Antikorlar ilaç kullanımıdır. İmmünoterapi: etki mekanizması ve immüno-düzeltici ilaçların klinik kullanımı

İmmünobiyolojik preparatlar

tanı, önleme ve

bulaşıcı hastalıkların tedavisi

Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L.A., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., Prokopyev V. .IN.

Ofset kağıdı basmak için imzalanmıştır. Tiraj: 500 kopya.

Matbaada basılmıştır: :;

Federal Sağlık ve Sosyal Kalkınma Ajansı Altay Devlet Tıp Üniversitesi Yüksek Mesleki Eğitim Devlet Eğitim Kurumu.

İmmünobiyolojik preparatlar

tanı, önleme ve

bulaşıcı hastalıkların tedavisi

Öğrencilerin kendilerini hazırlamalarına yönelik bir ders kitabı pratik dersler mikrobiyolojide

Barnaul, 2011

İnceleyenler:

Ders kitabı, immünbiyolojik preparatların (tanısal, tedavi edici ve profilaktik: aşılar, serumlar, bakteriyofajlar vb.) doğası ve kullanımına ilişkin teorik konuları özetlemektedir.

Fakülte öğrencileri tıbbi profil(terapötik, pediatrik, dişçilik) bakteriyolojik ilaçların etki mekanizmalarının daha derinlemesine incelenmesini gerektirir, cevap vücuda aşı ve serum ilaçlarının uygulanması, bazı ilaçların kullanımında ortaya çıkan komplikasyonlar.

Bulaşıcı hastalıkların teşhisi, önlenmesi ve tedavisi için immünobiyolojik preparatlar: Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L. .A., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V. - Barnaul, 2002. - 46 s.

A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., 2002

Bulaşıcı hastalıkların önlenmesi, teşhisi ve tedavisinde, canlı ve öldürülmüş mikroorganizmalardan (bakteri, riketsiya, virüsler), bunların metabolik ürünlerinden (toksinler) ve ayrıca bitkilerden ekstrakte edilen bireysel mikrobiyal hücre antijenlerinden yapılan immünobiyolojik preparatlar yaygın olarak kullanılmaktadır. çeşitli metodlar. Serumlar ve spesifik gama globulinler ve immünoglobulinler de tedavi ve teşhis amacıyla kullanılır. Ayrıca bakteriyofaj preparatları teşhis ve tedavi amaçlı yaygın olarak kullanılmaktadır.

Doktorun pratik faaliyetlerinde immünbiyolojik ilaçların bileşimi, hazırlanması ve etki mekanizması hakkında bilgi sahibi olması gerekir. Aynı zamanda uygulayıcılar her zaman yeni oluşturulan aşı ve serum preparatlarını ve bunların kullanım özelliklerini tanıma fırsatına sahip olamamaktadır. Ayrıca modern ders kitapları immünbiyolojik ilaçların hazırlanması, etki mekanizması ve kullanımına ilişkin konuları tam olarak yansıtmamaktadır.

Yukarıdakilerin tümü, immünbiyolojik ilaçlar hakkında bilgi içeren bir ders kitabı oluşturma ihtiyacını doğurdu. Bu kılavuzda immünbiyolojik ilaçların kullanım şekli, etken maddesi, kullanımı ve bazılarının kullanımı sırasında ortaya çıkan komplikasyonlar hakkında bilgiler yer almaktadır. Kılavuz, tıp, pediatri, diş hekimliği ve koruyucu hekimlik fakültelerinin üçüncü sınıf öğrencilerini özel mikrobiyoloji alanında uygulamalı derslere hazırlamak amacıyla hazırlanmıştır.

İmmünbiyolojik preparatların sınıflandırılması

I. Tanısal ilaçlar.

Antijen içeren müstahzarlar - teşhis, alerjenler, toksinler.

Antikor içeren müstahzarlar - teşhis serumları.

Tanısal bakteriyofajlar.

II.Terapötik ve profilaktik ilaçlar.

Antijen içeren müstahzarlar - aşılar.

Antikor içeren müstahzarlar - şifa serumları ve gama globulinler ve immünoglobulinler.

Bakteriyofajlar.

Antagonist mikroplar.

İnterferonlar ve diğer sitokinler.

Bölüm I

Teşhis ilaçları

Tanı ilaçları, bir dizi hastalığın laboratuvar tanısında kullanılır ve doğru tanısı ancak bakteriyolojik ve virolojik çalışmalarla yapılabilir. Ek olarak, atipik seyreden bir hastalığın veya semptomların polimorfizmi ile karakterize edilen bir hastalığın teşhisini laboratuvar yöntemleriyle doğrularken teşhis ilaçları gereklidir. Ayrıca verilen bölge ve bölgede bulunmayan hastalıkların teşhisi verilen zaman laboratuvar yöntemleriyle doğrulanması gerekir.

Enfeksiyon hastalıklarının tanısında mikrobiyolojik tanı teknikleri yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu durumda bakteriyolojik, virolojik, serolojik, alerjik, immünolojik tanı yöntemlerinin yanı sıra moleküler hibridizasyon ve PCR yöntemleri de kullanılır. Bu yöntemlerin her biri için belirli tanısal immünobiyolojik preparatlar gereklidir: tanısal serumlar, tanısal serumlar (tür, tip, kompleks, adsorbe edilmiş vb.), kompleman, alerjenler, bakteriyofajlar, RIF ve ELISA sistemleri, nükleik asit probları.

Tanısal ilaçların sınıflandırılması

1. Antikor içeren preparatlar - teşhis serumları:

aglütinasyon;

çökeltme;

antitoksik;

hemolitik;

antiviral;

ışıldayan;

antiglobulin.

2. Antijen içeren preparatlar:

2.1) teşhisler:

2.1.1.bakteriyel;

2.1.2.eritrosit;

2.1.3.viral;

2.2.) toksinler;

2.3.)alerjenler.

3. Tanısal bakteriyofajlar.

1. Teşhis serumları

Bulaşıcı hastalıkların tanısında yaygın olarak kullanılırlar. bağışıklık reaksiyonları Mikroorganizmaları (bakteri ve virüsler) veya toksinleri tanımlamak için. Bu tür reaksiyonları gerçekleştirmek için spesifik teşhis serumları gereklidir.

1.1. Aglütinasyon serumları.

Aglütinasyon serumları, tavşanların öldürülmüş mikroorganizmaların veya bunların antijenlerinin bir süspansiyonu ile immünize edilmesi, ardından kanlarının alınması ve serumun hazırlanması yoluyla elde edilir. Aglütinasyon serumları, aglütinasyon reaksiyonundaki mikroorganizmaları tanımlamak için kullanılır. Bu tür serumların dezavantajı grup aglütinasyon reaksiyonları verebilmeleridir, çünkü ortak antijenlere sahip bakterilere karşı antikorlar içerirler. Bu nedenle günümüzde çoğu serum kullanılmaktadır. adsorbe edilmiş, Adsorbe edilmiş serumlar yalnızca belirli bir tip veya antijen tipine karşılık gelen tipik veya spesifik antikorlar içerir. Bu tür serumları elde etmek için Castellani yöntemi kullanılır - adsorpsiyon yöntemi. Bu yöntem, serumun ilgili heterojen bakterilerle doyurularak grup aglütininler açısından tüketilmesinden oluşur. Bu durumda grup antikorların adsorpsiyonu meydana gelir ve spesifik antikorlar serumda kalır. Bu sayede tek bir antijene karşı antikor içeren monoreseptör serumlar ve ortak bir antijene sahip iki veya üç ilişkili bakteri ile aglütinasyon reaksiyonu veren polivalan serumlar elde etmek mümkündür. Aglütinasyon serumunun titresi, aglütinasyon reaksiyonunun meydana geldiği en yüksek seyreltmedir.

Aglütinasyon serumları örneğin Escherichia, Salmonella ve Enterobacteriaceae familyasının diğer üyelerinin neden olduğu hastalıkların tanısında yaygın olarak kullanılmaktadır.

1.2. Serumların çökeltilmesi.

Çökeltici serumlar, tavşanların bakteriyel antijenler, bunların ekstraktları ve toksinleri ile immünize edilmesiyle elde edilir. Çöken serumun titresi, çökelme reaksiyonunun meydana geldiği antijenin maksimum seyreltilmesidir. Çökeltici serumlar, 1:100.000'den az olmayan yüksek bir titreyle üretilir. Bunun nedeni çökeltme reaksiyonunda belirlenen antijenin ince dağılmış bir yapıya sahip olması ve birim hacmin aynı hacimdeki serum antikorlarından daha fazla antikor içerebilmesidir.

Bulaşıcı hastalıkların tanısında spesifik çökeltici serumlar kullanılır ( şarbon veba, tularemi, difteri vb.), protein türlerini belirlemek için adli tıp muayenesinde, sıhhi uygulamalarda ürünlerdeki protein maddelerinin uygunluğunu tespit etmek için (sahtecilikten şüpheleniliyorsa).

Çökeltme reaksiyonu, bir halka çökeltme reaksiyonu veya bir jel çökeltme reaksiyonu olarak aşamalandırılabilir.

1.3.Hemolitik serumlar.

Hemolitik serumlar, tavşanların bir koyun eritrosit süspansiyonu ile immünize edilmesiyle elde edilir. Serum titresi, kompleman varlığında koyun kırmızı kan hücreleri süspansiyonunun %3'ünün hemolize neden olduğu maksimum seyreltmedir. Hemolitik serumlar kompleman titrasyonu için ve gösterge sisteminde kompleman fiksasyon reaksiyonu gerçekleştirilirken kullanılır.

1.4 Antiviral serumlar.

İmmün antiviral serumlar, virüsün türüne bağlı olarak çeşitli hayvanların aşılanmasıyla elde edilir. Örneğin, adenovirüslere karşı serum, tavşanların immünizasyonuyla elde edilir, influenza virüsüne karşı serum, beyaz gelinciklerin immünizasyonuyla elde edilir, vb.

Tanısal antiviral serumlar, RTGA, RSK., RN'deki virüsün tipini veya tipini belirlemek için kullanılır.

1.5.Lüminesans serumlar. Lüminesans serumlar, floresan boyalarla etiketlenmiş spesifik antikorlar içeren bağışıklık serumlarıdır. Lüminesan serumlar hazırlanırken, bağışıklık serumunun globulin fraksiyonuna güçlü kimyasal bağlar yoluyla çeşitli florokromlar eklenir. RIF yapılırken ışıldayan serumlar kullanılır.

1.6. Antiglobulin serumu.

Antiglobulin serumu (AGS), reaksiyonda hangi immün serumun kullanıldığına bağlı olarak insan veya tavşan serumundan elde edilen immünoglobulinlere karşı antikorlar içerir. AGS, hayvanların insan veya tavşan immünoglobülinleri ile aşılanmasıyla elde edilir. Bu tür serumlar, dolaylı RIF, ELISA reaksiyonu ve Coombs reaksiyonunu gerçekleştirmek için kullanılır.

İlaca karşı bağışıklık hemolitik anemi edinilmiş tüm immün hemolitik anemilerin yaklaşık %20'sini oluşturur Diğer ilaca bağlı immün hemolitik anemilerin çoğunda antikorlar, ilaç-membran glikoprotein kompleksine karşı yönlendirilir. Hemoliz yalnızca ilacı alırken görülür ve genellikle ilacın kesilmesinden sonra hızla durur.

Bağışıklık komplekslerinin oluşumu. Bir ilaç ve bir antikordan oluşan immün kompleksler, eritrositlerin membranlarına spesifik olmayan bir şekilde bağlanır ve bunu kompleman aktivasyonu takip eder. Kompleman antikorları ile yapılan doğrudan Coombs testi genellikle pozitif, IgG antikorları ile ise negatiftir. İlaca karşı antikorlar, hastanın serumunun inkübe edilmesiyle tespit edilebilir. normal kırmızı kan hücreleri tamamlayıcının varlığında ve bu ilaç. İlaca bağlı immün hemolitik anemi vakalarının çoğuna bu mekanizma neden olur (Tablo 16.3). İlacın tekrar tekrar reçete edilmesi küçük doz hemoglobinemi, hemoglobinüri ve akut böbrek yetmezliği ile kendini gösteren akut intravasküler hemolize neden olur.

Otoantikorların neden olduğu hemolizde iyileşme daha yavaştır (genellikle birkaç hafta). Coombs testi 1-2 yıl boyunca pozitif kalabilir.

İmmün hemolitik anemiye neden olan ilaçlar etki mekanizmalarına göre iki gruba ayrılır.

İlki şunları içerir:

Antikor içeren ilaçların sınıflandırılması

İyileştirici serumlar.

İmmünoglobulinler.

Gama globulinler.

Plazma preparatları.

Spesifik peynir altı suyu preparatlarını elde etmek için iki kaynak vardır:

hayvanların hiperimmünizasyonu (heterolog serum preparatları);

donör aşısı (homolog ilaçlar).

2.1. Heterolog serum preparatları.

Büyük hayvanlar, atlar çoğunlukla heterolog serum preparatlarının üretiminde kullanılır. Atların immünolojik reaktivitesi yüksektir ve nispeten kısa sürede onlardan yüksek titrede antikor içeren serum elde etmek mümkündür. Ek olarak, at proteininin insanlara tanıtılması en az sayıda advers reaksiyona neden olur. Diğer türlerin hayvanları nadiren kullanılır. 3 yaş ve üzeri kullanıma uygun hayvanlar hiperimmünizasyona tabidir; hayvanların kanında maksimum miktarda antikor biriktirmek ve mümkün olduğu kadar uzun süre yeterli seviyede tutmak için artan dozlarda antijenin tekrar tekrar uygulanması işlemi. Maksimum titre artışı döneminde spesifik antikorlar Hayvanların kanında 2 gün arayla 2-3 kan alma işlemi yapılır. Kan, şah damarından antikoagülan içeren steril bir şişeye 50 kg at ağırlığı başına 1 litre oranında alınır. Üretilen atlardan elde edilen kan daha ileri işlemler için laboratuvara aktarılır. Plazma, ayırıcılarda oluşturulan elementlerden ayrılır ve bir kalsiyum klorür çözeltisi ile defibrinlenir. Heterolog tam serumun kullanımına serum hastalığı ve anafilaksi şeklinde alerjik reaksiyonlar eşlik eder. Serum ilaçlarının olumsuz reaksiyonlarını azaltmanın ve etkinliğini arttırmanın bir yolu, onları saflaştırmak ve konsantre etmektir. Peynir altı suyu, peynir altı suyu proteinlerinin immünolojik olarak aktif fraksiyonları olmayan albüminlerden ve bazı globulinlerden saflaştırılır. Gama ve beta globulinler arasında elektroforetik hareketliliğe sahip psödoglobulinler immünolojik olarak aktiftir; antitoksik antikorlar bu fraksiyona aittir. Ayrıca immünolojik olarak aktif fraksiyonlar gama globulinleri içerir; bu fraksiyon antibakteriyel ve antiviral antikorları içerir. Balast proteinlerinden serumların saflaştırılması Diaferm-3 yöntemi kullanılarak gerçekleştirilir. Bu yöntemi kullanırken peynir altı suyu, amonyum sülfatın etkisi altında çökeltilerek ve peptik sindirimle saflaştırılır Diaferm 3 yöntemine ek olarak, kullanımı sınırlı olan diğerleri (Ultraferm, Alcoholferm, immünosorpsiyon vb.) geliştirilmiştir.

Antitoksik serumlardaki antitoksin içeriği, WHO tarafından kabul edilen uluslararası birimler (IU) cinsinden ifade edilir. Örneğin 1 IU tetanoz serumu, minimum 1000 IU'yu nötralize eden minimum miktarına karşılık gelir. öldürücü dozlar(DLm) 350 g ağırlığındaki bir kobay için tetanoz toksini. 1 ME anti-botulinum antitoksin, 20 g ağırlığındaki fareler için 10.000 DLm botulinum toksini nötralize eden en küçük serum miktarıdır. 1 ME anti-difteri serumu, buna karşılık gelir 250 g ağırlığındaki bir kobay için 100 DLm difteri toksini nötralize eden minimum miktar.

İmmünoglobulin preparatlarında IgG ana bileşendir (%97'ye kadar). IgA, IgM, IgD ilaca çok küçük miktarlarda dahil edilir. IgM ve IgA ile zenginleştirilmiş immünoglobulin (IgG) preparatları da üretilmektedir. İmmünoglobulin ilacının aktivitesi, serolojik reaksiyonlardan biri tarafından belirlenen spesifik antikorların titresinde ifade edilir ve ilacın kullanım talimatlarında belirtilir.

Heterolog serum preparatları bakterilerin, bunların toksinlerinin ve virüslerin neden olduğu bulaşıcı hastalıkların tedavisinde ve önlenmesinde kullanılır. Serumun zamanında erken kullanımı hastalığın gelişimini önleyebilir, kuluçka süresi uzar, ortaya çıkan hastalık daha hafif seyreder ve mortalite azalır.

Heterolog peynir altı suyu preparatlarının kullanılmasının önemli bir dezavantajı, vücudun yabancı bir proteine karşı duyarlı hale gelmesidir. Araştırmacıların belirttiği gibi, Rusya'daki nüfusun %10'undan fazlası at serumu globülinlerine karşı duyarlıdır. Bu bağlamda, heterolog serum ilaçlarının tekrar tekrar uygulanmasına, en tehlikelisi anafilaktik şok olan çeşitli alerjik reaksiyonlar şeklinde komplikasyonlar eşlik edebilir. Hastanın at proteinine duyarlılığını belirlemek için bu amaç için özel olarak hazırlanmış 1:100 oranında seyreltilmiş at serumu ile intradermal test yapılır. Terapötik serumu uygulamadan önce 0,1 ml seyreltilmiş at serumu ve reaksiyonu 20 dakika gözlemleyin.

2.2. Donör kanından homolog serum preparatları.

Homolog serum preparatları, spesifik bir patojene veya onun toksinlerine karşı özel olarak bağışıklanmış donörlerin kanından elde edilir. Bu tür ilaçlar insan vücuduna verildiğinde antikorlar vücutta biraz daha uzun süre dolaşarak pasif bağışıklık sağlar veya iyileştirici etki 4-5 hafta içinde. Günümüzde normal ve spesifik donör immünglobülinleri ve donör plazması kullanılmaktadır. Donör serumlarından immünolojik olarak aktif fraksiyonların izolasyonu, alkol çökeltme yöntemi kullanılarak gerçekleştirilir.

Homolog immünoglobulinler pratikte alantojeniktir, bu nedenle homolog serum ilaçlarının tekrar tekrar uygulanmasıyla anafilaktik tipte reaksiyonlar nadiren meydana gelir.

2.3 Bakteri tedavisine yönelik hazırlıklar (öbiyotikler).

Bakteri tedavisine yönelik preparatlar, normal mikrofloranın temsilcileri olan canlı, antagonistik olarak aktif bakteri türlerini içerir. Bu tür ilaçların örnekleri arasında laktobakterin, bifidumbakterin, kolibakterin, bifikol, baktisubtil vb. yer alır. Bu tür ilaçların içerdiği mikroorganizmalar, başta patojenik bağırsak mikropları olmak üzere çeşitli mikroorganizmalara karşı antagonistik özelliklere sahiptir. Bu tür preparatlar, karşılık gelen mikroorganizmaların veya bunların sporlarının sıvı besin ortamında büyütülmesi ve ardından donmuş halden vakum altında kurutulmasıyla elde edilir. İlaçlar disbiyoz tedavisinde kullanılır.

2.4 Terapötik bakteriyofajların preparasyonları.

Bakteriyofajlar bakteri virüsleridir. Bakteri hücresine nüfuz ederler, içinde çoğalırlar ve onu parçalarlar. Bulaşıcı hastalıkların tedavisinde ve önlenmesinde kullanımlarının temeli budur. Bakteriyofajların etkisi kesinlikle spesifiktir ve belirli türler ve patojen türleri ile ilişkili olarak kendini gösterir.

Bakteriyofaj preparatları elde etmek için endüstriyel faj suşları ve karşılık gelen bakteri kültürleri kullanılır. Sıvı ile reaktörlerde yetiştirildi besin ortamı bakteri kültürü fajın uterus süspansiyonu ile enfekte edilir. Üreme sırasında fajlar bakterileri parçalar ve besin ortamına salınır; bu bileşime fagolizat adı verilir. Besleyici ortam, bakteri hücrelerinin kalıntılarını (fagolizat filtratı) uzaklaştırmak için bakteri filtrelerinden geçirilir. Bakteriyofajlı süzüntü korunur ve sterillik, zararsızlık ve aktivite açısından izlenir. Bitmiş ürün berrak bir sıvıdır sarı renk, şişelerde paketlenmiştir. Sıvının yanı sıra, aside dayanıklı kaplamaya sahip kuru tabletli fajlar ve fajlı fitiller üretilir.

Fajlar terapötik ve profilaktik amaçlarla kullanılır. Ülkemizde salmonelloz, dizanteri, koliproteus, stafilokok, piyofaj vb. preparatları üretilmekte olup, hastalığa bağlı olarak fajlar lokal olarak yaraların boşluğuna verilmek üzere sulama, durulama, losyon, tamponlama şeklinde kullanılmaktadır. karın, plevral vb. boşluklar, ağızdan, ayrıca deri altı, intradermal ve kas içi olarak .

2.5 Sitokin preparatları.

Sitokinler vücudun çeşitli hücreleri tarafından üretilen ve spesifik olmayan bir immün sistemi uyarıcı etkiye sahip maddelerdir. Sitokinler çok sayıda ve çeşitlidir; etki mekanizmaları bakımından farklılık gösterirler, aynı zamanda spesifik olmayan direnç ve etkinin humoral ve hücresel faktörlerini normalleştirirler. Farklı aşamalar ve bağışıklık bağlantıları. Sitokinler aşılarda adjuvan olarak kullanılabileceği gibi tek başına ilaç olarak da kullanılabilir.

Patogenez.

A. Bağışıklık komplekslerinin oluşumu.Bir ilaç ve bir antikordan oluşan immün kompleksler, eritrositlerin membranlarına spesifik olmayan bir şekilde bağlanır ve bunu kompleman aktivasyonu takip eder. Kompleman antikorları ile yapılan doğrudan Coombs testi genellikle pozitif, IgG antikorları ile ise negatiftir. İlaca karşı antikorlar, hastanın serumunun kompleman ve ilaç varlığında normal kırmızı kan hücreleriyle inkübe edilmesiyle tespit edilebilir. İlaca bağlı immün hemolitik anemi vakalarının çoğu bu mekanizmadan kaynaklanır. İlacın küçük bir dozda bile tekrar tekrar uygulanması, hemoglobinemi, hemoglobinüri ve akut böbrek yetmezliği ile kendini gösteren akut intravasküler hemolize neden olur.

B. Sitotoksik antikorların oluşumu.İlaç, kırmızı kan hücrelerine bağlandığında immünojenik hale gelir ve genellikle IgG olmak üzere antikor oluşumunu uyarır. Yalnızca immünoglobulinlere karşı antikorlarla yapılan doğrudan Coombs testi pozitiftir. İlaca karşı antikorlar aşağıdaki şekilde belirlenir. Normal kırmızı kan hücreleri bu ilaçla inkübe edildikten sonra hastanın serumu ile karıştırılır. İlaca karşı antikorların varlığında hemoliz gelişir. Sitotoksik antikorların neden olduğu immün hemolitik aneminin klasik bir örneği, benzilpenisilinin neden olduğu anemidir. Nadiren ve yalnızca ilacın reçete edildiği durumlarda ortaya çıkar. yüksek dozlar(10 milyon ünite/günden fazla i.v.): İmmünoglobulinlere karşı antikorlarla yapılan doğrudan Coombs testi hastaların yaklaşık %3'ünde pozitiftir, hemoliz daha da az sıklıkla gelişir. Benzilpenisilin ekstravasküler hemolize neden olur. Benzilpenisiline karşı IgG'nin ortaya çıkışı, IgE'nin neden olduğu penisilin alerjisi ile ilişkili değildir.

V. Sefalosporinler gibi bazı ilaçlar, spesifik olmayan IgG ve kompleman agregasyonuna neden olur, ancak buna nadiren hemolitik anemi eşlik eder. Doğrudan Coombs testi pozitif olabilir; dolaylı Coombs testi her zaman negatiftir.

G. Otoantikorların oluşumu.İlaçlar Rh sistemi antijenlerine karşı otoantikor oluşumunu uyarabilir. Bu muhtemelen T baskılayıcıların aktivitesinin inhibisyonu ve karşılık gelen antikorları üreten B lenfosit klonlarının çoğalması nedeniyle meydana gelir. İmmünoglobulinlere karşı antikorlarla yapılan doğrudan Coombs testi pozitiftir. İlacın yokluğunda hasta serumunun normal kırmızı kan hücreleriyle inkübasyonu, IgG'nin kırmızı kan hücreleri tarafından emilmesiyle sonuçlanır. Otoantikorların kırmızı kan hücrelerine sentezine metildopa, levodopa ve mefenamik asit neden olur. Metildopa alan hastaların yaklaşık %15'inde direkt Coombs testi pozitiftir, ancak hastaların %1'inden azında hemolitik anemi gelişir. Metildopanın kırmızı kan hücrelerine karşı otoantikor oluşumu üzerindeki etkisinin doza bağlı olduğu görülmektedir. Anemi, birkaç aylık ilaç kullanımı sonrasında yavaş yavaş gelişir ve ekstravasküler hemolizden kaynaklanır.

2. Tedavi.İlk ve en önemli aşamaİlaca bağlı immün hemolitik aneminin tedavisi - buna neden olan ilacın kesilmesi. Hemoliz nedeniyle bağışıklık kompleksleri, bundan sonra iyileşme hızla gerçekleşir. Ağır vakalarda akut böbrek yetmezliği görülür. Otoantikorların neden olduğu hemolizde iyileşme daha yavaştır (genellikle birkaç hafta). Coombs testi 1-2 yıl boyunca pozitif kalabilir.

Bugün biyolojik laboratuvarlarda gerekli bir reaktif haline geldiler. içeren ilaçların satışı monoklonal antikorlar Ciddi hastalıkların (sedef hastalığı, kanser, artrit, skleroz) tedavisini amaçlayan şirketin milyarlarca dolarlık cirosu var. 1975 yılında hibridoma üretme yöntemi hakkında bir makale yayınlandığında sadece birkaç kişi bunların olduğuna inanıyordu. pratik kullanım.

Monoklonal antikorlar nelerdir

Üretiliyorlar bağışıklık hücreleri, aynı öncülden türeyen, aynı klona ait. Bu fenomen, kültürde B lenfositleri büyürken gözlenir. Bu tür antikorlar hemen hemen her doğal antijene karşı üretilebilir (örneğin, yabancı protein ve özel olarak bağlanacakları polisakkaritler. Daha sonra bu maddeyi tespit etmek veya saflaştırmak için kullanılırlar. Monoklonlar biyokimya, moleküler biyoloji ve tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır. Antikorların üretimi kolay değildir ve bu da maliyetlerini doğrudan etkiler.

Monoklonal antikorların hazırlanması

Bu süreç hayvanların, genellikle de farelerin aşılanmasıyla başlar. Bunu yapmak için, kendisine karşı antikorları sentezleyen spesifik bir antijen tanıtılır. Daha sonra dalak fareden çıkarılır ve bir hücre süspansiyonu elde etmek üzere homojenleştirilir. Antikoru üreten B hücrelerini içerir. Daha sonra kültürde sürekli olarak kendi türünü sentezleme yeteneğine sahip olan (tümör klonları) miyelom (murin plazmasitoma) ile karıştırılırlar.

Füzyon sayesinde, sürekli büyüyen ve belirli bir spesifikliğe sahip antikorların bir karışımını üretebilen tümör ve normal hücrelerin hibritleri (hibridomalar) oluşur. Hibrit elde edildikten sonraki adım klonlama ve seçmedir. Özel bir plakanın her bir oyuğuna yaklaşık 10 kaynaşmış hücre yerleştirilir ve kültürlenerek spesifik immünoglobulinlerin üretimi açısından test edilir. İstenilen özdeş antikorları (paraproteinler) içeren kuyucuklardan alınan hibridomalar klonlanır ve tekrar test edilir. Bu 1-2 kez yapılır.

Sonuç olarak, yalnızca arzu edilen benzersiz bir spesifikliğe sahip kendi immünoglobulinlerini üretebilen hücreler elde edilir. Klonlar daha sonra dondurulabilir ve saklanabilir. Veya fareleri yetiştirin, biriktirin, aşılayın, onlar da orada büyüyecekler. Daha sonra ortaya çıkan immünoglobulin molekülleri farklı yöntemler yabancı maddelerden arındırılır ve laboratuvarlarda teşhis veya tedavi amacıyla kullanılır.

Bir hibridoma kullanılarak elde edilen hücre klonunun, insan vücuduna girmesi durumunda ret reaksiyonuna neden olacak bir fare immünoglobülini olduğuna dikkat etmek önemlidir. Rekombinant teknolojiler sayesinde çözüm bulundu. Bir fare monoklonunun bir parçasını alarak bunu bir insan immünoglobülin parçasıyla birleştirdik. Sonuç olarak, kimerik olarak adlandırılan, zaten insanlara daha yakın olan, ancak yine de vücutta gerekli olanlardan farklı bağışıklık reaksiyonlarını tetikleyen hibridomlar elde edildi.

Bir sonraki adım sayesinde atıldı genetik mühendisliği ve %90'ı homolog olan hümanize antikorların yaratılmasıyla ilişkilidir. insan immünoglobulini. Orijinal hibridoma fare monoklonundan, spesifik bağlanmadan sorumlu hücrelerin füzyonundan yalnızca küçük bir parça kalır. Onlar kullanılır klinik denemeler.

Başvuru

Monoklonlar bağışıklık serumlarını başarıyla değiştirir. Hibridomalar analitikte inanılmaz yetenekler yaratmıştır: alışılmadık derecede yüksek çözünürlüğe sahip bir "mikroskop" olarak kullanılırlar. Onların yardımıyla, karakteristik benzersiz antijenleri tespit edebilirsiniz. kanser hücreleri Belirli dokular için belirli bir spesifikliğe sahip monoklonlar elde etmek ve bunları neoplazmların teşhisi ve tiplendirmesi için kullanmak. Ayrıca sedef hastalığının tedavisinde de kullanılırlar. multipl skleroz, artrit, Crohn hastalığı, meme kanseri ve diğerleri.

Sedef hastalığı için

Sedef hastalığının tedavisi için şiddetli formlar sistemik glukokortikosteroidleri reçete edin ( steroid hormonları), etkileyen hormonal arka plan insani ve baskıcı yerel bağışıklık. Sedef hastalığına yönelik monoklonal antikorlar, bağışıklık sistemini tamamen baskılamadan, yalnızca psoriatik inflamasyonun aktif hücrelerine etki eder. Tedavi edici etki– inflamasyon aktivitesinin azalması, cilt hücresi bölünmesinin normalleşmesi ve sedef hastalığı plaklarının kaybolması.

Romatoid artrit için

Monoklonal antikorlar romatizmal eklem iltihabı diğer yöntemlerin etkili olmadığı durumlarda etkili olduğu kanıtlanmıştır tedavi edici etki. İÇİNDE Avrupa ülkeleri Günümüzde bu hastalığın ana tedavi yönü bu tür ilaçlardır. Tedavi kursu uzun vadeli, çünkü ilaçlar etkili olmasına rağmen yavaş yavaş etki ediyor. Artrit teşhisindeki zorluklar nedeniyle tıbbi yardımİlk belirtilerde ve şüphelerde mümkün olduğu kadar erken iletişime geçmeye değer.

Kanser tedavisi için

İçin çok sayıda Onkoloji hastaları için monoklon içeren ilaçlar iyileşme ve hayata dönüş umudu haline geldi. normal hayat. Birçok kişi büyük malign tümörler Vücudunda çok sayıda tümör hücresi ve bir tedavi sürecinden sonra hayal kırıklığı yaratan bir prognoz olması nedeniyle durumunda bir iyileşme hissetti. Kanser tedavisine yönelik monoklonal antikorların bariz avantajları vardır:

Kötü huylu hücrelere bağlanarak onları daha görünür hale getirmekle kalmaz, aynı zamanda zayıflatır ve yapılarını bozarlar. Onlarla insan vücuduna savaşmak çok daha kolay.
Hedeflerini bulduktan sonra tümör büyüme reseptörlerinin bloke edilmesine yardımcı olurlar.
Antikorlar, küçük miktarlarda radyoaktif parçacıklarla kasıtlı olarak birleştirildiği laboratuvar koşullarında geliştirilir. Bu parçacıkları vücutta taşıyarak doğrudan tümöre iletirler ve orada etki etmeye başlarlar.

Tedavi prensibi

Monoklonların etkisi basittir: belirli antijenleri tanır ve onlara bağlanırlar. dolayısıyla bağışıklık sistemi sorunu hızla fark eder ve onunla savaşır. İnsan vücudunun antijenlerle kendi başına baş etmesine yardımcı olurlar. Bir diğer büyük avantaj ise, sağlıklı olanlara zarar vermeden, yalnızca patolojik olarak değiştirilmiş hücreler üzerinde hareket etmeleridir.

Monoklonal antikor içeren ilaçlar

Bu tip normal ve tümör hücrelerinin melezleri çok uzun zaman önce icat edilmemiş olsa da, bunları içeren ilaçların çeşitliliği şimdiden etkileyici görünüyor. Düzenli olarak yeni farmasötik ürünler ortaya çıkıyor. Bu tür ilaçlar, çoğu gibi ilaçlar, çeşitli yan etkileri vardır. Çoğunlukla monoklonal maddelerin kullanımından sonra tezahürle ilgili şikayetler alınır. alerjik reaksiyonlar kaşıntı, döküntü şeklinde. Nadiren tedaviye bulantı, kusma veya bağırsak bozukluğu. Hakkında daha ayrıntılı etkili ilaçlar daha fazla detay.

Stelara

Plak sedef hastalığının şiddetli formlarının tedavisinde kullanılır. Farmasötik ürün insan monoklonlarından oluşur ve bu da riskini azaltır. yan etkiler minimum düzeyde. Sürüm formu – çözüm deri altı uygulama bir şişe veya şırıngada. Önerilen doz günde 45 mg'dır. İkinci enjeksiyon ilkinden 4 hafta sonra yapılır, ardından 12 haftada bir enjeksiyon yapılır. Stelar'ın terapötik etkisi 15-20 gün içinde ortaya çıkacaktır. İdame tedavisi remisyon süresini garanti eder. 2 enjeksiyondan sonra cilt %75 oranında temizlenir.

Remicade

Fare ve insan monoklonlarına dayanan kimerik bir antikordur. İlaç epidermisin iltihaplanmasını azaltır ve cilt hücrelerinin bölünmesini düzenler. Serbest bırakma formu - hazırlık için liyofilize toz parenteral çözüm veya 20 ml'lik şişelerde. İnfüzyona yönelik bileşim, dakikada 2 ml'ye kadar bir hızda 2 saat boyunca intravenöz olarak uygulanır. Dozaj hastalığın ciddiyetine bağlıdır. Tekrarlanan enjeksiyonlar ilkinden 2 ve 6 hafta sonra yapılır. Etkiyi korumak için terapi her 1,5-2 ayda bir tekrarlanır.

Humira

İnsanla aynı peptid dizisine sahip rekombinant monoklon. İlaç tedavide etkilidir karmaşık şekiller sedef hastalığı, şiddetli aktif romatoid ve psoriatik artrit. Formda kullanılan deri altı enjeksiyonlar karın veya ön bölgede femur yüzeyi. Serbest bırakma formu: deri altı uygulama için çözüm. 40 mg'lık enjeksiyonlar 2 haftada bir uygulanır.