di latte bovino + 1 parte di brodo di zucchero), i corinebatteri della difterite si sviluppano entro 16-18 ore, la loro crescita ricorda la pelle di shagreen, le colonie non si fondono tra loro.

Secondo culturale e proprietà biologiche Il Corynebacterium diphtheria è diviso in tre biovarianti gravis, mitis e intermedius, che differiscono tra loro per numerose caratteristiche.

Corynebacterium biovar gravis su agar tellurito contenente sangue defibrinato e tellurito di potassio forma colonie grandi, ruvide (a forma di R) a forma di rosetta di colore nero o grigio. Fermentano la destrina, l'amido e il glicogeno, formano una pellicola superficiale e un sedimento granulare nel brodo, sono generalmente altamente tossici e hanno proprietà invasive più pronunciate.

Il Corynebacterium biovar mitis cresce su agar tellurio con la formazione di colonie scure, lisce (a forma di S) lucenti. Non fermentano l'amido e il glicogeno, fermentano la destrina in modo incoerente, provocano l'emolisi degli eritrociti di tutte le specie animali e nel brodo si osserva una torbidità diffusa. Le colture di questo tipo sono generalmente meno tossigene e invasive rispetto al Corynebacterium biovar gravis.

Il Corynebacterium biovar intermedius occupa una posizione intermedia. Le loro colonie su agar tellurito sono piccole (forma RS), nere, non fermentano l'amido e il glicogeno e crescono nel brodo con l'aspetto di torbidità e sedimento granulare.

Proprietà enzimatiche. I corinebatteri della difterite (tutti e tre i biovar) non coagulano il latte, non decompongono l'urea, non emettono indolo, formano debolmente idrogeno solforato, riducono i nitrati in nitriti, così come il tellurito di potassio in solfuro di tellurito, a seguito del quale le colonie di difterite i corinebatteri su agar tellurito diventano neri o grigi.

I corinebatteri della difterite fermentano il glucosio e il maltosio e occasionalmente galattosio, amido, destrina e glicerolo.

I batteri della difterite fermentano la cisteina per produrre idrogeno solforato e non decompongono l'urea, mentre i batteri della difterite scompongono l'urea ma non fermentano la cisteina.

I corinebatteri della difterite producono batteriocine (corinecine), che conferiscono loro alcuni vantaggi selettivi.

Formazione di tossine. I corinebatteri della difterite producono forti esotossine (istotossina, dermonecrotossina, emolisina) nelle colture in brodo. La tossigenicità del Corynebacterium diphtheria è associata alla lisogenicità (la presenza di profagi temperati nei ceppi tossigenici). Anche il classico ceppo di riferimento internazionale Park-Williams 8, produttore di esotossine, è lisogenico e conserva la capacità di produrre tossine da più di 85 anni. I determinanti genetici della tossigenicità (tox + geni) sono localizzati nel genoma del profago integrato con il nucleoide del Corynebacterium diphtheria.

Come risultato della lisogenizzazione, i ceppi non tossigeni di C. diphtheriae (biovar mitis) si trasformano in ceppi tossigeni ( conversione tossigenica).

La tossina difterica è un polipeptide termostabile costituito da due frammenti chiamati A e B. Il frammento B è necessario per trasportare il frammento A nella cellula, dove inibisce l'allungamento della catena polipeptidica sul ribosoma. L’inibizione della sintesi proteica probabilmente fornisce entrambi effetto tossico la tossina difterica è necrotica e neutrotossica.

La tossina della difterite è instabile. Si distrugge facilmente sotto l'influenza della temperatura, della luce e dell'ossigeno atmosferico, ma è relativamente resistente agli ultrasuoni.

Dopo aver aggiunto alla tossina lo 0,3-0,4% di formaldeide e averla mantenuta a 38 - 40 °C per 3-4 settimane, questa si trasforma in tossoide difterico, che è più resistente alle aggressioni fisiche e influenze chimiche rispetto alla tossina originale.

I ceppi tossigeni dei corinebatteri della difterite, insieme alla lisogenicità, sono caratterizzati da una pronunciata attività deidrogenasi e neuraminidasica, mentre i ceppi non tossigeni non hanno tale attività.

Struttura antigenica. Mediante una reazione di agglutinazione sono stati identificati 11 sierotipi dell'agente eziologico della difterite.

Le tossine prodotte dai diversi ceppi di gravis e mitis biovar non differiscono l'una dall'altra e sono completamente neutralizzate dall'antitossina difterica standard. Numerosi autori hanno stabilito la presenza di antigeni proteici di superficie termolabili specifici per variante (antigeni K) e antigeni polisaccaridici somatici termostabili gruppo-specifici nel Corynebacterium diphtheria.

Tra Corynebacterium diphtheria ci sono 19 fagotipi, con l'aiuto dei quali vengono identificate le fonti di infezione; i fagotipi vengono presi in considerazione anche quando si identificano le colture isolate.

Resistenza. I corinebatteri della difterite sono relativamente resistenti agli effetti dannosi dei fattori ambientali. Rimangono vivi nel siero di latte coagulato fino a 1 anno, a temperatura ambiente fino a 2 mesi e sui giocattoli dei bambini fino a diversi giorni. I corinebatteri persistono per un periodo piuttosto lungo nelle pellicole dei pazienti affetti da difterite, soprattutto se le pellicole non sono esposte alla luce. Se esposti ad una temperatura di 60 °C e ad una soluzione di fenolo all'1%, i corinebatteri muoiono entro 10 minuti.

Patogenicità per gli animali. IN condizioni naturali Corinebatteri virulenti della difterite sono stati trovati in cavalli, mucche e cani, probabilmente infettati da pazienti umani e portatori. Tuttavia, gli animali domestici non svolgono un ruolo come fonti di infezione umana.

Tra gli animali da laboratorio, i porcellini d'India e i conigli sono i più sensibili. Quando vengono infettati da una coltura o da una tossina, sviluppano un quadro tipico di infezione tossica con formazione di infiammazione, edema e necrosi nel sito di iniezione. Organi interni iperemico, si osservano emorragie nelle ghiandole surrenali. Una dose di 0,06 mcg di tossina uccide una cavia del peso di 250 g.

Patogenesi della malattia nell'uomo. La fonte dell'infezione sono i pazienti con difterite e portatori. La malattia si trasmette da goccioline trasportate dall'aria, a volte con particelle di polvere; la trasmissione è possibile anche attraverso oggetti vari (giocattoli, stoviglie, libri, asciugamani, sciarpe, ecc.), prodotti alimentari(latte, vari piatti freddi, ecc.) infetti da corinebatteri della difterite.

Nell'epidemiologia della difterite grande ruolo i portatori giocano. In media, il numero di portatori tra soggetti convalescenti e sani varia dal 3 al 5%.

La più alta incidenza della difterite si osserva in autunno, il che si spiega con l'aumento dell'affollamento dei bambini in questo periodo dell'anno e con la diminuzione della resistenza del corpo sotto l'influenza del raffreddamento.

A causa della presenza di un fattore di diffusione, i corinebatteri della difterite hanno la capacità di penetrare nel sangue e nei tessuti di persone malate e animali infetti. Il fattore di diffusione è un enzima ialuronidasi che ha la capacità di scomporre l'acido ialuronico. I fattori di invasività comprendono la neuraminidasi, il fattore necrotico e la fibrinolisina.

Nella patogenesi della difterite, il ruolo principale è svolto dall'istotossina, che blocca la sintesi proteica nelle cellule dei mammiferi e inattiva l'enzima transferasi responsabile della formazione della catena polipeptidica.

Esperimenti clinici e su animali hanno dimostrato l'influenza degli stafilococchi e degli streptococchi patogeni sullo sviluppo della malattia, che aumentano significativamente la gravità dell'infezione.

Nell'uomo, nel sito di ingresso dell'agente patogeno della difterite (gola, naso, trachea, congiuntiva degli occhi, pelle, vulva vaginale, superficie della ferita), si formano film con un gran numero di corinebatteri della difterite e altri microbi. L'esotossina prodotta provoca necrosi e infiammazione difterica delle mucose o della pelle quando viene assorbita, colpisce le cellule nervose, il muscolo cardiaco e organi parenchimali, provoca fenomeni di grave intossicazione generale.

Profondi cambiamenti si verificano nel muscolo cardiaco, nei vasi sanguigni, nelle ghiandole surrenali, nonché nel sistema nervoso centrale e periferico. Pertanto, evidenziano tre punti di applicazione tossina difterica nel corpo: miocardio(sviluppo di miocardite difterica tossica), ghiandole surrenali(diminuzione del tono vascolare e pressione sanguigna a causa della ridotta produzione di adrenalina) sistema nervoso(sviluppo di paralisi e paresi).

Secondo la localizzazione del processo, si osservano più spesso difterite della faringe e difterite della groppa (difterite della laringe), quindi difterite del naso. La difterite degli occhi, delle orecchie, dei genitali, della pelle e delle ferite è relativamente rara. La difterite faringea rappresenta oltre il 90% di tutte le malattie, mentre la difterite nasale occupa il secondo posto.

La morte per difterite della laringe può essere dovuta ad asfissia, soffocamento, perché anche un piccolo film difterico può bloccare completamente la glottide. Con la difterite della faringe, la maggior parte dei decessi è associata a danni cardiaci dovuti a intossicazione.

Immunità. Nella difterite, l'immunità dipende principalmente dal livello di antitossina nel sangue. Tuttavia non è possibile escludere un certo ruolo del complesso antibatterico associato alla fagocitosi e alla presenza di opsonine, agglutinine, precipitine e sostanze fissatrici del complemento. L’immunità per la difterite è di natura anti-infettiva (antitossica e antibatterica).

Esempio chic. La presenza di immunità antitossica anti-difterite può essere rilevata utilizzando la reazione di Schick. 1/40 Dlm di tossina di cavia in un volume di 0,2 ml viene somministrato per via intradermica ai bambini nell'avambraccio. Con una reazione positiva, che indica l'assenza di immunità antitossica, nel sito di iniezione compaiono arrossamento e gonfiore con un diametro fino a 2 cm dopo 24-48 ore. Una reazione di Schick positiva si verifica in assenza di antitossina o di una piccola quantità di essa nel siero del sangue. Una reazione di Schick negativa è in una certa misura un indicatore di immunità alla difterite.

A causa del fatto che l'esotossina difterica provoca uno stato di sensibilizzazione e provoca lo sviluppo di gravi complicazioni, la reazione di Schick precedentemente ampiamente utilizzata viene utilizzata in misura limitata.

Per determinare la quantità di antitossine nel sangue, si consiglia una reazione di emoagglutinazione indiretta con eritrociti sensibilizzati con il tossoide difterico.

I bambini di età compresa tra 1 e 4 anni sono più suscettibili alla difterite. Negli ultimi anni si è registrato un aumento relativo dell’incidenza tra le persone di età pari o superiore a 15 anni.

La trasmissione della difterite lascia un'immunità meno forte rispetto ad altre malattie infanzia(morbillo, pertosse). Malattie ripetute la difterite si osserva nel 6 - 7% dei casi.

Trattamento. Il trattamento per la difterite include isolamento malato, severo riposo a letto, appuntamento anticipato antitossina e corrispondente terapia antibiotica. Potrebbe essere necessaria una terapia di supporto come l'intubazione e la ventilazione per l'ostruzione delle vie aeree.

Vengono somministrati pazienti con difterite siero antitossico in dosi da 5000 a 15000 UI a gravità moderata malattie e 30.000-50.000 UI per le forme gravi.

C. diphtheriae è sensibile alla penicillina, alla tetraciclina, alla rifampicina e alla clindamicina. L'eritromicina è preferita alla penicillina per il trattamento della difterite faringea, soprattutto quando si trattano i portatori. Sono stati descritti ceppi resistenti all'eritromicina e alla tetraciclina.

La terapia antibiotica non ha alcun effetto sulla tossina preformata (precedentemente formata), che si diffonde rapidamente dal sito del danno e, se non neutralizzata dall'antitossina, si lega rapidamente alle cellule dei tessuti in modo irreversibile.

trattamento) non dovrebbero attendere la conferma del laboratorio se esiste un forte sospetto clinico, poiché il tasso di mortalità è direttamente correlato al periodo di ritardo prima della somministrazione dell'antitossina, aumentando dallo zero al 20% tra l'inizio della malattia e il giorno 5 dell'infezione, la media il tasso di mortalità è del 5-7%.

Vengono utilizzati anche penicillina, tetracicline, rifampicina, clindamicina, sulfamidici e farmaci cardiaci.

Gli antibiotici sono prescritti per trattare i portatori. Buon risultato prevede l'uso di tetraciclina, eritromicina in combinazione con vitamina C.

Prevenzione. Consiste in diagnosi precoce, ricovero immediato, disinfezione completa dei locali e degli oggetti, identificazione dei portatori.

Prevenzione specifica effettuato da immunizzazione attiva. Esistono diversi vaccini utilizzati per prevenzione specifica difterite: 1) tossoide difterico adsorbito (tossoide AD); 2) tossoide difterico-tetanico adsorbito (tossoide ADS); 3) vaccino adsorbito pertosse-difterite-tetano (vaccino DTP). Tutti questi farmaci vengono utilizzati secondo le istruzioni o le istruzioni.

Va notato che non tutti i bambini immunizzati acquisiscono resistenza alla difterite. In media, il 5-10% di essi rimane suscettibile, o refrattario, cioè incapace di formare anticorpi dopo l'immunizzazione. Questa condizione è il risultato di tolleranza immunologica, agammaglobulinemia o ipogammaglobulinemia.

In precedenza, la difterite era una malattia terribile tra i bambini. In Russia nel 1886-1912. Ogni anno si ammalavano più di 250.000 persone. La mortalità era molto alta, 12-30%.

Grazie all'introduzione della vaccinazione obbligatoria contro la difterite sono stati fatti grandi passi avanti nella lotta contro questa infezione. L'incidenza della difterite nel 1975 rispetto al 1913 è scesa a casi singoli e il tasso di mortalità per difterite è diminuito di oltre 100 volte.

Tuttavia, oggigiorno la difterite è tornata ad essere infezione vera e propria per i paesi ex URSS, anche per l'Ucraina.

Meno spesso - in altri organi e fenomeni di intossicazione (danni al sistema cardiovascolare, corticosurrenale e nervi periferici). Il meccanismo di trasmissione è respiratorio. La fonte dell'infezione sono i pazienti e i portatori di ceppi tossigeni di C. diphtheriae.

Bastoncini polimorfi diritti o leggermente ricurvi (0,3-0,8 x 1,5-8 µm), talvolta con estremità a clava (Corynebacterium dal greco. koryne- Mazza). Disposto a forma di lettera “V”. Gram positivo. Ai poli delle cellule sono visibili granuli di polimetafosfato (granelli di volutin) che presentano metacromasia, cioè sono colorati con blu di metilene o secondo Neisser in un colore diverso da quello del batterio (Fig. 3.87 e 3.88).

Riso. 3.87. Disegno di uno striscio da coltura pura Cdifterite. Colorazione di Neisser

CON.ulcere- una specie di piccoli batteri gram-positivi a forma di bastoncino del genere Corynebacterium. A volte, a causa della presenza di un profago, produce un'esotossina simile alla difterite. I ceppi di C. ulcerans producono anche fosfolipasi D. I rappresentanti della specie sono imparentati con C. diphtheriae. Sono agenti patogeni per il bestiame. Gli esseri umani possono essere infettati attraverso il latte di mucche malate. Causano malattie simili alla difterite, faringite e lesioni cutanee nelle persone con immunodeficienze.

Riso. 3.88. Uno striscio da una coltura pura di S.difterite. Colorazione blu alcalina di Loeffler

Hanno una microcapsula. Immobile. Anaerobi facoltativi. Esistono 4 biovarianti: gravis, mitis, intermedius, belfanti.

Riso. 3,89. Colonie S.difteritegravis(a sinistra) - grande opaco, convesso al centro con striature radiali e bordi irregolari (“margherite”) emitis(a destra) - piccolo, nero, liscio, lucido con bordi lisci

I bacilli della difterite possono essere tossigeni (producendo un'esotossina) e non tossigeni. La formazione di un'esotossina dipende dalla presenza nei batteri di un profago portatore di un gene tox che codifica per la formazione di una tossina. In caso di malattia, tutti gli isolati vengono testati per la tossigenicità - produzione di esotossina difterica (vedi reazione di precipitazione).

Diagnostica microbiologica. Esaminare il muco e la pellicola dalle lesioni. Il metodo batterioscopico ha un valore approssimativo: uno striscio viene colorato con blu di metilene alcalino di Leffler o blu di toluidina con acido acetico, e l'altro striscio è colorato con Gram. I grani di Volutin sono colorati metacromaticamente con blu di metilene colore bordeaux scuro(la cella è colorata Colore blu). Metodo batteriologico: inoculo su terreno Clauberg I, terreno chinosolo di Buchin, terreno Tinsdal modificato (terreno cistina-tellurite-siero), agar sangue, su terreno siero denso per rilevare la produzione di cistinasi (test Pizou - un alone marrone attorno all'inoculazione con una "iniezione ”), su terreno Hiss, su un terreno per la determinazione della tossigenicità del patogeno (precipitazione in gel), ecc. Metodo genetico molecolare: PCR.

Prevenzione specifica. Il tossoide difterico, che fa parte del Farmaci DTP(vaccino adsorbito pertosse-difterite-tetano), ADS e AD. Il farmaco viene somministrato ai bambini a partire dall'età di tre mesi. La rivaccinazione viene effettuata utilizzando l'ADS. Alle persone che erano state precedentemente immunizzate, ma che non hanno un'immunità antitossica sufficientemente forte, viene iniettato il tossoide difterico al contatto con i pazienti. Precedentemente non immunizzato: tossoide difterico + siero antitossico. Quest'ultimo, come nel trattamento, viene somministrato frazionalmente secondo Bezredka (prevenzione shock anafilattico).

Il Corynebacterium diphtheriae fu scoperto e poi isolato in coltura pura 100 anni fa. Il suo significato eziologico definitivo nell'insorgenza della difterite fu confermato diversi anni dopo, quando fu ottenuta una tossina specifica che causò la morte di animali con fenomeni simili a quelli osservati nei pazienti affetti da difterite. Corynebacterium diphtheriae appartiene al genere Corynebacterium, un gruppo di batteri corynefroma. I Corynebacterium diphtheriae sono bastoncini diritti o leggermente ricurvi con estremità allargate o appuntite. La divisione in frattura e scissione fornisce una disposizione caratteristica sotto forma di numero romano V o dita allargate, ma nei tratti si trovano spesso bastoncini posizionati individualmente. Grandi accumuli di essi, che si verificano negli strisci preparati dal muco della gola, del naso e dalle secrezioni della ferita, hanno un carattere simile al feltro. La lunghezza media delle loro aste è di 1-8 micron, la larghezza è di 0,3/0,8 micron. Sono immobili e non formano spore o capsule. Il Corynebacterium diphtheriae è un anaerobio facoltativo. I bacilli della difterite sono resistenti all'essiccazione. A una temperatura di 60 °C in colture pure vengono distrutte entro 45-60 minuti. Nei prodotti patologici, cioè in presenza di protezione proteica, possono rimanere vitali per un'ora alla temperatura di 90°C. Le basse temperature non hanno un effetto dannoso sui bacilli della difterite. Nei disinfettanti a concentrazione normale muoiono rapidamente.

È necessario notare il polimorfismo estremamente ampio dei bacilli difterici, che si manifesta con cambiamenti di spessore e forma (rigonfio, a forma di fiasco, segmentato, filamentoso, ramificato negli ispessimenti terminali, e talvolta nella parte centrale, dopo 12 ore). della crescita della cultura, i grani di Babesh si trovano con una colorazione speciale Ernst, che sono accumuli di volutin. Esistono prove che la volutina è un polifosfato inorganico a catena lunga. M.A. Peshkov suggerisce la loro natura metafosfato. A. A. Imshanetsky ritiene che la volutina sia un sottoprodotto processi metabolici. È noto che il fosforo è necessario per la formazione dei grani. Esistono anche ipotesi sulla necessità di manganese e zinco per questo processo.

I grani di Volutin si trovano nelle colture di un giorno, quindi il numero di batteri con la presenza di grani diminuisce. Il citoplasma contiene anche nucleotidi, membrane intracitoplasmatiche - lisosomi, vacuoli.

I batteri sono colorati con tutti i coloranti all'anilina. Se colorati con il metodo Gram, sono positivi. Il metodo Neisser viene utilizzato per colorare i grani volutin. Quando colorati con questo metodo, i grani di volutina, che hanno un'elevata affinità per il blu di metilene, vengono colorati in modo persistente di blu e dal corpo del batterio, con colorazione aggiuntiva con crisoidina o bismarckbraun, il blu di metilene viene spostato.

L'agente eziologico della difterite è eterotrofo, cioè appartiene al gruppo di batteri che necessitano per la loro crescita materia organica. I terreni utilizzati per la coltivazione devono contenere aminoacidi come fonte di carbonio e azoto - alanina, cistina, metionina, valina, ecc. A questo proposito i terreni elettivi per la coltivazione sono terreni contenenti proteine ​​animali: sangue, siero, liquido ascitico. Sulla base di ciò è stato creato l'ambiente classico di Leffler e poi gli ambienti di Clauberg, Tyndall e di accumulazione.

Sul terreno di Leffler, le colonie del bacillo della difterite hanno una superficie lucida e umida, bordi lisci e un colore giallastro. Dopo diversi giorni di crescita compaiono striature radiali delle colonie e linee concentriche debolmente definite. Il diametro delle colonie raggiunge i 4 mm. I primi segni di crescita compaiono dopo 6 ore in termostato a 36-38 °C. La crescita è chiaramente visibile 18 ore dopo la semina. Il valore di pH ottimale per la crescita del bacillo della difterite è 7,6. Il Corynebacterium diphtheria è spesso difficile da distinguere da altre specie di corynebacterium. Per determinare la specie, viene utilizzato un complesso di caratteristiche culturali e biochimiche.

Anche il tipo di Corynebacterium diphtheria è eterogeneo, è diviso in 3 tipi culturali e biochimici gravis, mitis, intermedine, in due varietà: tossigenico e nontossigenico, numerosi tipi sierologici e fagotipi.

Attualmente nella maggior parte dei territori circolano due tipi culturale-biochimici: gravis e mitis. Il tipo di intermedine, che un tempo si distinguevano abbastanza ampiamente, Ultimamente si verifica raramente. La differenziazione più chiara dei tipi può essere fatta dalla forma delle colonie quando la coltura viene coltivata su agar sangue con l'aggiunta di tellurito. Le colonie del tipo gravis raggiungono 1-2 mm di diametro dopo 48-72 ore, hanno bordi ondulati, striature radiali e centro piatto. Il loro aspetto è solitamente paragonato a un fiore di margherita. Le colonie sono opache a causa della capacità del batterio di ridurre il tellurito, che poi si combina con l'idrogeno solforato risultante, di colore grigio-nero. Quando crescono in brodo, le colture di tipo gravis formano una pellicola che si sbriciola sulla superficie. Quando seminati su supporti Hiss con l'aggiunta di siero di latte, scompongono i polisaccaridi: amido, destrina, glicogeno con formazione di acido.

Le colture del tipo mitis su agar sangue tellurito crescono come colonie rotonde, leggermente convesse, con bordi lisci, di colore nero opaco. Se coltivati ​​in brodo producono torbidità e sedimenti uniformi. Non scompongono l'amido, la destrina e il glicogeno.

Negli strisci, i bastoncini del tipo gravis sono spesso corti, mentre quelli del tipo mitis sono più sottili e più lunghi.

Uno studio comparativo al microscopio elettronico dei bacilli della difterite di vari tipi biochimici ha mostrato la presenza di una struttura a tre strati nei tipi gravis e mitis. membrana cellulare. Il guscio del tipo intermedio è a due strati e quasi 3 volte più spesso. Tra il citoplasma e la membrana ci sono spazi pieni di granuli, che potrebbero essere correlati all'esotossina. Sono visibili le striature oblique dei batteri, create dalle pareti divisorie tra le cellule figlie. L'apparato cromosomico, nei tipi gravis e mitis, è rappresentato da granelli ordinari con vacuoli, nel tipo intermedine è distribuito in tutto il citoplasma; IN microscopio elettronicoè visibile una membrana multistrato, la cui presenza spiega perché i bacilli della difterite sono talvolta Gram-negativi.

Le colonie di batteri della difterite sono disponibili nelle forme S, R e SR, quest'ultima considerata intermedia. N. Morton ritiene che le colonie di forme S siano caratteristiche del tipo mitis e le forme SR del tipo gravis. Oltre a queste forme principali, ci sono colonie mucoidi - forme M, colonie nane - forme D e colonie gonidiali - forme L. Tutte queste sono considerate forme di variabilità dissociativa.

I batteri della difterite devono essere distinti dai difteroidi e dai bacilli della pseudodifterite.

Un gran numero di studi sono dedicati alla variabilità del bacillo della difterite. La possibilità della comparsa di forme atipiche in condizioni di laboratorio è stata confermata da studi epidemiologici.

La variabilità biochimica, morfologica e fisico-chimica dei batteri della difterite, riconosciuta da un gran numero di ricercatori, in alcuni casi complica la diagnostica batteriologica e impone uno studio completo delle colture.

Abbiamo diviso tutte le colture isolate in diverse condizioni epidemiologiche in 8 gruppi; includevano tutte le possibili varianti morfologiche dei rappresentanti del corinebatterio che ci interessano:

1° gruppo - bastoncini corti, lungo circa 2 µm, privo di grani;

2° gruppo: bastoncini corti, lunghi circa 2 micron, ma occasionalmente con grani;

3o gruppo: bastoncini taglia media, lungo 3-6 micron, largo 0,3-0,8 micron, senza granularità caratteristica;

4o gruppo - bastoncini di media grandezza, lunghi 3-7 micron, larghi 0,3-0,8 micron, leggermente ricurvi, occasionalmente con grani;

5o gruppo: bastoncini di media grandezza, lunghi 3-6 micron, larghi 0,3-0,8 micron, leggermente ricurvi, granulari;

6o gruppo: bastoncini lunghi, lunghi 6-8 micron, larghi 0,3-0,6 micron, leggermente ricurvi, occasionalmente con grani;

7o gruppo: bastoncini lunghi, lunghi 6-8 micron, larghi 0,3-0,8 micron, solitamente curvi, senza grani;

Gruppo 8: bastoncini corti e ruvidi, lunghi circa 2 micron, larghi circa 1 micron, senza grani.

Nell'assegnazione ai gruppi non si teneva conto della posizione dei bastoncini, ma solitamente la disposizione caratteristica corrispondeva alla morfologia.

Nel 1°, 2°, 3° e 8° gruppo, che corrispondevano nella morfologia ai bastoncini di Hoffmann, la disposizione era a gruppi, paralleli o sotto forma di singoli individui, nel 4°, 5° e 6° gruppo, che corrispondevano principalmente nella morfologia alla vera difterite batteri, bastoncelli disposti ad angolo o sotto forma di singoli individui. Nel gruppo 7, le aste erano più spesso disposte in modo casuale, intrecciate tra loro. Nell'ottavo gruppo i bastoncelli erano localizzati sotto forma di singoli individui.

Delle 428 colture studiate, 111, in base alla totalità delle loro caratteristiche, avrebbero dovuto essere classificate come vera difterite, 209 erano colture di bacilli di Hoffmann e 108 costituivano un gruppo di colture atipiche. Nelle culture vicine alla difterite, l'atipicità si manifestava in una diminuzione dell'attività biochimica, talvolta nella decomposizione dell'urea; nelle colture morfologicamente vicine ai bastoncini di Hoffmann conservano un test positivo per la cisteina e la capacità di decomporre uno degli zuccheri.

Delle 111 colture di difterite, 81 colture (73%) erano morfologicamente tipiche, 28 colture (27%) avevano la morfologia dei bastoncini di Hoffmann. Delle 111 colture di difterite, c'erano 20 colture di tipo gravis e di queste solo 9 erano assegnate al 1° e 2° gruppo morfologico.

Le colture classificate in base a una combinazione di caratteristiche come colture di bacilli di Hoffmann avevano la morfologia delle tipiche colture di difterite nel 20% dei casi.
Il 25% dei ceppi studiati sono stati classificati come colture atipiche; la loro morfologia corrispondeva sia ai bacilli della difterite che ai bacilli di Hoffmann;

Quindi, biochimico e proprietà morfologiche le culture non sempre coincidono e l'atipicità biochimica, oltre che morfologica, è più spesso osservata in colture isolate durante un periodo di ridotta incidenza, e quindi di diminuzione del livello di portatore.

È necessario notare la diminuzione generale dell'attività biochimica delle colture negli ultimi 10-15 anni. Un indicatore di ciò è la fermentazione ritardata degli zuccheri, che talvolta avviene al 5-6° giorno, nonché la diversa attività biochimica delle colonie della stessa coltura.

L'identificazione biochimica di colture pure isolate in diverse condizioni epidemiologiche mostra che sebbene la morfologia e le proprietà biochimiche spesso non coincidano, il principio generale di distribuzione delle colture, stabilito in base ai dati morfologici, non cambia. Sia quando si distribuiscono le colture secondo dati morfologici e biochimici, sia quando si identificano completamente con l'inclusione di reazioni sierologiche, il principio di distribuzione rimane lo stesso: le colture atipiche sono più comuni durante il periodo di prosperità epidemica, i bacilli di Hoffmann vengono rilevati più spesso durante il periodo periodo di crisi epidemica e vengono seminati più a lungo della vera difterite.

Lo studio delle proprietà tossigeniche di colture isolate su terreni nutritivi solidi ha dimostrato che anche durante il periodo di prosperità epidemica esiste un numero sufficiente di portatori di bacilli di difterite tossigeni. Va notato che le proprietà tossigeniche non possono sempre essere rilevate anche in colture isolate da pazienti. Ciò indica la necessità di migliorare i metodi applicati per determinare la tossigenicità delle colture.

I risultati della reazione di agglutinazione di colture atipiche isolate in diverse condizioni epidemiologiche hanno mostrato la presenza degli stessi modelli di proprietà sierologiche che abbiamo notato studiando la morfologia e la biochimica delle colture. L’atipicità delle culture isolate in un’area prospera, secondo i dati sierologici, era più profonda che nelle aree svantaggiate. Pertanto, in un'area prospera, il 26% delle colture atipiche ha dato una reazione di agglutinazione positiva, in aree sfavorevoli - 19%.

Una delle principali proprietà del bacillo della difterite è la capacità di formare tossine. La tossinogenesi del Corynebacterium diphtheria è determinata dal gene contenuto nel profago, pertanto il principale mezzo di aggressione - la formazione di tossine - non è associato al cromosoma batterico;

La tossina difterica è una proteina con un peso molecolare di 6200 dalton. La forza della tossina viene determinata eseguendo test intradermici per la presenza di azione necrotica e l'effetto sugli animali sensibili (effetto letale). La forza di una tossina viene misurata utilizzando il minimo dose letale, che è la quantità più piccola di tossina che può causare la morte di una cavia del peso di 250 g al 4-5° giorno se somministrata per via intraperitoneale. La tossina ha proprietà antigeniche che vengono preservate se trattata con formaldeide, che ne rimuove le proprietà tossiche. Ciò ha permesso di utilizzarlo per la preparazione di un farmaco profilattico.

La molecola della tossina è composta da due frammenti, uno dei quali è termostabile e ha attività enzimatica, e il secondo è termolabile e svolge una funzione protettiva. È stata dimostrata la sintesi intracellulare della tossina con il suo rilascio attraverso i tubuli della parete cellulare. La sintesi della tossina avviene quando il microbo viene coltivato mezzo liquido- brodo carne-peptone con aggiunta di glucosio, maltosio e fattori di crescita a pH 7,8-8,0.

Secondo dati recenti, la tossina difterica è un prodotto di origine virale. A conferma, I. V. Chistyakova propone la capacità dei corinebatteri non tossigeni di trasformarsi in tossigeni sotto l'influenza del fago. La possibilità di convertire colture non tossigeniche in colture tossigeniche è stata confermata in esperimenti su colture unicellulari. Il fenomeno descritto è chiamato conversione lisogenica. Utilizzando virus temperati ottenuti da ceppi tossigeni di gravis, è stato possibile convertire la variante non tossigena di Corynebacterium diphtheria gravis in una variante tossigenica.

E.V. Bakulina, M.D. Krylova ha suggerito che la conversione focale potrebbe essere importante nel processo epidemico. A questo proposito è stato avviato lo studio del suo ruolo nella formazione di ceppi tossigeni di Corynebacterium diphtheria in natura. La possibilità di conversione della tossigenicità è stata dimostrata non solo nei sistemi fago-batteri, ma anche in condizioni naturali. Ma tra le culture locali questo processo, secondo alcuni ricercatori, è tutt'altro che comune. Le ragioni di ciò sono probabilmente la mancanza di produttori di fagi temperati, la sensibilità dei fagi locali è diversa dai ceppi di riferimento e quindi non possono essere destinatari di fagi convertenti con uno spettro d'azione noto.

Solo in una parte della popolazione microbica è stato possibile convertire le proprietà tossigeniche dei bacilli della difterite sotto l'influenza dei fagi stafilococcici e streptococcici. Nei lavori anni recenti la questione della conversione dei fagi nel processo epidemico riceve una valutazione ancora più contenuta. Si ritiene che i corinefagi tox+ non svolgano un ruolo indipendente nel processo epidemico della difterite. I portatori di bacilli non tossigeni possono essere infettati dal fago tox+ solo insieme a un ceppo tossigenico, e i fagi stafilococcici non sono in grado di convertire i corinebatteri non tossigeni. Per effettuare la conversione nella direzione della tossigenicità nel corpo umano, è apparentemente necessario avere uno stretto contatto tra un portatore che ha un fago convertente e un portatore che secerne un ceppo che è lisosensibile a questo fago. Oltre alla capacità di formare tossine, il batterio della difterite ha fattori di patogenicità come ialuronidasi, neuraminidasi, desossiribonucleasi, catalasi, esterasi e perossidasi. Lo studio dei prodotti metabolici extracellulari non ha mostrato differenze tra corinebatteri difterici tossigeni e non tossigeni.

Attualmente, per la tipizzazione intraspecifica del Corynebacterium diphtheria, oltre al metodo biochimico sopra descritto, possono essere utilizzati metodi sierologici e fagici.

La presenza di tipi sierologici è dovuta ad antigeni tipo-specifici, termostabili, di superficie e termolabili.

Esistono numerosi schemi di tipizzazione sierologica. Nel nostro paese utilizziamo lo schema proposto da V. S. Suslova e M. V. Pelevina, ma esso non può fornire la classificazione di tutti i ceppi non tossigeni. Il numero dei tipi sierologici è in crescita. I. Ewing ha stabilito la presenza di 4 tipi sierologici: A, B, C e D; D. Robinson e A. Peeney 5 tipi: I, II, III, IV e V. L. P. Delyagina hanno identificato altri 2 tipi sierologici. Si ritiene che il numero di tipi sierologici sia molto maggiore, principalmente a causa del tipo mitis. Dai pochi dati di letteratura disponibili sui modelli nell'isolamento dell'uno o dell'altro sierotipo quando varie forme il processo infettivo e le diverse condizioni epidemiologiche non sono state stabilite. Insieme ai dati sulla diversa aggressività delle colture appartenenti a diversi tipi sierologici, esistono rapporti che rifiutano il collegamento del tipo sierologico con la patogenicità delle colture.

È caratteristico che sopra vari territori Esistono diversi tipi sierologici. La tipizzazione sierologica può essere utilizzata per l'analisi epidemiologica.

In condizioni di morbilità sporadica, numero limitato di portatori, quando la ricerca della fonte dell'infezione è molto più difficile, diventa importante il metodo della fagizzazione, che consente di suddividere i corinebatteri in varianti sierologiche e colturali. La marcatura può essere effettuata in base alle proprietà dei fagi isolati da una coltura e in base alla sensibilità della coltura a batteriofagi specifici. Lo schema più utilizzato è quello proposto da R. Saragea e A. Maximesco. Consente di etichettare ceppi tossigeni e non tossigeni di tutte le varianti culturali. Con l'aiuto di 22 fagi tipici, le colture possono essere divise in 3 gruppi, in cui sono combinate 21 varianti fagiche: 1o gruppo - ceppi tossigeni e non tossigeni del tipo mitis (varianti fagiche I, la, II, III); 2° - ceppi tossigeni e non tossigeni del tipo intermedine e gravis non tossigeni (varianti fagiche IV, V, VI, VII); Nel 3° gruppo sono state incluse 13 varianti fagiche (dalla VIII alla XIX), che riunivano ceppi tossigeni gravis.

Lo schema è stato testato su un gran numero di ceppi isolati in Romania e ottenuti da musei di 14 paesi. La tipizzazione fagica è risultata positiva nel 62% dei ceppi, i ceppi del tipo gravis sono stati marcati con particolare successo. Tra questi ultimi, l'appartenenza ad una delle varianti fagiche è stata accertata nel 93%. Le reazioni specifiche con i fagi tipici nei ceppi tossigeni del tipo gravis secondo lo schema di questi autori si basano sull'infezione dei ceppi con vari virus.

Nel nostro paese, la ricerca nel campo della tipizzazione dei fagi è stata condotta da M. D. Krylova. L'autore ha sviluppato uno schema di marcatura dei fagi basato sul principio proposto da Williams e Rippon per la tipizzazione degli stafilococchi plasmacoagulanti: la variante fagica è stata designata con il nome del tipo di fago che l'ha lisata in una diluizione di prova. I fagi e le varianti fagiche nello schema di M.D. Krylova sono designati con lettere dell'alfabeto latino: lettere maiuscole - fagi che danno lisi confluente e semi-confluente, lettere minuscole - lisi sotto forma di placche. Sulla base di ciò, sono stati sviluppati uno schema di tipizzazione fagica modificato per i corinebatteri non tossigeni della variante gravis e uno schema di tipizzazione fagica per i corinebatteri tossigeni della variante gravis.

Una delle malattie infettive pericolose che sta guadagnando slancio recentemente è la difterite. È pericoloso non tanto a causa di processi infiammatori nel tratto respiratorio superiore, nella pelle, negli occhi e nei genitali, ma piuttosto a causa dell'avvelenamento del corpo da parte delle tossine dell'agente patogeno: i corinebatteri della difterite. I danni ai principali sistemi del corpo (nervoso e cardiovascolare) possono essere piuttosto pericolosi e portare anche a conseguenze disastrose. Leggi l'articolo sulla morfologia e microbiologia del Corynebacterium diphtheria, la loro patogenicità e tossicogenicità, le vie di infezione, i sintomi e il trattamento della malattia.

Difterite ieri e oggi

Questa malattia è nota all'umanità fin dai tempi antichi. Fu descritta nei suoi scritti da Ippocrate (460 aC); nel XVII secolo le epidemie di difterite sterminarono gli abitanti delle città europee e, dal XVIII secolo, gli abitanti del Nord e del Sud America. Il nome della malattia (dal greco Diphthera, che significa "film") è stato introdotto in medicina dal pediatra francese Armand Trousseau. L'agente eziologico della malattia, il batterio Corynebacterium diphtheriae, fu scoperto per la prima volta nel 1883 Dottore tedesco Edwin Klebs. Ma il suo connazionale, il microbiologo Friedrich Leffler, isolò il batterio in una coltura pura. A quest'ultimo si deve la scoperta della tossina secreta dal Corynebacterium diphtheria. Il primo vaccino apparve nel 1913 e fu inventato da Emil Adolf von Behring, un microbiologo e medico tedesco, vincitore di un premio premio Nobel nella fisiologia.

Dal 1974, l’incidenza e la mortalità della difterite sono diminuite significativamente in tutti i paesi membri dell’Organizzazione Mondiale della Sanità grazie ai programmi di vaccinazione di massa. E se prima di questo, più di un milione di persone si ammalavano ogni anno nel mondo e ne morivano fino a 60mila, dopo l'attuazione dei programmi di vaccinazione si registrano solo casi isolati di focolai di difterite. E maggiore è la percentuale di cittadini che si sono sottoposti a vaccinazioni preventive, minore è la probabilità di epidemie. Pertanto, una diminuzione della copertura vaccinale tra la popolazione della CSI negli anni '90 ha portato allo scoppio della malattia, quando sono stati registrati circa 160mila casi.

Oggi, secondo le autorità sanitarie, circa il 50% della popolazione è stata vaccinata contro la difterite e, dato che il programma di vaccinazione prevede una rivaccinazione ogni 10 anni, si sente sempre più spesso sui media parlare di una possibile epidemia epidemiologica di difterite in Russia e in Russia. i paesi dell’ex CSI.

Non più una malattia infantile

La difterite è una malattia infettiva acuta, prevalentemente infantile. È caratterizzato da infiammazione fibrinosa del sito di localizzazione del bacillo della difterite e grave intossicazione corpo con le sue tossine. Ma negli ultimi 50 anni questa malattia è “maturata” e colpisce sempre più persone di età molto superiore ai 14 anni. Nei pazienti adulti, la difterite è grave malattia con possibile esito fatale.

Il gruppo a rischio più suscettibile sono i bambini dai 3 ai 7 anni. Le fonti di infezione possono essere portatori malati e sani dell'agente patogeno. I pazienti con difterite del tratto respiratorio superiore sono i più contagiosi, perché la principale via di infezione sono le goccioline trasportate dall'aria. I pazienti affetti da difterite oculare e cutanea possono trasmettere l'infezione attraverso il contatto. Inoltre, la fonte dell'infezione può essere persone che non hanno manifestazioni esterne malattie, ma sono portatori di Corynebacterium diphtheria - periodo di incubazione la malattia dura fino a 10 giorni. Pertanto, i sintomi non compaiono immediatamente.

La difterite è una malattia pericolosa per una persona non vaccinata. In assenza di somministrazione immediata di siero antidifterite, la probabilità esito fataleè del 50%. E anche con la sua somministrazione tempestiva, rimane il 20% di possibilità di morte, le cui cause sono soffocamento, shock tossico-infettivo, miocardite e paralisi respiratoria.

Genere Corynebacterium

L'agente eziologico della difterite, Corynebacterium diphtheriae (bacillo della difterite o bacillo di Leffler) fa parte del genere dei batteri gram-positivi, che comprende più di 20 specie. Tra i batteri di questo genere ci sono agenti patogeni sia dell'uomo che degli animali e delle piante. Per la medicina pratica, oltre al bacillo della difterite, sono importanti anche altri rappresentanti di questo genere:

• Corynebacterium ulcerans: provoca faringite, lesioni cutanee infettive e si trova spesso nei latticini.
• Corynebacterium jeikeium - provoca polmonite, endocardite e peritonite, infetta la pelle.
• Corynebacterium cistitidis - può essere l'iniziatore della formazione di calcoli nel tratto urinario.
• Corynebacterium minutissimum - provoca ascesso polmonare, endocardite.
• Corynebacterium xerosis e Corynebacterium pseudodiphtheriticum erano precedentemente considerati gli agenti causali della congiuntivite e dell'infiammazione del rinofaringe e oggi sono riconosciuti come saprofiti che vivono sulle mucose come parte di altra microflora.

La morfologia della difterite corinebatteri è simile alla morfologia di tutti i rappresentanti di questo genere. Il bacillo della difterite ha una capsula e costrizioni (pili). Il Corynebacterium diphtheria in uno striscio ha la forma di bastoncini e si trova l'uno rispetto all'altro ad angolo, ricordando i cinque romani. Tra la varietà di rappresentanti di questo tipo di batteri, ci sono sia forme tossigeniche (che producono esotossine con effetti patogeni) sia batteri che non secernono tossine. Tuttavia, è dimostrato che anche i ceppi non tossicogeni dei bacilli di Loeffler contengono nel loro genoma geni responsabili della produzione di tossine. Ciò significa che in condizioni appropriate questi geni possono attivarsi.

Virulenza e persistenza

L'agente eziologico della difterite è abbastanza stabile nell'ambiente esterno. Il Corynebacterium mantiene la sua virulenza sulle superfici degli oggetti domestici fino a 20 giorni a temperatura ambiente. I microrganismi tollerano bene l'essiccazione e basse temperature. I batteri muoiono:

• Quando trattato termicamente a una temperatura di 58 °C per 5-7 minuti e durante l'ebollizione - per 1 minuto.
• Su vestiti e biancheria da letto - dopo 15 giorni.
• Nella polvere moriranno in 3-5 settimane.
• Se esposto a disinfettanti - cloramina, sublimato, acido carbolico, alcool - in 8-10 minuti.

Meccanismo di sviluppo della malattia

Attraverso le porte d'ingresso (mucose delle tonsille, del naso, della faringe, dei genitali, delle lesioni cutanee, della congiuntiva), i corinebatteri della difterite entrano nel corpo, dove si moltiplicano e producono esotossina. In presenza di un'elevata immunità antitossica, la tossina viene neutralizzata. Tuttavia, in futuro ci sono due possibili opzioni per lo sviluppo dell'agente eziologico della difterite:

• I corinebatteri muoiono e la persona rimane sana.
• Con uno stato immunitario insufficiente e un'elevata virulenza, i bacilli della difterite si moltiplicano nel sito di invasione e causano un portatore batterico sano.

Se assente, il Corynebacterium diphtheria tossigenico porta allo sviluppo di segni clinici e morfologici di infezione. La tossina penetra nei tessuti, linfatici e sistema circolatorio, provoca la paresi dei vasi sanguigni e l'aumento della permeabilità delle loro pareti. Nello spazio intercellulare si forma essudato fibrinogeno e si sviluppano processi di necrosi. Come risultato della trasformazione del fibrinogeno in fibrina, sulla superficie delle mucose colpite compaiono film di placca fibrosa, un segno caratteristico della difterite. Con il sangue, la tossina entra nel sistema circolatorio e nel sistema nervoso, nelle ghiandole surrenali, nei reni e in altri organi. Lì porta all'interruzione del metabolismo proteico, alla morte cellulare e alla loro sostituzione con cellule del tessuto connettivo.

Tossine patogene

Il Corynebacterium diphtheria è caratterizzato da un'elevata patogenicità dovuta alla capacità di secernere esotossina, che comprende diverse frazioni:

• La neurotossina, che porta alla necrosi delle cellule epiteliali della mucosa, dilata i vasi sanguigni e aumenta la loro permeabilità. Di conseguenza, la componente liquida del sangue fuoriesce nello spazio intercellulare, causando edema. Inoltre, il fibrinogeno del sangue reagisce con le cellule necrotiche e forma pellicole fibrose.
• La seconda frazione della tossina è costituita da una sostanza simile nella struttura al citocromo C, la proteina di tutte le cellule del corpo che assicura la respirazione. La tossina del Corynebacterium sostituisce il normale citocromo della cellula e conduce ad esso carenza di ossigeno e morte.
• Ialuronidasi: aumenta il gonfiore e la permeabilità delle pareti vascolari.
• Elemento emolizzante: porta alla distruzione dei globuli rossi.

Queste proprietà del Corynebacterium diphtheria, il cui compito è diffondere l'effetto patogeno attraverso le tossine in tutto il corpo, sono la causa delle complicanze di questa infezione.

Classificazione della malattia

La difterite è una malattia con molte forme e manifestazioni. In base alla localizzazione dell'invasione si distinguono le forme localizzate e diffuse della malattia.

In base alla variante di forma e portata si distinguono:

• Difterite dell'orofaringe - localizzata (con infiammazione catarrale, insulare o filmica), diffusa (le placche si trovano all'esterno del rinofaringe), tossica (gradi 1, 2 e 3), ipertossica. Si verifica nel 90-95% di tutti i casi della malattia.
• Groppa difterica - localizzata (laringe), diffusa (laringe e trachea), discendente (l'infezione si diffonde ai bronchi).
• Difterite del naso, degli occhi, della pelle e dei genitali.
• Una forma combinata della malattia in cui vengono colpiti più organi contemporaneamente.

A seconda del grado di intossicazione del corpo, la malattia può essere delle seguenti forme: difterite non tossica (causata da ceppi non tossigeni di corinebatteri difterite), difterite subtossica, tossica, emorragica e ipertossica.

Clinica e sintomi

Al contatto con pazienti o portatori di un ceppo tossico, la probabilità di infezione è di circa il 20%. I primi sintomi sotto forma di aumento della temperatura a 38-39 ° C, mal di gola e difficoltà a deglutire compaiono nei giorni 2-10.

Poiché i primi sintomi della forma più comune di difterite con manifestazioni atipiche sono simili ai sintomi del mal di gola, si consiglia di eseguire un tampone al primo segno per rilevare l'agente patogeno. Ma, oltre ai sintomi simili all'angina, c'è la forma tipica della malattia caratteristiche peculiari, che consistono in danni specifici alle tonsille. La placca fibrosa formata su di essi forma film densi. Freschi, si rimuovono facilmente, ma man mano che si addensano, quando vengono rimossi rimane una ferita sanguinante. Ma la difterite fa paura non a causa dei film sulle mucose, ma a causa delle sue complicazioni causate dall'azione della tossina difterica.

Possibili complicazioni

Man mano che l'agente patogeno si moltiplica, la tossina rilasciata diventa sempre maggiore e si diffonde attraverso il flusso sanguigno in tutto il corpo. È la tossina che causa lo sviluppo di complicazioni, che possono includere quanto segue:

• Shock tossico.
• Danno al muscolo cardiaco (miocardite).
• Lesioni distrofiche reni (nefrosi).
• Disturbi della coagulazione del sangue (sindrome DIC).
• Danni al sistema nervoso periferico (polineuropatia).
• Manifestazioni croupose (stenosi della laringe).

Diagnosi della malattia

Il principale metodo diagnostico è l'esame microbiologico. Per tutte le tonsilliti sospette, questo test è prescritto per identificare i corinebatteri. Per eseguirlo si prelevano dei tamponi dalle tonsille colpite e vi si inserisce il materiale mezzo nutritivo. L'analisi dura 5-7 giorni e fornisce una comprensione della tossigenicità del ceppo di bacillo difterico.

Un'aggiunta a questo metodo è l'analisi degli anticorpi nel sangue. Esistono molti metodi per eseguire questa analisi, ma l'essenza si riduce al fatto che se non ci sono anticorpi contro la tossina difterica nel sangue del paziente, al contatto con un'infezione, la probabilità di infezione si avvicina al 99%.

Un test non specifico per la difterite è analisi generale sangue. Non conferma né nega la presenza di un agente patogeno nel corpo, ma mostra solo il grado di attività del processo infettivo e infiammatorio nel paziente.

Trattamento esclusivamente in ospedale

È molto importante iniziare immediatamente il trattamento per la difterite, questo è l'unico modo per ridurre al minimo la probabilità che si sviluppino complicanze. I pazienti sospettati di avere questa infezione vengono immediatamente ricoverati nei reparti di malattie infettive. Fornisce isolamento, riposo a letto e spettro completo misure terapeutiche, vale a dire:

Prevenzione attiva della difterite

Protezione contro questo pericoloso malattia infettivaè la vaccinazione. Poiché il danno principale non è causato dal bacillo della difterite stesso, ma dalla sua tossina, la vaccinazione viene effettuata con il tossoide. In risposta alla sua introduzione nel corpo, si formano anticorpi specifici contro le tossine dei batteri.

Oggi vaccinazione preventiva viene effettuata con associati vaccini complessi contro pertosse, difterite e tetano (DPT). In Russia sono registrati numerosi vaccini complessi, compreso il tossoide difterico, di produzione nazionale e importata. Il tossoide difterico è assolutamente innocuo e non provoca shock anafilattico o reazioni allergiche. In alcuni casi (10%) si possono sviluppare reazioni allergiche locali sotto forma di gonfiore, arrossamento e dolore, che scompaiono da sole entro 2-3 giorni. Le controindicazioni alla vaccinazione possono includere reazioni allergiche a qualsiasi componente vaccino complesso, uso di immunosoppressori, stati di immunodeficienza.

Secondo il calendario delle vaccinazioni, vengono vaccinati i bambini dai 3 ai 6 mesi. Le rivaccinazioni ripetute vengono effettuate a 1,5 anni, a 7 e 14 anni. Per gli adulti si raccomanda la rivaccinazione ogni 10 anni.

Protezione naturale

La vaccinazione è supportata anche dal fatto che dopo l'infezione una persona sviluppa un'immunità piuttosto instabile che dura fino a 10 anni. Dopo questo periodo aumenta la probabilità di contrarre questa malattia. E sebbene la difterite ripetuta in molti casi sia più lieve e sia molto più facile da tollerare per il paziente, il verificarsi di intossicazione è abbastanza probabile.

Oggi, le questioni relative alle vaccinazioni sollevano molte domande nella società. Ma nel nostro caso, quando prendiamo una decisione, dovremmo lasciarci guidare non dalle emozioni, ma dai fatti.

I film difterici possono intasarsi Vie aeree entro 15-30 minuti. In questo caso, l'assistenza di emergenza può essere solo professionale: il posizionamento di una cannula tracheostomica. Sei pronto a rischiare la tua vita e quella dei tuoi cari? La scelta è tua?