Przeciwciała to zażywanie narkotyków. Immunoterapia: mechanizm działania i zastosowanie kliniczne leków immunokorekcyjnych

Preparaty immunobiologiczne

w diagnostyce, profilaktyce i

leczenie chorób zakaźnych

Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L.A., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., Prokopyev V.IN.

Podpisano do druku Papier offsetowy. Nakład: 500 egzemplarzy.

Wydrukowano w drukarni: :;

Państwowa instytucja edukacyjna wyższego kształcenia zawodowego Ałtaj Państwowy Uniwersytet Medyczny Federalnej Agencji Zdrowia i Rozwoju Społecznego.

Preparaty immunobiologiczne

w diagnostyce, profilaktyce i

leczenie chorób zakaźnych

Podręcznik do samodzielnego przygotowania uczniów do kl ćwiczenia praktyczne w mikrobiologii

Barnauł, 2011

Recenzenci:

W podręczniku przedstawiono zagadnienia teoretyczne dotyczące natury i zastosowania preparatów immunobiologicznych – diagnostycznych, terapeutycznych i profilaktycznych: szczepionki, surowice, bakteriofagi itp.

Studenci wydziału profil medyczny(terapeutyczne, pediatryczne, stomatologiczne) wymagają głębszego zbadania mechanizmów działania leków bakteriologicznych, odpowiedź organizmu do podawania szczepionek i leków w surowicy, powikłania pojawiające się podczas stosowania niektórych leków.

Preparaty immunobiologiczne do diagnostyki, profilaktyki i leczenia chorób zakaźnych: Yurova V.A., Butakova L.Yu., Kraft L. .A., Kuklina N.V., Sazanskaya A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V. - Barnauł, 2002. - 46 s.

A.A., Karabasova E.B., Vinnikova Yu.V., Ilinskaya B.V., 2002

W profilaktyce, diagnostyce i leczeniu chorób zakaźnych szeroko stosuje się preparaty immunobiologiczne, sporządzane z żywych i zabitych mikroorganizmów (bakterie, riketsje, wirusy), produktów ich przemiany materii (toksyny), a także poszczególnych antygenów komórek drobnoustrojów ekstrahowanych z różne metody. Do celów terapeutycznych i diagnostycznych wykorzystuje się także surowice oraz specyficzne gammaglobuliny i immunoglobuliny. Ponadto preparaty bakteriofagowe znajdują szerokie zastosowanie w celach diagnostycznych i terapeutycznych.

Informacje o składzie, preparacie i mechanizmie działania leków immunobiologicznych są niezbędne lekarzowi w jego praktyce praktycznej. Jednocześnie praktycy nie zawsze mają możliwość zapoznania się z nowo powstającymi preparatami szczepionek i surowic oraz cechami ich stosowania. Ponadto współczesne podręczniki nie w pełni odzwierciedlają zagadnienia związane z przygotowaniem, mechanizmem działania i stosowaniem leków immunobiologicznych.

Wszystko to spowodowało potrzebę stworzenia podręcznika zawierającego informacje o lekach immunobiologicznych. Niniejsza instrukcja zawiera informacje dotyczące odbioru, substancji czynnej, stosowania leków immunobiologicznych oraz powikłań, jakie powstają podczas stosowania niektórych z nich. Podręcznik ma na celu przygotowanie studentów trzeciego roku kierunków lekarskich, pediatrycznych, stomatologicznych i medycyny prewencyjnej do zajęć praktycznych z mikrobiologii prywatnej.

Klasyfikacja preparatów immunobiologicznych

I.Leki diagnostyczne.

Preparaty zawierające antygeny - diagnostyka, alergeny, toksyny.

Preparaty zawierające przeciwciała – surowice diagnostyczne.

Bakteriofagi diagnostyczne.

II. Leki lecznicze i profilaktyczne.

Preparaty zawierające antygeny – szczepionki.

Preparaty zawierające przeciwciała - serum lecznicze oraz gammaglobuliny i immunoglobuliny.

Bakteriofagi.

Mikroorganizmy antagonistyczne.

Interferony i inne cytokiny.

Sekcja I

Leki diagnostyczne

Leki diagnostyczne stosuje się w diagnostyce laboratoryjnej wielu chorób, których dokładną diagnozę można postawić jedynie na podstawie badań bakteriologicznych i wirusologicznych. Ponadto leki diagnostyczne są niezbędne w przypadku potwierdzenia metodami laboratoryjnymi rozpoznania choroby o nietypowym przebiegu lub choroby charakteryzującej się polimorfizmem objawów. Ponadto diagnostyka chorób nie występujących na danym terenie i w dany czas, należy potwierdzić metodami laboratoryjnymi.

Techniki diagnostyki mikrobiologicznej znajdują szerokie zastosowanie w diagnostyce chorób zakaźnych. W tym przypadku stosuje się metody diagnostyki bakteriologicznej, wirusologicznej, serologicznej, alergicznej, immunologicznej, a także metody hybrydyzacji molekularnej i PCR. Do każdej z tych metod wymagane są określone preparaty diagnostyczne immunobiologiczne: preparaty diagnostyczne, surowice diagnostyczne (gatunek, typ, złożone, adsorbowane itp.), dopełniacz, alergeny, bakteriofagi, systemy do RIF i ELISA, sondy kwasów nukleinowych.

Klasyfikacja leków diagnostycznych

1. Preparaty zawierające przeciwciała – surowice diagnostyczne:

aglutynacja;

wytrącanie;

antytoksyczny;

hemolityczny;

środek przeciwwirusowy;

świecący;

antyglobulina.

2. Preparaty zawierające antygeny:

2.1) diagnostyka:

2.1.1.bakteryjny;

2.1.2.erytrocyt;

2.1.3.wirusowy;

2.2.) toksyny;

2.3.)alergeny.

3. Bakteriofagi diagnostyczne.

1. Surowice diagnostyczne

Są szeroko stosowane w diagnostyce chorób zakaźnych. reakcje immunologiczne do identyfikacji mikroorganizmów (bakterii i wirusów) lub toksyn. Do przeprowadzenia takich reakcji wymagane są specyficzne surowice diagnostyczne.

1.1. Serum aglutynujące.

Surowice aglutynujące uzyskuje się poprzez immunizację królików zawiesiną zabitych mikroorganizmów lub ich antygenów, a następnie pobranie od nich krwi i przygotowanie surowicy. Surowice aglutynujące służą do identyfikacji mikroorganizmów w reakcji aglutynacji. Wadą takich surowic jest to, że mogą powodować reakcje aglutynacji grupowej, ponieważ zawierają przeciwciała przeciwko bakteriom, które mają wspólne antygeny. Dlatego obecnie stosuje się większość serum adsorbowany, Zaadsorbowane surowice zawierają jedynie typowe lub specyficzne przeciwciała odpowiadające określonemu typowi lub typowi antygenu. Aby otrzymać takie serum, stosuje się metodę Castellani – metodę adsorpcyjną. Metoda ta polega na zubożeniu surowicy w aglutyniny grupowe poprzez nasycenie jej pokrewnymi heterogennymi bakteriami. W tym przypadku następuje adsorpcja przeciwciał grupowych, a w surowicy pozostają specyficzne przeciwciała. W ten sposób możliwe jest otrzymanie surowic monoreceptorowych – surowic zawierających przeciwciała tylko przeciwko jednemu antygenowi oraz surowic poliwalentnych dających reakcje aglutynacji z dwiema lub trzema spokrewnionymi bakteriami, które mają wspólny antygen. Miano surowicy aglutynującej to najwyższe rozcieńczenie, przy którym zachodzi reakcja aglutynacji.

Surowice aglutynujące znajdują szerokie zastosowanie m.in. w diagnostyce chorób wywoływanych przez Escherichia, Salmonella i innych przedstawicieli rodziny Enterobacteriaceae.

1.2. Wytrącające się serum.

Surowice strącające uzyskuje się poprzez immunizację królików antygenami bakteryjnymi, ich ekstraktami i toksynami. Miano surowicy wytrącającej to maksymalne rozcieńczenie antygenu, przy którym zachodzi reakcja wytrącania. Surowice strącające produkowane są z wysokim mianem – nie mniejszym niż 1:100 000. Wynika to z faktu, że antygen oznaczany w reakcji strącania ma strukturę drobno rozproszoną, a jednostkowa objętość może zawierać więcej przeciwciał niż taka sama objętość surowicy.

W diagnostyce chorób zakaźnych wykorzystuje się specyficzne surowice strącające ( wąglik, dżuma, tularemia, błonica itp.), w kryminalistycznych badaniach lekarskich w celu ustalenia gatunku białka, w praktyce sanitarnej w celu wykrycia zgodności substancji białkowych w produktach (w przypadku podejrzenia fałszerstwa).

Reakcję wytrącania można przeprowadzić jako reakcję wytrącania pierścieniowego lub reakcję wytrącania w żelu.

1.3.Serum hemolityczne.

Surowice hemolityczne otrzymuje się poprzez immunizację królików zawiesiną erytrocytów owczych. Miano surowicy to maksymalne rozcieńczenie, które w obecności dopełniacza powoduje hemolizę 3% zawiesiny czerwonych krwinek owiec. Surowice hemolityczne stosuje się do miareczkowania dopełniacza oraz podczas przeprowadzania reakcji wiązania dopełniacza w układzie wskaźnikowym.

1.4. Surowice przeciwwirusowe.

Odporne surowice przeciwwirusowe uzyskuje się poprzez immunizację różnych zwierząt w zależności od rodzaju wirusa. Na przykład surowicę przeciwko adenowirusom uzyskuje się poprzez immunizację królików, surowicę przeciwko wirusowi grypy uzyskuje się poprzez immunizację białych fretek itp.

Diagnostyczne surowice przeciwwirusowe służą do określenia typu lub typu wirusa w RTGA, RSK., RN.

1.5.Serum luminescencyjne. Surowice luminescencyjne to surowice odpornościowe zawierające specyficzne przeciwciała znakowane barwnikami fluorescencyjnymi. Przygotowując surowice luminescencyjne, do frakcji globulinowej surowicy odpornościowej dodaje się różne fluorochromy poprzez silne wiązania chemiczne. Podczas wykonywania RIF stosuje się serum luminescencyjne.

1.6. Surowica antyglobulinowa.

Surowica antyglobulinowa (AGS) zawiera przeciwciała przeciwko immunoglobulinom z surowicy ludzkiej lub króliczej, w zależności od tego, która surowica odpornościowa została użyta w reakcji. AGS uzyskuje się poprzez immunizację zwierząt immunoglobulinami ludzkimi lub króliczymi. Takie surowice służą do przeprowadzania pośredniej reakcji RIF, ELISA i reakcji Coombsa.

Odporność na leki niedokrwistość hemolityczna stanowi około 20% wszystkich nabytych niedokrwistości immunohemolitycznych. W większości innych niedokrwistości immunohemolitycznych wywołanych lekami przeciwciała są skierowane przeciwko kompleksowi błona lekowa i glikoproteina. Hemolizę obserwuje się jedynie podczas przyjmowania leku i zwykle ustępuje szybko po jego odstawieniu.

Tworzenie kompleksów immunologicznych. Kompleksy immunologiczne składające się z leku i przeciwciała wiążą się niespecyficznie z błonami erytrocytów, po czym następuje aktywacja dopełniacza. Bezpośredni test Coombsa z przeciwciałami dopełniacza jest zwykle dodatni, a z przeciwciałami przeciwko IgG jest ujemny. Przeciwciała przeciwko lekowi można wykryć poprzez inkubację surowicy pacjenta normalne czerwone krwinki w obecności dopełniacza i ten lek. Większość przypadków polekowej anemii hemolitycznej jest spowodowana tym mechanizmem (Tabela 16.3). Powtarzające się przepisywanie leku nawet w mała dawka powoduje ostrą hemolizę wewnątrznaczyniową, objawiającą się hemoglobinemią, hemoglobinurią i ostrą niewydolnością nerek.

W przypadku hemolizy wywołanej przez autoprzeciwciała powrót do zdrowia jest wolniejszy (zwykle kilka tygodni). Test Coombsa może pozostać pozytywny przez 1-2 lata.

Leki wywołujące immunologiczną niedokrwistość hemolityczną dzieli się na dwie grupy w zależności od mechanizmu działania.

Pierwsza zawiera

Klasyfikacja leków zawierających przeciwciała

Serum lecznicze.

Immunoglobuliny.

Gammaglobuliny.

Preparaty plazmowe.

Istnieją dwa źródła pozyskiwania określonych preparatów serwatkowych:

hiperimmunizacja zwierząt (preparaty surowicy heterologicznej);

szczepienie dawcy (leki homologiczne).

2.1. Heterologiczne preparaty surowicy.

Do produkcji preparatów surowicy heterologicznej wykorzystuje się głównie duże zwierzęta, konie. Konie charakteryzują się wysoką reaktywnością immunologiczną i w stosunkowo krótkim czasie można uzyskać od nich surowicę zawierającą wysokie miano przeciwciał. Ponadto wprowadzenie białka końskiego do organizmu człowieka powoduje najmniejszą liczbę działań niepożądanych. Rzadko wykorzystuje się zwierzęta innych gatunków. Zwierzęta nadające się do użytku w wieku 3 lat i starsze poddawane są hiperimmunizacji tj. proces wielokrotnego podawania rosnących dawek antygenu w celu zgromadzenia maksymalnej ilości przeciwciał we krwi zwierząt i utrzymania ich na wystarczającym poziomie jak najdłużej. W okresie maksymalnego wzrostu miana specyficzne przeciwciała We krwi zwierząt wykonuje się 2-3 upuszczania krwi w odstępie 2 dni. Krew pobiera się z żyły szyjnej w ilości 1 litra na 50 kg masy konia do sterylnej butelki zawierającej antykoagulant. Krew uzyskana od koni hodowlanych przekazywana jest do laboratorium w celu dalszego przetwarzania. Osocze oddzielane jest od powstałych pierwiastków w separatorach i odwłókniane roztworem chlorku wapnia. Stosowaniu heterologicznej surowicy pełnej towarzyszą reakcje alergiczne w postaci choroby posurowiczej i anafilaksji. Jednym ze sposobów ograniczenia działań niepożądanych leków stosowanych w surowicy, a także zwiększenia ich skuteczności, jest ich oczyszczenie i zagęszczenie. Serwatkę oczyszcza się z albumin i niektórych globulin, które nie są immunologicznie aktywnymi frakcjami białek serwatkowych. Pseudoglobuliny posiadające ruchliwość elektroforetyczną pomiędzy globulinami gamma i beta są aktywne immunologicznie; do tej frakcji należą przeciwciała antytoksyczne. Do frakcji aktywnych immunologicznie zaliczają się także gamma globuliny; frakcja ta obejmuje przeciwciała przeciwbakteryjne i przeciwwirusowe. Oczyszczanie surowic z białek balastowych przeprowadza się metodą Diaferm-3. Przy stosowaniu tej metody serwatka jest oczyszczana poprzez wytrącanie pod wpływem siarczanu amonu i trawienie trawienne Oprócz metody Diaferm 3 opracowano inne (Ultraferm, Alcoholferm, immunosorpcja itp.), które mają ograniczone zastosowanie.

Zawartość antytoksyn w surowicach antytoksycznych wyrażana jest w jednostkach międzynarodowych (IU) przyjętych przez WHO. Na przykład 1 IU surowicy tężcowej odpowiada jej minimalnej ilości, która neutralizuje minimum 1000 dawki śmiertelne(DLm) toksyny tężcowej dla świnki morskiej o masie 350 g 1 ME antytoksyny przeciw botulinowej odpowiada najmniejszej ilości surowicy, która neutralizuje 10 000 DLm toksyny botulinowej dla myszy o masie 20 g minimalna ilość neutralizująca 100 DLm toksyny błoniczej dla świnki morskiej o wadze 250 g.

W preparatach immunoglobulin głównym składnikiem (do 97%) jest IgG. IgA, IgM, IgD są zawarte w leku w bardzo małych ilościach. Produkowane są także preparaty immunoglobulin (IgG) wzbogacone w IgM i IgA. Aktywność leku immunoglobulinowego wyraża się w mianie specyficznych przeciwciał, określonych przez jedną z reakcji serologicznych i jest wskazana w instrukcji stosowania leku.

Heterologiczne preparaty surowicy stosowane są w leczeniu i profilaktyce chorób zakaźnych wywołanych przez bakterie, ich toksyny i wirusy. Wczesne podanie surowicy w odpowiednim czasie może zapobiec rozwojowi choroby, wydłużyć okres inkubacji, pojawiająca się choroba ma łagodniejszy przebieg i zmniejszyć śmiertelność.

Istotną wadą stosowania heterologicznych preparatów serwatkowych jest występowanie uczulenia organizmu na obce białko. Jak wskazują badania, ponad 10% populacji Rosji jest uczulonych na globuliny surowicy końskiej. W związku z tym wielokrotnemu podawaniu heterologicznych leków w surowicy mogą towarzyszyć powikłania w postaci różnych reakcji alergicznych, z których najniebezpieczniejszym jest wstrząs anafilaktyczny. W celu określenia wrażliwości pacjenta na białko końskie wykonuje się próbę śródskórną z użyciem specjalnie przygotowanej do tego celu surowicy końskiej rozcieńczonej w stosunku 1:100. Przed podaniem serum leczniczego należy 0,1 ml rozcieńczyć serum końskie i obserwować reakcję przez 20 minut.

2.2. Preparaty surowicy homologicznej z krwi dawcy.

Preparaty surowicy homologicznej uzyskuje się z krwi dawców specjalnie uodpornionych przeciwko określonemu patogenowi lub jego toksynom. Kiedy takie leki zostaną wprowadzone do organizmu człowieka, przeciwciała krążą w organizmie nieco dłużej, zapewniając odporność bierną lub efekt uzdrawiający w ciągu 4-5 tygodni. Obecnie stosuje się immunoglobuliny dawcy normalne i swoiste oraz osocze dawcy. Izolację immunologicznie aktywnych frakcji z surowic dawców przeprowadza się metodą wytrącania alkoholem.

Immunoglobuliny homologiczne są praktycznie areaktogenne, dlatego rzadko występują reakcje typu anafilaktycznego po wielokrotnym podaniu homologicznych leków w surowicy.

2.3. Preparaty do terapii bakteryjnej (eubiotyki).

Preparaty do terapii bakteryjnej zawierają żywe, antagonistycznie aktywne szczepy bakterii – przedstawicieli normalnej mikroflory. Przykładami takich leków są laktobakteryna, bifidumbakteryna, kolibakteryna, bifikol, bactisubtil itp. Mikroorganizmy zawarte w takich lekach mają właściwości antagonistyczne w stosunku do różnych mikroorganizmów, przede wszystkim patogennych drobnoustrojów jelitowych. Preparaty takie otrzymuje się poprzez hodowlę odpowiednich mikroorganizmów lub ich zarodników w płynnej pożywce, a następnie suszenie pod próżnią ze stanu zamrożonego. Leki stosuje się w leczeniu dysbiozy.

2.4. Preparaty bakteriofagów terapeutycznych.

Bakteriofagi to wirusy bakterii. Wnikają do komórki bakteryjnej, namnażają się w niej i dokonują jej lizy. Stanowi to podstawę ich stosowania w leczeniu i profilaktyce chorób zakaźnych. Działanie bakteriofagów jest ściśle specyficzne i objawia się w odniesieniu do określonych gatunków i typów patogenów.

Do otrzymania preparatów bakteriofagowych wykorzystuje się przemysłowe szczepy fagów i odpowiadające im hodowle bakteryjne. Uprawiane w reaktorach z cieczą pożywka kultura bakteryjna jest zakażona maciczną zawiesiną faga. Podczas rozmnażania fagi dokonują lizy bakterii i są uwalniane do pożywki; kompozycja ta nazywa się fagolizatem. Pożywka przepuszczana jest przez filtry bakteryjne w celu usunięcia resztek komórek bakteryjnych (filtrat fagolizatu). Filtrat z bakteriofagami jest konserwowany i monitorowany pod kątem sterylności, nieszkodliwości i aktywności. Gotowy produkt jest klarownym płynem żółty kolor, pakowane w butelki. Oprócz płynnych, produkowane są suche tabletkowane fagi z kwasoodporną powłoką i czopki z fagami.

Fagi wykorzystywane są w celach terapeutycznych i profilaktycznych. W naszym kraju produkowane są preparaty na salmonellozę, czerwonkę, coliproteus, gronkowce, pyofag itp. W zależności od choroby fagi stosuje się lokalnie w postaci irygacji, płukania, balsamów, tamponowania, do wprowadzenia do jamy rany, jamy brzusznej, opłucnowej itp., doustnie, podskórnie, śródskórnie i domięśniowo .

2.5 Preparaty cytokin.

Cytokiny to substancje wytwarzane przez różne komórki organizmu i mające niespecyficzne działanie immunostymulujące. Cytokiny są bardzo liczne i różnorodne, różnią się mechanizmami działania, normalizują natomiast czynniki humoralne i komórkowe o niespecyficznej oporności i wpływie różne etapy i ogniwa immunitetu. Cytokiny można stosować jako adiuwanty w szczepionkach i można je stosować jako samodzielne leki.

Patogeneza.

A. Tworzenie kompleksów immunologicznych.Kompleksy immunologiczne składające się z leku i przeciwciała wiążą się niespecyficznie z błonami erytrocytów, po czym następuje aktywacja dopełniacza. Bezpośredni test Coombsa z przeciwciałami dopełniacza jest zwykle dodatni, a z przeciwciałami przeciwko IgG jest ujemny. Przeciwciała przeciwko lekowi można wykryć inkubując surowicę pacjenta z prawidłowymi krwinkami czerwonymi w obecności dopełniacza i leku. Większość przypadków polekowej anemii hemolitycznej jest spowodowana tym mechanizmem. Powtarzane podawanie leku, nawet w małej dawce, powoduje ostrą hemolizę wewnątrznaczyniową, objawiającą się hemoglobinemią, hemoglobinurią i ostrą niewydolnością nerek.

B. Tworzenie przeciwciał cytotoksycznych.Po związaniu się z czerwonymi krwinkami lek staje się immunogenny i stymuluje tworzenie przeciwciał, zwykle IgG. Tylko bezpośredni test Coombsa z przeciwciałami przeciwko immunoglobulinom jest dodatni. Przeciwciała przeciwko lekowi określa się w następujący sposób. Po inkubacji normalnych czerwonych krwinek z tym lekiem miesza się je z surowicą pacjenta. W obecności przeciwciał przeciwko lekowi rozwija się hemoliza. Klasycznym przykładem immunologicznej niedokrwistości hemolitycznej wywołanej przez przeciwciała cytotoksyczne jest niedokrwistość spowodowana benzylopenicyliną. Występuje rzadko i tylko wtedy, gdy lek jest przepisany wysokie dawki(ponad 10 mln j./dobę dożylnie): bezpośredni test Coombsa z przeciwciałami przeciwko immunoglobulinom daje wynik dodatni u około 3% pacjentów, hemoliza rozwija się jeszcze rzadziej. Benzylopenicylina powoduje hemolizę pozanaczyniową. Pojawienie się IgG wobec benzylopenicyliny nie jest związane z alergią na penicyliny wywołaną przez IgE.

V. Niektóre leki, np. cefalosporyny, powodują agregację nieswoistych IgG i dopełniacza, chociaż rzadko towarzyszy temu niedokrwistość hemolityczna. Bezpośredni test Coombsa może dać wynik pozytywny; pośredni test Coombsa jest zawsze negatywny.

G. Tworzenie autoprzeciwciał.Leki mogą stymulować tworzenie autoprzeciwciał przeciwko antygenom układu Rh. Dzieje się tak prawdopodobnie na skutek hamowania aktywności supresorów T i proliferacji klonów limfocytów B, które wytwarzają odpowiednie przeciwciała. Bezpośredni test Coombsa z przeciwciałami przeciwko immunoglobulinom jest dodatni. Inkubacja surowicy pacjenta z prawidłowymi krwinkami czerwonymi pod nieobecność leku powoduje wchłanianie IgG przez krwinki czerwone. Syntezę autoprzeciwciał przeciwko krwinkom czerwonym powodują metyldopa, lewodopa i kwas mefenamowy. Bezpośredni test Coombsa daje wynik pozytywny u około 15% pacjentów przyjmujących metylodopę, ale niedokrwistość hemolityczna rozwija się u mniej niż 1% pacjentów. Wpływ metyldopy na tworzenie autoprzeciwciał przeciwko czerwonym krwinkom wydaje się być zależny od dawki. Niedokrwistość rozwija się stopniowo, w ciągu kilku miesięcy zażywania narkotyków i jest spowodowana hemolizą pozanaczyniową.

2. Leczenie.Pierwszy i najbardziej ważny etap Leczenie polekowej niedokrwistości hemolitycznej immunologicznej – odstawienie leku, który ją wywołał. Z powodu hemolizy kompleksy immunologiczne, po czym szybko następuje powrót do zdrowia. W ciężkich przypadkach obserwuje się ostrą niewydolność nerek. W przypadku hemolizy wywołanej przez autoprzeciwciała powrót do zdrowia jest wolniejszy (zwykle kilka tygodni). Test Coombsa może pozostać pozytywny przez 1-2 lata.

Dziś stały się niezbędnym odczynnikiem w laboratoriach biologicznych. Sprzedaż leków zawierających przeciwciała monoklonalne, ukierunkowane na leczenie ciężkich chorób (łuszczyca, nowotwory, zapalenie stawów, stwardnienie rozsiane), osiągają wielomiliardowe obroty. Choć w 1975 roku, kiedy ukazał się artykuł na temat sposobu wytwarzania hybrydom, tylko nieliczni wierzyli w ich skuteczność. praktyczne użycie.

Co to są przeciwciała monoklonalne

Są produkowane komórki odpornościowe, pochodzący od tego samego poprzednika, należący do tego samego klonu. Zjawisko to obserwuje się podczas hodowli limfocytów B. Takie przeciwciała można wytwarzać przeciwko niemal każdemu naturalnemu antygenowi (na przykład walki obce białko i polisacharydy), które będą specyficznie wiązać. Wykorzystuje się je następnie do wykrywania tej substancji lub jej oczyszczania. Monoklony są szeroko stosowane w biochemii, biologii molekularnej i medycynie. Przeciwciała nie są łatwe w produkcji, co bezpośrednio wpływa na ich koszt.

Przygotowanie przeciwciał monoklonalnych

Proces ten rozpoczyna się od uodpornienia zwierząt, zazwyczaj myszy. W tym celu wprowadza się specyficzny antygen, który syntetyzuje przeciwko niemu przeciwciała. Następnie myszom usuwa się śledzionę i homogenizuje w celu uzyskania zawiesiny komórek. Zawiera komórki B, które wytwarzają przeciwciała. Następnie miesza się je ze szpiczakiem (mysim plazmocytomą), który ma ciągłą zdolność do syntezy własnego rodzaju w hodowli (klony nowotworowe).

Dzięki fuzji powstają hybrydy komórek nowotworowych i prawidłowych (hybrydomy), które stale rosną i są zdolne do wytwarzania mieszaniny przeciwciał o określonej swoistości. Kolejnym krokiem po uzyskaniu hybrydy jest klonowanie i selekcja. Około 10 połączonych komórek umieszcza się w każdym dołku specjalnej płytki i hoduje, testując je pod kątem wytwarzania specyficznych immunoglobulin. Hybrydomy ze studzienek zawierających pożądane identyczne przeciwciała (paraproteiny) klonuje się i testuje ponownie. Odbywa się to 1-2 razy.

W efekcie otrzymuje się komórki zdolne do wytwarzania własnych immunoglobulin o tylko jednej pożądanej, unikalnej swoistości. Klony można następnie zamrozić i przechowywać. Lub uprawiaj, gromadź, zaszczepiaj myszy, gdzie one również będą rosły. Następnie powstałe cząsteczki immunoglobulin różne metody są oczyszczane z obcych zanieczyszczeń i wykorzystywane do diagnostyki w laboratoriach lub do celów terapeutycznych.

Należy pamiętać, że klon komórkowy uzyskany za pomocą hybrydomy jest mysią immunoglobuliną, która, jeśli dostanie się do organizmu człowieka, spowoduje reakcję odrzucenia. Rozwiązanie znaleziono dzięki technologiom rekombinacyjnym. Biorąc fragment mysiego monoklonu, połączyliśmy go z fragmentem ludzkiej immunoglobuliny. W rezultacie uzyskano hybrydomy, zwane chimerami, które były już bliższe człowiekowi, ale mimo to wywoływały w organizmie reakcje immunologiczne odbiegające od wymaganych.

Kolejny krok został zrobiony dzięki Inżynieria genetyczna i wiąże się z powstawaniem tzw. przeciwciał humanizowanych, w 90% homologicznych immunoglobulina ludzka. Z pierwotnego monoklonu myszy hybrydomy tylko niewielka część pozostaje po fuzji komórek odpowiedzialnych za specyficzne wiązanie. Są używane w Badania kliniczne.

Aplikacja

Monoklony skutecznie wypierają surowice odpornościowe. Hybrydomy stworzyły niesamowite możliwości analityczne: wykorzystuje się je jako „mikroskop” o niezwykle wysokiej rozdzielczości. Za ich pomocą można wykryć unikalne antygeny charakterystyczne dla Komórki nowotworowe specyficznych tkanek, pozyskać dla nich monoklony o określonej swoistości i wykorzystać je do diagnostyki i typowania nowotworów. Stosowane są także w leczeniu łuszczycy, stwardnienie rozsiane, zapalenie stawów, choroba Leśniowskiego-Crohna, rak piersi i wiele innych.

Na łuszczycę

Do leczenia łuszczycy ciężkie formy przepisać glikokortykosteroidy ogólnoustrojowe ( hormony steroidowe), wpływające tło hormonalne ludzki i tłumiący lokalna odporność. Przeciwciała monoklonalne przeciwko łuszczycy działają wyłącznie na aktywne komórki łuszczycowego zapalenia, bez całkowitego tłumienia układu odpornościowego. Efekt terapeutyczny– zmniejszenie aktywności stanu zapalnego, normalizacja podziału komórek skóry i zanik blaszek łuszczycowych.

Na reumatoidalne zapalenie stawów

Przeciwciała monoklonalne dla reumatoidalne zapalenie stawów okazały się skuteczne w sytuacjach, w których inne środki okazały się nieskuteczne efekt terapeutyczny. W kraje europejskie Obecnie głównym kierunkiem terapeutycznym tej choroby są takie leki. Kurs terapeutyczny długoterminowe, ponieważ leki działają, choć skutecznie, ale powoli. Ze względu na trudności w diagnozowaniu zapalenia stawów Opieka medyczna Warto zgłosić się jak najwcześniej, już przy pierwszych objawach i podejrzeniach.

Do leczenia raka

Dla duża liczba Dla pacjentów onkologicznych leki zawierające monoklony stały się nadzieją na wyzdrowienie i powrót do zdrowia normalne życie. Wiele osób z dużymi nowotwory złośliwe organizmie, dużo komórek nowotworowych i rozczarowujące rokowania po zakończeniu terapii, poczuła poprawę swojego stanu. Przeciwciała monoklonalne w leczeniu raka mają oczywiste zalety:

Przyłączając się do komórek złośliwych, nie tylko czynią je bardziej widocznymi, ale także osłabiają je i zakłócają ich strukturę. Z nimi do ludzkiego ciała dużo łatwiej walczyć.
Po znalezieniu celu pomagają blokować receptory wzrostu nowotworu.
Przeciwciała powstają w warunkach laboratoryjnych, gdzie celowo łączy się je z niewielkimi ilościami cząstek radioaktywnych. Transportując te cząsteczki po całym organizmie, dostarczają je bezpośrednio do guza, gdzie zaczynają działać.

Zasada leczenia

Działanie monoklonów jest proste: rozpoznają określone antygeny i wiążą się z nimi. A tym samym układ odpornościowy szybko zauważa problem i walczy z nim. Pomagają organizmowi ludzkiemu samodzielnie radzić sobie z antygenami. Kolejną ogromną zaletą jest to, że działają wyłącznie na komórki zmienione patologicznie, nie szkodząc zdrowym.

Leki z przeciwciałami monoklonalnymi

Choć tego typu hybrydy komórek normalnych i nowotworowych wynaleziono stosunkowo niedawno, to gama leków je zawierających już wygląda imponująco. Regularnie pojawiają się nowe produkty farmaceutyczne. Takie leki, jak większość leki, mają różne skutki uboczne. Często po zastosowaniu substancji monoklonalnych pojawiają się skargi dotyczące manifestacji reakcje alergiczne w postaci swędzenia, wysypki. Rzadko terapii towarzyszą nudności, wymioty lub zaburzenie jelitowe. Więcej na temat skuteczne leki więcej szczegółów.

Stelara

Stosowany w leczeniu ciężkich postaci łuszczycy plackowatej. Lek składa się z ludzkich monoklonów, co zmniejsza ryzyko skutki uboczne do minimum. Formularz wydania – rozwiązanie dla podanie podskórne w butelce lub strzykawce. Zalecana dawka wynosi 45 mg na dzień. Drugie wstrzyknięcie podaje się 4 tygodnie po pierwszym, następnie zastrzyki podaje się raz na 12 tygodni. Efekt terapeutyczny Stelaru pojawi się w ciągu 15-20 dni. Leczenie podtrzymujące zapewnia trwałość remisji. Po 2 wstrzyknięciach skóra jest oczyszczona w 75%.

Remikada

Jest to przeciwciało chimeryczne oparte na monoklonach mysich i ludzkich. Lek łagodzi stany zapalne naskórka i reguluje podział komórek skóry. Forma uwalniania – liofilizowany proszek do przygotowania roztwór pozajelitowy lub w butelkach 20 ml. Kompozycję do infuzji podaje się dożylnie w ciągu 2 godzin z szybkością do 2 ml na minutę. Dawkowanie zależy od ciężkości choroby. Powtarzane zastrzyki podaje się 2 i 6 tygodni po pierwszym. Dla utrzymania efektu terapię powtarza się co 1,5-2 miesiące.

Humira

Rekombinowany monoklon z sekwencją peptydową identyczną z ludzką. Lek jest skuteczny w terapii złożone kształtyłuszczyca, ciężki, aktywny reumatoidalny stan zapalny i łuszczycowe zapalenie stawów. Używany w formularzu zastrzyki podskórne w okolicy brzucha lub z przodu powierzchnia kości udowej. Forma uwalniania: roztwór do podawania podskórnego. Zastrzyki po 40 mg podaje się raz na 2 tygodnie.