Błonica Corynebacterium. Kultura na błonicę (Corynebacterium diphtheriae)

Rodzaj Corynebacterium diphtheriae obejmuje patogen diphtheriae i oportunistyczne corynebacteria. pseudodiphtheria corynebacteria C. pseudodiphtheriticum, C. xerosis i C. wrzody, żyjące w organizmie człowieka.

Corynehactcrium diphtheriae została odkryta w 1883 roku przez E. Clsbsa. wyizolowany w 1884 r. przez F. Lefflera.

Morfologia, kultura, właściwości biochemiczne. Corynebacteria diphtheria to cienkie, lekko zakrzywione pałeczki Gram-dodatnie o długości 1-5 µm, nie tworzą wici, zarodników ani torebek. Charakterystyczne cechy morfologiczne tych bakterii: maczugowate zgrubienia na końcach, w których znajdują się ziarna wolutyny, ułożenie pręcików w rozmazie jodowym pod kątem do siebie, w formie litery V. Ziarna wolutyny wykrywane są poprzez barwienie błękitem Lefflera (barwią się intensywniej niż ciało bakterii) lub według Psyssera (ciało bakterii jest zabarwione żółty, ziarna są ciemnoniebieskie) (wkładka kolorowa, ryc. 34).

Fakultatywny beztlenowy. Optymalna temperatura dla wzrostu 37°C, pH 7,6. Rośnie na specjalnych pożywkach: na podłożu fakultatywnym – serwatka skoagulowana, na podłożu Clauberga. zawierający skoagulowaną serwatkę i telluryn potasu. W zależności od właściwości biologicznych wyróżnia się biowary pałeczek błonicy: pałeczki biovar gravis tworzą na podłożu Clauberga duże, szare kolonie z nierównymi krawędziami, promienistymi prążkami, przypominającymi kwiat stokrotki; biovar mitis – kolonie małe, czarne, wypukłe o gładkich krawędziach; intermedius - kolonie typu pośredniego. Największą zjadliwość ma typ gravis. Charakterystyczny jest wzrost na skośnej walcowanej serwatce - nawet przy obfitym wysiewie nie tworzy się ciągły wzrost, kolonie nie łączą się, wzrost przypomina brukowaną uliczkę lub skórę shagreen.

Różnice we właściwościach enzymatycznych poszczególne gatunki Do ich różnicowania wykorzystuje się corynebacteria (tab. 10).

Antygeny. Na podstawie antygenu O, C. diphtheriae dzieli się na 11 serotypów. Czynniki chorobotwórczości. Główna właściwość czynnika wywołującego błonicę

Toksyczność. Egzotoksyna prątka błonicy powoduje miejscową reakcję zapalną i ogólne zatrucie organizmu z uszkodzeniem nadnerczy, mięśnia sercowego, układ nerwowy. Istnieją toksyczne i nietoksyczne szczepy C. diphtheriae. Błonicę wywołują szczepy toksyczne. Zdolność do wytwarzania egzotoksyny jest związana z obecnością w komórce profaga niosącego gen tox+, odpowiedzialnego za syntezę toksyny.

Siłę toksyny mierzy się w Dim – najmniejszej ilości toksyny, która zabija świnkę morską o masie 250 g w ciągu 3-4 dni. Toksyna wszystkich prątków błonicy jest identyczna antygenowo; nie ma serotypów.

Oprócz toksyny Corynebacterium diphtheria wytwarza enzymy: hialuronidazę, neuraminidazę, fibrynolizynę, które zapewniają ich dystrybucję w tkankach, jednak bakteriemia nie objawia się klinicznie.

Zrównoważony rozwój. Prątki błonicy są odporne na suszenie i niskie temperatury. Kiedy dziecięce zabawki dostaną się na naczynia ze śliną i folią, mogą tam pozostać przez długi czas. Są wrażliwe na środki dezynfekcyjne i giną natychmiast po ugotowaniu.

Choroba u ludzi.Źródłem zakażenia są chorzy i nosiciele. Główną drogą przenoszenia są kropelki unoszące się w powietrzu, ale możliwy jest także kontakt i kontakt domowy – poprzez naczynia i zabawki. Choroby występują u osób, które nie mają odporności antytoksycznej. U osób z odpornością antytoksyczną, przy braku odporności przeciwdrobnoustrojowej na błonicę maczugowców, może rozwinąć się nosicielstwo tych patogenów z lokalizacją na błonie śluzowej gardła lub nosa.

Okres inkubacji choroby wynosi 2-10 dni. W miejscu penetracji rozwija się stan zapalny i tworzy się film błoniczy. Egzotoksyna przedostaje się do krwi i rozwija się toksyna. Formy kliniczne błonica: błonica gardła (85-90% wszystkich przypadków), nosa, krtani, oczu, zewnętrznych narządów płciowych, skóry, ran itp.

Odporność. Po chorobie mamy silną odporność antytoksyczną, ale powtarzające się przypadki nadal obserwuje się poziom antytoksyny we krwi, stosując RNGA z erythrocyte diapausticum zawierającym erytrocyty z zaadsorbowaną na nich toksoidem błoniczym.

Diagnostyka laboratoryjna. Wczesna diagnoza jest ważna, aby w odpowiednim czasie rozpocząć leczenie. Materiał do badań pobiera się z dotkniętych obszarów za pomocą dwóch sterylnych wacików bawełnianych. Podczas badania na nosicielstwo pobiera się śluz z gardła i nosa. Bardzo ważne jest natychmiastowe przesłanie materiału do laboratorium.

Jeden z wymazów służy do posiewu, a drugim wykonuje się rozmazy badanie mikroskopowe, ale rzadko daje pozytywny wynik. Najważniejsze jest badanie bakteriologiczne - zaszczepienie na płytce z pożywką, badanie wyhodowanych kolonii: rozmazy, badanie morfologii, określenie toksyczności przez wytrącenie na agarze z surowicą antytoksyczną. Gatunek C. diphhlheriae jest określany na podstawie właściwości biochemicznych. Wyniki badania bakteriologicznego wskazują: „wyizolowano toksyczne C. diphtheriae” lub „wyizolowano nietoksyczne C. diphtheriae”. Ponieważ skuteczność leczenia zależy od możliwie najwcześniejszego jego rozpoczęcia, stosuje się je metoda przyspieszona wykrywanie toksyny błoniczej bezpośrednio w materiale testowym za pomocą reakcji opóźnienia RIGA. Zasada reakcji: materiał badany w różnych rozcieńczeniach dodaje się do określonej ilości surowicy antytoksycznej, po czym dodaje się zestaw do diagnostyki erytrocytów zawierający toksoid błoniczy. W kontroli (bez materiału badanego) surowica antytoksyczna powoduje aglutynację erytrocytów. Jeśli materiał testowy zawiera toksynę, łączy się ona z surowicą i powoduje zatrzymanie PHHA.

Leki profilaktyczne i lecznicze. Główne znaczenie w profilaktyce błonicy mają czynne uodporniania, które przeprowadza się już od trzeciego miesiąca życia szczepionką zawierającą toksoid błoniczy: DTP, ADS. W przyszłości ponowne szczepienie zostanie przeprowadzone dla dzieci, a następnie dla dorosłych. Przeciwwskazania do szczepień są bardzo ograniczone.

Istnieją szczepionki o obniżonej zawartości antygenów: DTP-m, ADS-m, AD-m. stosowany w celu uodpornienia osób, dla których podanie pełnej dawki szczepionki jest przeciwwskazane.

W leczeniu chorych najważniejsza jest wczesna swoista seroterapia antytoksyczną surowicą błoniczą w dawkach zależnych od lokalizacji wyrostka. Serum podaje się metodą Bezredki. Jednocześnie prowadzona jest antybiotykoterapia (benzylopenicylina, erytromycyna, ryfampicyna itp.).

Inne maczugowców

Corynebacterium pochwy. Z. pochwy jest izolowany od zdrowych kobiet, a także od zapalenia pochwy w związku z bakterie beztlenowe. Metronidazol stosuje się w leczeniu zapalenia pochwy.

MYKOBAKTERIE

Rodzaj Mycobacterium obejmuje przedstawicieli patogenów - patogeny gruźlicy, patogeny mykobakteriozy niegruźliczej, patogeny trądu, a także duża liczba saprofity i gatunki oportunistyczne, na przykład. M. smegmatis jest mieszkańcem zewnętrznych narządów płciowych, M. phlei jest mieszkańcem obiektów środowiskowych.

1. CORYNEBAKTERIE

Rodzaj Corynebacterium obejmuje bakterie posiadające maczugowate zgrubienia na końcach: maczugowców chorobotwórcze dla ludzi i zwierząt oraz dyfteroidy (maczugowców niepatogennych i oportunistycznych).

Czynnik sprawczy błonicy

Odkrycie czynnika wywołującego błonicę zostało poprzedzone szeroko zakrojonymi badaniami klinicznymi, patologicznymi, epidemiologicznymi i badania eksperymentalne, co w dużej mierze utorowało drogę do jego odkrycia (Klebs E., 1883), izolacji w czystej kulturze (Leffler F., 1884), produkcji toksyny (Ru E. i Yersen A., 1888), surowicy antytoksycznej (Bering E. , Kitazato, 1890, Ru E., 1894) i toksoid błoniczy (Ramon G., 1923).

Morfologia. Diphtheria corynebacteria - Corynebacterium diphtheriae (łac. soguna maczuga, błonica - błona, skóra) proste lub lekko zakrzywione pręciki o długości 1-8 mikronów i szerokości 0,8 mikrona, polimorficzne, lepiej wybarwione na biegunach, na których znajdują się metachromatyczne granulki wolutyny (granulki Babes) Ernst, polimetafosforany) W maczugowcach błonicy obserwuje się maczugowate zgrubienia na końcach zawierające ziarna wolutyny, czasami pojawiają się formy rozgałęzione i nitkowate, a także krótkie formacje, prawie kokosowe i drożdżopodobne. W pociągnięciach układają się w literę V (pod kątem), przybierając formę rozstawionych palców. Nie tworzą zarodników, kapsułek ani wici i są Gram-dodatnie.

Uprawa. Czynnikiem sprawczym błonicy jest tlenowy lub fakultatywny beztlenowiec, dobrze hodowany na podłożach zawierających białko (skrzep serwatkowy, agar z krwią, agar serwatkowy), a także na bulionie cukrowym. Na średnim Ru (zapadnięty serum końskie) i pożywki Lefflera (3 części serwatki wołowej + 1 część bulionu cukrowego), maczugowców błonicy rozwijają się w ciągu 16-18 godzin, ich wzrost przypomina skórę shagreen, kolonie nie łączą się ze sobą.

Według kultury i właściwości biologiczne Corynebacterium diphtheria dzieli się na trzy biowary gravis, mitis i intermedius, które różnią się od siebie wieloma cechami.

Corynebacterium biovar gravis na agarze tellurytowym zawierającym odwłóknioną krew i telluryn potasu tworzy duże, szorstkie (w kształcie litery R) kolonie w kształcie rozety, koloru czarnego lub szary. Fermentują dekstrynę, skrobię i glikogen, tworzą w bulionie warstwę powierzchniową i ziarnisty osad, są zwykle silnie toksyczne i mają bardziej wyraźne właściwości inwazyjne.

Corynebacterium biovar mitis rośnie na agarze tellurowym, tworząc ciemne, gładkie (w kształcie litery S) błyszczące kolonie. Nie fermentują skrobi i glikogenu, nierównomiernie fermentują dekstrynę, powodują hemolizę erytrocytów wszystkich gatunków zwierząt, a w bulionie obserwuje się rozproszone zmętnienie. Hodowle tego typu są na ogół mniej toksyczne i inwazyjne niż corynebacterium biovar gravis.

Corynebacterium biovar intermedius zajmuje pozycję pośrednią. Ich kolonie na agarze tellurytowym są małe (forma RS), czarne, nie fermentują skrobi i glikogenu, rosną na bulionie z pojawieniem się zmętnienia i ziarnistego osadu.

Właściwości enzymatyczne. Corynebacteria błonicze (wszystkie trzy biowary) nie koagulują mleka, nie rozkładają mocznika, nie wydzielają indolu, słabo tworzą siarkowodór, redukują azotany do azotynów, a także telluryn potasu do siarczku telluru, w wyniku czego kolonie błonicy maczugowców na agarze tellurytowym stają się czarne lub szare.

Bakterie błonicze fermentują glukozę i maltozę, a czasami galaktozę, skrobię, dekstrynę i glicerol.

Bakterie błonicze fermentują cysteinę, wytwarzając siarkowodór i nie rozkładając mocznika, natomiast bakterie błonicy rozkładają mocznik, ale nie fermentują cysteiny.

Corynebacteria błonicy wytwarzają bakteriocyny (korynecyny), które zapewniają im pewne selektywne korzyści.

Tworzenie się toksyn. Bakterie błonicze wytwarzają w hodowlach bulionowych silne egzotoksyny (histotoksynę, dermonekrotoksynę, hemolizynę). Toksyczność Corynebacterium diphtheria jest powiązana z lizogenicznością (obecność umiarkowanych profagów w szczepach toksynotwórczych). Klasyczny międzynarodowy szczep referencyjny Park-Williams 8, producent egzotoksyn, jest również lizogenny i zachował zdolność do wytwarzania toksyn przez ponad 85 lat. Genetyczne determinanty toksyczności (toks + geny) zlokalizowane są w genomie profaga zintegrowanego z nukleoidem Corynebacterium diphtheria.

W wyniku lizogenizacji nietoksyczne szczepy C. diphtheriae (mitis biovar) przekształcają się w toksyczne ( konwersja toksynotwórcza).

Toksyna błonicza jest termostabilnym polipeptydem składającym się z dwóch fragmentów zwanych A i B. Fragment B jest niezbędny do transportu fragmentu A do komórki, gdzie hamuje wydłużanie łańcucha polipeptydowego na rybosomie. Hamowanie syntezy białek prawdopodobnie zapewnia jedno i drugie efekt toksyczny toksyna błonicza jest nekrotyczna i neutrotoksyczna.

Toksyna błonicza jest niestabilna. Łatwo ulega zniszczeniu pod wpływem temperatury, światła i tlenu atmosferycznego, jest jednak stosunkowo odporny na działanie ultradźwięków.

Po dodaniu do toksyny 0,3-0,4% formaldehydu i następnie utrzymywaniu jej w temperaturze 38 - 40°C przez 3-4 tygodnie, zamienia się ona w toksoid błoniczy, który jest bardziej odporny na obciążenia fizyczne i wpływy chemiczne niż oryginalna toksyna.

Toksyczne szczepy maczugowców błonicy wraz z lizogennością charakteryzują się wyraźną aktywnością dehydrogenazy i neuraminidazy, natomiast szczepy nietoksyczne takiej aktywności nie wykazują.

Struktura antygenowa. Za pomocą reakcji aglutynacji zidentyfikowano 11 serotypów czynnika wywołującego błonicę.

Toksyny wytwarzane przez różne szczepy biowarów gravis i mitis nie różnią się od siebie i są całkowicie neutralizowane przez standardową antytoksynę błoniczą. Wielu autorów ustaliło obecność specyficznych dla wariantu termolabilnych antygenów białek powierzchniowych (antygeny K) i specyficznych dla grupy termostabilnych somatycznych antygenów polisacharydowych w Corynebacterium diphtheria.

Wśród Corynebacterium diphtheria wyróżnia się 19 fagotypów, za pomocą których identyfikuje się źródła infekcji; Fagotypy są również brane pod uwagę przy identyfikacji izolowanych kultur.

Opór. Corynebacteria błonicy są stosunkowo odporne na szkodliwe działanie czynników środowiskowych. Na skoagulowanej serwatce pozostają żywe do 1 roku, w temperaturze pokojowej do 2 miesięcy, a na zabawkach dla dzieci do kilku dni. Corynebacteria dość długo utrzymują się w błonach śluzowych pacjentów chorych na błonicę, zwłaszcza jeśli błony te nie są wystawione na działanie światła. Pod wpływem temperatury 60°C i 1% roztworu fenolu maczugi giną w ciągu 10 minut.

Patogeniczność dla zwierząt. W warunki naturalne U koni, krów i psów, prawdopodobnie zakażonych od pacjentów i nosicieli, wykryto zjadliwe maczugowców błonicy. Jednakże zwierzęta domowe nie odgrywają roli jako źródła infekcji u ludzi.

Wśród zwierząt laboratoryjnych najbardziej podatne są świnki morskie i króliki. Po zakażeniu kulturą lub toksyną rozwija się u nich typowy obraz toksycznej infekcji z powstawaniem stanu zapalnego, obrzęku i martwicy w miejscu wstrzyknięcia. Narządy wewnętrzne przekrwienie, krwotoki obserwuje się w nadnerczach. Dawka 0,06 mcg toksyny zabija świnkę morską o wadze 250 g.

Patogeneza choroby u ludzi.Źródłem zakażenia są pacjenci chorzy na błonicę i nosiciele. Choroba jest przenoszona przez unoszące się w powietrzu kropelki, czasem z cząsteczkami kurzu; zarażenie możliwe jest także poprzez różne przedmioty (zabawki, naczynia, książki, ręczniki, szaliki itp.), produkty spożywcze(mleko, różne zimne dania itp.) zakażone maczugowcami błonicy.

W epidemiologii błonicy duża rola grają przewoźnicy. Średnio liczba nosicieli wśród rekonwalescentów i osób zdrowych waha się od 3 do 5%.

Najwięcej zachorowań na błonicę obserwuje się jesienią, co tłumaczy się wzrostem skupienia dzieci o tej porze roku i spadkiem odporności organizmu pod wpływem wychłodzenia.

Corynebacteria błonicy, dzięki obecności czynnika dyfuzyjnego, mają zdolność przenikania do krwi i tkanek chorych ludzi i zakażonych zwierząt. Czynnikiem dyfuzyjnym jest enzym hialuronidaza, który ma zdolność rozkładania kwasu hialuronowego. Czynniki inwazyjności obejmują neuraminidazę, czynnik martwiczy, fibrynolizynę.

W patogenezie błonicy wiodącą rolę odgrywa histotoksyna, która blokuje syntezę białek w komórkach ssaków i inaktywuje enzym transferazę odpowiedzialną za tworzenie łańcucha polipeptydowego.

Doświadczenia kliniczne i na zwierzętach wykazały wpływ patogennych gronkowców i paciorkowców na rozwój choroby, co znacznie zwiększa ciężkość zakażenia.

U ludzi w miejscu wniknięcia patogenu błonicy (gardło, nos, tchawica, spojówka oczu, skóra, srom pochwy, powierzchnia rany) tworzą się filmy z dużą liczbą maczugowców błonicy i innych drobnoustrojów. Wytwarzana egzotoksyna powoduje martwicę i błonicze zapalenie błon śluzowych lub skóry. Po wchłonięciu wpływa na komórki nerwowe, mięsień sercowy i narządy miąższowe, powoduje zjawisko ogólnego ciężkiego zatrucia.

Głębokie zmiany zachodzą w mięśniu sercowym, naczyniach krwionośnych, nadnerczach, a także w ośrodkowym i obwodowym układzie nerwowym. Dlatego podkreślają trzy punkty aplikacyjne toksyna błonicza w organizmie: mięsień sercowy(rozwój toksycznego błoniczego zapalenia mięśnia sercowego), nadnercza(zmniejszenie napięcia naczyniowego i ciśnienie krwi ze względu na zmniejszoną produkcję adrenaliny) układ nerwowy(rozwój paraliżu i niedowładu).

Zgodnie z lokalizacją procesu, najczęściej obserwuje się błonicę gardła i zad błoniczy (błonica krtani), a następnie błonicę nosa. Błonica oczu, uszu, narządów płciowych, skóry i ran występuje stosunkowo rzadko. Błonica gardła stanowi ponad 90% wszystkich chorób, na drugim miejscu znajduje się błonica nosa.

Śmierć z powodu błonicy krtani może być spowodowana uduszeniem, uduszeniem, ponieważ nawet mały film błoniczy może całkowicie zablokować głośnię. W przypadku błonicy gardła większość zgonów wiąże się z uszkodzeniem serca w wyniku zatrucia.

Odporność. W przypadku błonicy odporność zależy głównie od poziomu antytoksyny we krwi. Nie można jednak wykluczyć pewnej roli kompleksu antybakteryjnego związanego z fagocytozą oraz obecnością opsonin, aglutynin, precypityn i substancji wiążących dopełniacz. Odporność na błonicę ma charakter przeciwzakaźny (antytoksyczny i przeciwbakteryjny).

Próbka szyku. Obecność odporności antytoksycznej przeciw błonicy można wykryć za pomocą reakcji Schicka. Dzieciom podaje się śródskórnie w przedramię 1/40 dlm toksyny świnki morskiej w objętości 0,2 ml. Przy pozytywnej reakcji, wskazującej na brak odporności antytoksycznej, po 24-48 godzinach w miejscu wstrzyknięcia pojawia się zaczerwienienie i obrzęk o średnicy do 2 cm. Dodatnia reakcja Schicka występuje w przypadku braku antytoksyny lub jej niewielkiej ilości w surowicy krwi. Ujemna reakcja Schicka jest w pewnym stopniu wskaźnikiem odporności na błonicę.

Ze względu na to, że egzotoksyna błonicza powoduje stan uczulenia i powoduje rozwój poważne powikłania, powszechnie stosowana wcześniej reakcja Schicka jest stosowana w ograniczonym zakresie.

Aby określić ilość antytoksyn we krwi, zaleca się pośrednią reakcję hemaglutynacji z czerwonymi krwinkami uczulonymi toksoidem błoniczym.

Najbardziej podatne na błonicę są dzieci w wieku od 1 do 4 lat. W ostatnich latach obserwuje się względny wzrost zachorowalności wśród osób w wieku 15 lat i starszych.

Przeniesienie błonicy pozostawia słabszą odporność niż w przypadku innych chorób dzieciństwo(odra, krztusiec). Powtarzające się choroby błonicę obserwuje się w 6 - 7% przypadków.

Leczenie. Leczenie błonicy obejmuje izolacja chory, surowy odpoczynek w łóżku, wcześniejsze spotkanie antytoksyna i odpowiadające antybiotykoterapia. W przypadku niedrożności dróg oddechowych może być konieczne leczenie wspomagające, takie jak intubacja i wentylacja.

Podawane są pacjentom chorym na błonicę serum antytoksyczne w dawkach 5000 - 15000 IU przy umiarkowane nasilenie chorób i 30 000–50 000 jm w przypadku ciężkich postaci.

C. diphtheriae jest wrażliwa na penicylinę, tetracyklinę, ryfampicynę i klindamycynę. W leczeniu błonicy gardła, zwłaszcza u nosicieli, preferuje się erytromycynę zamiast penicyliny. Opisano szczepy oporne na erytromycynę i tetracyklinę.

Antybiotykoterapia nie ma wpływu na wcześniej utworzoną (poprzednio utworzoną) toksynę, która szybko rozprzestrzenia się z miejsca uszkodzenia i jeśli nie zostanie zneutralizowana przez antytoksynę, szybko wiąże się nieodwracalnie z komórkami tkanek.

leczenia) nie należy czekać na potwierdzenie laboratoryjne, jeśli istnieje poważne podejrzenie kliniczne, ponieważ śmiertelność jest bezpośrednio związana z okresem opóźnienia przed podaniem antytoksyny i wzrasta od zera do 20% między początkiem choroby a 5 dniem zakażenia, przeciętny przypadek -śmiertelność wynosi 5-7%.

Stosuje się także penicylinę, tetracykliny, ryfampicynę, klindamycynę, leki sulfonamidowe i leki nasercowe.

W celu leczenia nosicieli przepisuje się antybiotyki. Dobry wynik daje zastosowanie tetracykliny, erytromycyny w połączeniu z witaminą C.

Zapobieganie. Składa się z wczesna diagnoza, natychmiastowa hospitalizacja, całkowita dezynfekcja pomieszczeń i przedmiotów, identyfikacja nosicieli.

Specyficzna profilaktyka przeprowadzone przez czynne szczepienie. Stosuje się kilka szczepionek specyficzna profilaktyka błonica: 1) zaadsorbowany toksoid błoniczy (toksoid AD); 2) adsorbowany toksoid błoniczo-tężcowy (toksoid ADS); 3) adsorbowana szczepionka przeciw krztuścowi, błonicy i tężcowi (szczepionka DTP). Wszystkie te leki stosuje się zgodnie z instrukcjami lub wytycznymi.

Należy zauważyć, że nie wszystkie zaszczepione dzieci nabywają oporność na błonicę. Średnio 5-10% z nich pozostaje podatnych lub opornych, tj. niezdolne do wytworzenia przeciwciał po immunizacji. Stan ten jest wynikiem tolerancji immunologicznej, agammaglobulinemii lub hipogammaglobulinemii.

Wcześniej błonica była straszną chorobą dzieci. W Rosji w latach 1886–1912. Co roku choruje ponad 250 000 osób. Śmiertelność była bardzo wysoka i wynosiła 12 -30%.

Dzięki wprowadzeniu obowiązkowych szczepień przeciw błonicy poczyniono ogromne postępy w walce z tą infekcją. Zapadalność na błonicę w 1975 r. w porównaniu do 1913 r. zmniejszyła się do pojedynczych przypadków, śmiertelność z powodu błonicy spadła ponad 100-krotnie.

Jednak obecnie błonica znów stała się rzeczywista infekcja dla krajów byłego ZSRR, w tym dla Ukrainy.

Rzadziej - w innych narządach i zjawiskach zatrucia (uszkodzenie układu sercowo-naczyniowego, układu korowo-nadnerczowego i nerwy obwodowe). Mechanizm przenoszenia to droga oddechowa. Źródłem zakażenia są pacjenci i nosiciele trujących szczepów C. diphtheriae.

Polimorficzne pręciki proste lub lekko zakrzywione (0,3-0,8 x 1,5-8 µm), czasem z końcami maczugowatymi (Corynebacterium z gr. koryne- buława). Ułożone w kształcie litery „V”. Gram-dodatnie. Na biegunach komórek widoczne są ziarna polimetafosforanu (ziarna wolutyny), które posiadają metachromazję, czyli są wybarwione błękitem metylenowym lub według Neissera na kolor inny niż bakteria (ryc. 3.87 i 3.88).

Ryż. 3,87. Pobranie rozmazu z czystej kultury Cbłonica. Barwienie Neissera

Z.wrzody- rodzaj małych, pałeczek Gram-dodatnich bakterii z rodzaju Corynebacterium. Czasami, ze względu na obecność profaga, wytwarza egzotoksynę przypominającą błonicę. Szczepy C. wrzody wytwarzają także fosfolipazę D. Przedstawiciele tego gatunku są spokrewnieni z C. diphtheriae. Są patogenami dla bydła. Człowiek może zarazić się mlekiem chorych krów. U osób z niedoborami odporności powodują choroby błonopodobne, zapalenie gardła i zmiany skórne.

Ryż. 3,88. Rozmaz z czystej kultury S.błonica. Zabarwienie zasadowe na niebiesko Loefflera

Posiadają mikrokapsułkę. Bez ruchu. Fakultatywne beztlenowce. Istnieją 4 biowary: gravis, mitis, intermedius, belfanti.

Ryż. 3,89. Kolonie S.błonicagravis(po lewej) - duża matowa, wypukła w środku z promienistymi smugami i nierównymi krawędziami („stokrotki”) orazmitis(po prawej) - mała, czarna, gładka, błyszcząca o gładkich krawędziach

Prątki błonicy mogą być toksyczne (wytwarzające egzotoksynę) i nietoksyczne. Tworzenie egzotoksyny zależy od obecności w bakteriach profaga niosącego gen toksyny kodujący powstawanie toksyny. W przypadku choroby wszystkie izolaty są badane pod kątem toksyczności - wytwarzania egzotoksyny błoniczej (patrz reakcja strącania).

Diagnostyka mikrobiologiczna. Zbadaj śluz i film ze zmian chorobowych. Przybliżona wartość ma metoda bakterioskopowa: rozmaz barwi się alkalicznym błękitem metylenowym Lefflera lub błękitem toluidynowym octowym, a drugi rozmaz barwi się metodą Grama. Ziarna Volutin są barwione metachromatycznie błękitem metylenowym kolor ciemny bordowy(komórka jest poplamiona niebieski). Metoda bakteriologiczna: inokulacja na podłożu Clauberg I, podłożu chinozolowym Buchina, modyfikowanym podłożu Tinsdal (pożywka cystyna-telluryn-surowica), agarze z krwią, na gęstej pożywce surowicy w celu wykrycia produkcji cystynazy (test Pizou - brązowa aureola wokół zaszczepienia z „zastrzykiem ”), na podłożu Hissa, na podłożu do określenia toksyczności patogenu (strącanie w żelu) itp. Molekularna metoda genetyczna: PCR.

Specyficzna profilaktyka. Toksoid błoniczy, będący częścią leki DTP(adsorbowana szczepionka przeciwko krztuścowi, błonicy i tężcowi), ADS i AD. Lek podaje się niemowlętom już od trzeciego miesiąca życia. Ponowne szczepienie przeprowadza się za pomocą ADS. Osobom, które były wcześniej zaszczepione, ale nie mają wystarczająco silnej odporności antytoksycznej, w kontakcie z chorymi wstrzykuje się toksoid błoniczy. Nieszczepiona wcześniej - toksoid błoniczy + surowica antytoksyczna. Ten ostatni, podobnie jak w leczeniu, podaje się frakcyjnie według Bezredki (profilaktyka wstrząs anafilaktyczny).

Corynebacterium diphtheriae odkryto, a następnie wyizolowano w czystej kulturze 100 lat temu. Jej ostateczne znaczenie etiologiczne w występowaniu błonicy potwierdzono kilka lat później, gdy uzyskano specyficzną toksynę, która powodowała śmierć zwierząt ze zjawiskami podobnymi do obserwowanych u pacjentów chorych na błonicę. Corynebacterium diphtheriae należy do rodzaju Corynebacterium, grupy bakterii maczugowców. Corynebacterium diphtheriae to proste lub lekko zakrzywione pałeczki z rozszerzonymi lub spiczastymi końcami. Podział na pękanie i rozszczepianie zapewnia charakterystyczny układ w postaci rzymskiej cyfry V lub rozstawionych palców, choć często w pociągnięciach spotykane są pojedyncze patyki. Ich duże skupiska, występujące w wymazach sporządzonych ze śluzu gardła, nosa i wydzieliny z ran, mają charakter filcowy. Średnia długość ich pręcików wynosi 1-8 mikronów, szerokość - 0,3/0,8 mikrona. Są nieruchome i nie tworzą zarodników ani torebek. Corynebacterium diphtheriae jest fakultatywnym beztlenowcem. Prątki błonicy są odporne na wysychanie. W temperaturze 60°C w czystych kulturach ulegają zniszczeniu w ciągu 45-60 minut. W produktach patologicznych, tj. w obecności ochrony białkowej, mogą zachować żywotność przez godzinę w temperaturze 90 ° C. Niskie temperatury nie mają szkodliwego wpływu na prątki błonicy. W środkach dezynfekcyjnych o normalnym stężeniu szybko giną.

Należy zwrócić uwagę na niezwykle duży polimorfizm prątków błonicy, objawiający się zmianami w ich grubości i kształcie (obrzęk, kolbowaty, segmentowany, nitkowaty, rozgałęziony w końcowych zgrubieniach, a czasami w części środkowej, po 12 godzinach). wzrostu kultury, ziarna Babesh wykazują specjalne zabarwienie Ernst, które są nagromadzeniami wolutyny. Istnieją dowody na to, że wolutyna jest długołańcuchowym nieorganicznym polifosforanem. M.A. Peszkow sugeruje ich metafosforanowy charakter. A. A. Imshanetsky uważa, że ​​wolutin jest produktem ubocznym procesy metaboliczne. Wiadomo, że fosfor jest niezbędny do tworzenia ziaren. Istnieją również założenia dotyczące zapotrzebowania na mangan i cynk w tym procesie.

Ziarna Volutin znajdują się w jednodniowych kulturach, a następnie zmniejsza się liczba bakterii w obecności ziaren. Cytoplazma zawiera również nukleotydy, błony wewnątrzcytoplazmatyczne - lizosomy, wakuole.

Bakterie barwi się wszystkimi barwnikami anilinowymi. Po barwieniu metodą Grama dają wynik dodatni. Do barwienia ziaren wolutyny stosuje się metodę Neissera. Po barwieniu tą metodą ziarna wolutyny, które mają duże powinowactwo do błękitu metylenowego, są trwale zabarwione na niebiesko, a z ciała bakterii, po dodatkowym wybarwieniu chrysoidyną lub bismarckbraunem, błękit metylenowy zostaje wyparty.

Czynnikiem sprawczym błonicy jest heterotrof, tj. należy do grupy bakterii wymagających do swojego wzrostu materia organiczna. Podłoża stosowane do hodowli muszą zawierać aminokwasy jako źródło węgla i azotu – alaninę, cystynę, metioninę, walinę itp. W tym zakresie wybieranymi podłożami do hodowli są podłoża zawierające białko zwierzęce: krew, surowica, płyn puchlinowy. Na tej podstawie stworzono klasyczne środowisko Lefflera, a następnie środowiska Clauberga, Tyndalla i akumulacyjne.

Na podłożu Lefflera kolonie Bacillus błonicy mają błyszczącą, wilgotną powierzchnię, gładkie krawędzie i żółtawy kolor. Po kilku dniach wzrostu pojawiają się promieniste prążki kolonii i słabo zaznaczone koncentryczne linie. Średnica kolonii sięga 4 mm. Pierwsze oznaki wzrostu pojawiają się po 6 godzinach w termostacie w temperaturze 36-38°C. Wzrost jest wyraźnie widoczny po 18 godzinach od wysiewu. Optymalna wartość pH dla wzrostu prątka błonicy wynosi 7,6. Corynebacterium diphtheria jest często trudna do odróżnienia od innych gatunków Corynebacterium. Aby określić gatunek, stosuje się zespół cech kulturowych i biochemicznych.

Rodzaj Corynebacterium diphtheria jest również niejednorodny; dzieli się na 3 typy kulturowe i biochemiczne gravis, mitis, intermedins, na dwie odmiany - toksyczne i nietoksyczne, szereg typów serologicznych i fagotypów.

Obecnie na większości terytoriów krążą dwa typy kulturowo-biochemiczne - gravis i mitis. Rodzaj intermedyn, który kiedyś był dość powszechnie wyróżniany, ostatnio jest rzadkie. Najbardziej wyraźne rozróżnienie typów można dokonać na podstawie kształtu kolonii, gdy hodowlę hoduje się na agarze z krwią z dodatkiem tellurytu. Kolonie typu gravis osiągają średnicę 1-2 mm po 48-72 godzinach, mają faliste krawędzie, promieniste prążki i płaski środek. Ich wygląd często porównywany jest do kwiatu stokrotki. Kolonie są matowe ze względu na zdolność bakterii do redukcji tellurynu, który następnie łączy się z powstałym siarkowodorem o szaro-czarnym kolorze. Podczas uprawy w bulionie kultury typu gravis tworzą na powierzchni kruchy film. Wysiane na podłożu Hiss z dodatkiem serwatki rozkładają polisacharydy – skrobię, dekstrynę, glikogen z utworzeniem kwasu.

Kultury typu mitis na agarze z krwią tellurynową rosną w postaci okrągłych, lekko wypukłych, matowo-czarnych kolonii o gładkich krawędziach. Uprawiane w bulionie powodują równomierne zmętnienie i osad. Nie rozkładają skrobi, dekstryny i glikogenu.

W rozmazach pręciki typu gravis są często krótkie, a typu mitis cieńsze i dłuższe.

Porównawcze badanie mikroskopem elektronowym prątków błonicy różnych typów biochemicznych wykazało obecność trójwarstwowej struktury w typach gravis i mitis. błona komórkowa. Skorupa typu intermedins jest dwuwarstwowa i prawie 3 razy grubsza. Pomiędzy cytoplazmą a błoną znajdują się przestrzenie wypełnione ziarnami, które mogą być związane z egzotoksyną. Widoczne są ukośne prążki bakterii, które tworzą ścianki działowe pomiędzy komórkami potomnymi. Aparat chromosomalny typu gravis i mitis jest reprezentowany przez zwykłe ziarna z wakuolami; w typie intermedin jest rozmieszczony w całej cytoplazmie. W mikroskop elektronowy widoczna jest wielowarstwowa błona, której obecność wyjaśnia, dlaczego pałeczki błonicy są czasami Gram-ujemne.

Kolonie bakterii błonicy występują w postaciach S, R i SR, przy czym tę drugą uważa się za pośrednią. N. Morton uważa, że ​​kolonie form S są charakterystyczne dla typu mitis, a formy SR – dla typu gravis. Oprócz tych głównych form istnieją kolonie śluzowe - formy M, kolonie karłowate - formy D i kolonie gonidialne - formy L. Wszystkie z nich są uważane za formy zmienności dysocjacyjnej.

Bakterie błonicze należy odróżnić od dyfteroidów i pałeczek pseudodiphtheria.

Duża liczba badań poświęcona jest zmienności prątka błonicy. Możliwość wystąpienia postaci nietypowych w warunkach laboratoryjnych została potwierdzona badaniami epidemiologicznymi.

Uznana przez dużą liczbę badaczy zmienność biochemiczna, morfologiczna, fizykochemiczna bakterii błonicy, w niektórych przypadkach komplikuje diagnostykę bakteriologiczną i wymusza kompleksowe badania posiewów.

Wszystkie kultury wyizolowane w różnych warunkach epidemiologicznych podzieliliśmy na 8 grup; objęły wszystkie możliwe warianty morfologiczne interesujących nas przedstawicieli corynebacterium:

1. grupa - krótkie kije, o długości około 2 µm, bez ziaren;

2. grupa - krótkie pręty o długości około 2 mikronów, ale czasami z ziarnami;

Trzecia grupa - kije średni rozmiar, długość 3-6 mikronów, szerokość 0,3-0,8 mikrona, bez charakterystycznej ziarnistości;

4. grupa - pręciki średniej wielkości, o długości 3-7 mikronów i szerokości 0,3-0,8 mikrona, lekko zakrzywione, czasami z ziarnami;

5. grupa - pręty średniej wielkości, o długości 3-6 mikronów i szerokości 0,3-0,8 mikrona, lekko zakrzywione, ziarniste;

6 grupa - długie pręciki o długości 6-8 mikronów i szerokości 0,3-0,6 mikrona, lekko zakrzywione, czasami z ziarnami;

grupa siódma - pręty długie o długości 6-8 mikronów i szerokości 0,3-0,8 mikrona, zwykle zakrzywione, bez ziaren;

Grupa 8 - krótkie, szorstkie pręciki, o długości około 2 mikronów i szerokości około 1 mikrona, bez ziaren.

Przy przypisywaniu ich do grup nie brano pod uwagę lokalizacji pręcików, zazwyczaj jednak charakterystyczne ułożenie odpowiadało morfologii.

W grupach 1., 2., 3. i 8., które odpowiadały morfologicznie pałkom Hoffmanna, układ był grupowy, równoległy lub w postaci pojedynczych osobników, w grupach 4., 5. i 6., które odpowiadały morfologicznie głównie błonicy prawdziwej bakterie, pręciki umieszczone pod kątem lub w postaci pojedynczych osobników. W grupie 7 pręty częściej ułożone były losowo, przeplatając się ze sobą. W grupie 8 pręciki występowały w postaci pojedynczych osobników.

Spośród 428 zbadanych kultur 111 na podstawie ogółu ich cech należało uznać za prawdziwą błonicę, 209 to kultury prątków Hoffmanna, a 108 stanowiło grupę kultur nietypowych. W kulturach bliskich błonicy nietypowość objawiała się spadkiem aktywności biochemicznej, czasem rozkładem mocznika; w kulturach zbliżonych morfologicznie do pałeczek Hoffmanna zachowują dodatni wynik testu cysteinowego oraz zdolność do rozkładu jednego z cukrów.

Spośród 111 hodowli błonicy 81 (73%) miało morfologię typową, a 28 (27%) miało morfologię pałeczek Hoffmanna. Spośród 111 kultur błoniczych było 20 kultur typu gravis, z czego tylko 9 zaliczono do 1. i 2. grupy morfologicznej.

Kultury sklasyfikowane na podstawie kombinacji cech jako kultury Bacillus Hoffmanna w 20% przypadków miały morfologię typowych kultur błoniczych.
25% badanych szczepów zaliczono do hodowli atypowych, ich morfologia odpowiadała zarówno pałkom błonicy, jak i pałkom Hoffmanna.

Zatem biochemiczne i właściwości morfologiczne kultury nie zawsze się pokrywają, a nietypowość biochemiczną i morfologiczną częściej obserwuje się w kulturach izolowanych w okresie zmniejszonej zapadalności, a co za tym idzie spadku poziomu nosicielstwa.

Należy zwrócić uwagę na ogólny spadek aktywności biochemicznej roślin uprawnych w ciągu ostatnich 10-15 lat. Wskaźnikiem tego jest opóźniona fermentacja cukrów, występująca czasami w 5-6 dniu, a także różna aktywność biochemiczna rodzin tej samej kultury.

Biochemiczna identyfikacja czystych kultur izolowanych w różnych warunkach epidemiologicznych pokazuje, że choć morfologia i właściwości biochemiczne często nie są zbieżne, to ogólna zasada rozmieszczenia kultur, ustalona na podstawie danych morfologicznych, nie ulega zmianie. Zarówno przy rozmieszczeniu kultur na podstawie danych morfologicznych i biochemicznych, jak i przy ich pełnej identyfikacji z uwzględnieniem reakcji serologicznych, zasada rozdziału pozostaje ta sama: kultury atypowe występują częściej w okresie rozwoju epidemicznego, prątki Hoffmanna częściej wykrywane są w okresie okres kłopotów epidemicznych i wysiewa się je dłużej niż prawdziwą błonicę.

Badanie właściwości toksykogennych wyizolowanych kultur na pożywkach stałych wykazało, że nawet w okresie dobrej koniunktury epidemicznej występuje wystarczająca liczba nosicieli toksycznych prątków błonicy. Należy zauważyć, że właściwości toksyczne nie zawsze mogą zostać wykryte nawet w kulturach wyizolowanych od pacjentów. Wskazuje to na potrzebę udoskonalenia stosowanych metod określania toksyczności roślin uprawnych.

Wyniki reakcji aglutynacji atypowych kultur wyizolowanych w różnych warunkach epidemiologicznych wykazały obecność tych samych wzorców właściwości serologicznych, które zaobserwowaliśmy badając morfologię i biochemię kultur. Jak wynika z danych serologicznych, nietypowość kultur wyizolowanych na obszarze zamożnym była większa niż na obszarach upośledzonych. Tak więc na obszarze zamożnym 26% kultur nietypowych dało pozytywną reakcję aglutynacji, na obszarach niesprzyjających - 19%.

Jedną z głównych właściwości prątka błonicy jest zdolność do tworzenia toksyn. Toksynogeneza Corynebacterium diphtheria jest determinowana przez gen zawarty w profagu, dlatego główny sposób agresji - tworzenie toksyn - nie jest związany z chromosomem bakteryjnym.

Toksyna błonicza jest białkiem o masie cząsteczkowej 6200 daltonów. Siłę toksyny określa się przeprowadzając śródskórne testy na obecność działania martwiczego i wpływ na podatne zwierzęta (skutek śmiertelny). Siłę toksyny mierzy się za pomocą minimum dawka śmiertelna, czyli najmniejsza ilość toksyny, która może spowodować śmierć świnki morskiej o masie 250 g w 4-5 dniu po podaniu dootrzewnowym. Toksyna ma właściwości antygenowe, które zostają zachowane po potraktowaniu formaldehydem, który usuwa jej toksyczne właściwości. Umożliwiło to wykorzystanie go do przygotowania leku profilaktycznego.

Cząsteczka toksyny składa się z dwóch fragmentów, z których jeden jest termostabilny i ma aktywność enzymatyczna, a drugi jest termolabilny i pełni funkcję ochronną. Udowodniono wewnątrzkomórkową syntezę toksyny wraz z jej uwalnianiem przez kanaliki ściany komórkowej. Synteza toksyny następuje podczas wzrostu drobnoustroju płynny środek- bulion mięsno-peptonowy z dodatkiem glukozy, maltozy i czynników wzrostu o pH 7,8-8,0.

Według najnowszych danych toksyna błonicza jest produktem pochodzenia wirusowego. Jako potwierdzenie I. V. Chistyakova podaje zdolność nietoksycznych maczugowców do przekształcania się w toksyczne pod wpływem faga. Możliwość konwersji kultur nietoksycznych w toksogenne potwierdzono w doświadczeniach na hodowlach jednokomórkowych. Opisane zjawisko nazywa się konwersją lizogeniczną. Stosując umiarkowane wirusy uzyskane z toksygennych szczepów gravis, możliwe było przekształcenie nietoksycznego wariantu Corynebacterium diphtheria gravis w toksygenny.

M.D. E.V. Bakulina Krylova zasugerowała, że ​​w procesie epidemicznym ważna może być konwersja ogniskowa. W związku z tym rozpoczęto badania nad jego rolą w tworzeniu się w przyrodzie toksycznych szczepów Corynebacterium diphtheria. Możliwość konwersji toksyczności wykazano nie tylko w układach fag-bakterie, ale także w warunki naturalne. Jednak zdaniem wielu badaczy w kulturach lokalnych proces ten nie jest powszechny. Przyczyną tego jest prawdopodobnie brak producentów fagów umiarkowanych, wrażliwość fagowa szczepów lokalnych jest odmienna od szczepów referencyjnych, w związku z czym nie mogą one być biorcami fagów konwertujących o znanym spektrum działania.

Tylko u części populacji drobnoustrojów udało się przekształcić toksyczne właściwości prątków błonicy pod wpływem fagów gronkowcowych i paciorkowcowych. W pracach ostatnie lata Jeszcze bardziej powściągliwa jest kwestia konwersji fagów w procesie epidemicznym. Uważa się, że maczugi tox+ nie odgrywają niezależnej roli w procesie epidemicznym błonicy. Nosiciele pałeczek nietoksycznych mogą zostać zakażone fagiem tox+ tylko w połączeniu ze szczepem toksynotwórczym, natomiast fagi gronkowcowe nie są w stanie przekształcić nietoksycznych maczugowców. Aby przeprowadzić konwersję w kierunku toksyczności w organizmie człowieka, najwyraźniej konieczny jest bliski kontakt pomiędzy nośnikiem zawierającym faga konwertującego i nośnikiem wydzielającym szczep lizowrażliwy na tego faga. Oprócz zdolności do tworzenia toksyn bakteria błonicy ma takie czynniki patogeniczności, jak hialuronidaza, neuraminidaza, deoksyrybonukleaza, katalaza, esteraza i peroksydaza. Badanie zewnątrzkomórkowych produktów przemiany materii nie wykazało różnic pomiędzy toksyczną i nietoksyczną maczugowcą błonicy.

Obecnie do wewnątrzgatunkowego typowania Corynebacterium diphtheria, oprócz opisanej powyżej metody biochemicznej, można zastosować metody serologiczne i fagowe.

Obecność typów serologicznych wynika z antygenów specyficznych dla danego typu, termostabilnych, powierzchniowych i termolabilnych.

Istnieje wiele schematów typowania serologicznego. W naszym kraju stosujemy schemat zaproponowany przez V. S. Suslovą i M. V. Pelevinę, ale nie jest on w stanie zapewnić klasyfikacji wszystkich szczepów nietoksycznych. Rośnie liczba typów serologicznych. I. Ewing ustalił obecność 4 typów serologicznych – A, B, C i D; D. Robinson i A. Peeney 5 typów - I, II, III, IV i V. L. P. Delyagina zidentyfikowali jeszcze 2 typy serologiczne. Uważa się, że liczba typów serologicznych jest znacznie większa, głównie ze względu na typ mitis. Z nielicznych dostępnych danych literaturowych na temat schematów izolacji tego czy innego serotypu, kiedy różne formy nie ustalono procesu zakaźnego i odmiennych warunków epidemiologicznych. Obok danych o różnej agresywności roślin należących do różnych typów serologicznych pojawiają się doniesienia odrzucające powiązanie typu serologicznego z patogenicznością roślin.

Charakterystyczne jest, że na różne terytoria Istnieją różne typy serologiczne. Typowanie serologiczne można wykorzystać do analizy epidemiologicznej.

W warunkach sporadycznej zachorowalności, ograniczonej liczby nosicieli, gdy poszukiwanie źródła zakażenia jest znacznie trudniejsze, istotna staje się metoda fagotypowania, umożliwiająca podział maczugowców na warianty serologiczne i kulturowe. Oznakowanie można przeprowadzić na podstawie właściwości fagów wyizolowanych z hodowli i wrażliwości hodowli na określone bakteriofagi. Najszerzej stosowanym schematem jest ten zaproponowany przez R. Sarageę i A. Maximesco. Pozwala na oznaczenie szczepów toksycznych i nietoksycznych wszystkich wariantów kulturowych. Za pomocą 22 typowych fagów hodowle można podzielić na 3 grupy, w których łączy się 21 wariantów fagów: 1. grupa - szczepy toksogenne i nietoksygenne typu mitis (warianty fagów I, la, II, III); 2. - toksyczne i nietoksyczne szczepy typu intermedins oraz nietoksygenne gravis (warianty fagów IV, V, VI, VII); Do grupy III, skupiającej szczepy toksyczne gravis, włączono 13 wariantów fagów (od VIII do XIX).

Schemat przetestowano na dużej liczbie szczepów wyizolowanych w Rumunii i uzyskanych z muzeów w 14 krajach. Typowanie fagowe dało wynik pozytywny w przypadku 62% szczepów; szczególnie skutecznie znakowano szczepy typu gravis. Wśród tych ostatnich w 93% stwierdzono przynależność do jednego z wariantów faga. Specyficzne reakcje z typowymi fagami w szczepach toksynotwórczych typu gravis według schematu tych autorów opierają się na zakażeniu szczepów różnymi wirusami.

W naszym kraju badania z zakresu typowania fagowego prowadziła M. D. Krylova. Autor opracował schemat znakowania fagów w oparciu o zaproponowaną przez Williamsa i Rippona zasadę typowania gronkowców plazmokoagujących: wariant faga oznaczono nazwą typu faga, który go lizował w testowym rozcieńczeniu. Fagi i warianty fagów na schemacie M.D. Krylovej są oznaczone literami alfabetu łacińskiego: duże litery - fagi dające lizę konfluentną i półpłynną, małe litery - lizę w postaci łysinek. Na tej podstawie opracowano zmodyfikowany schemat typowania fagowego dla nietoksycznych maczugowców wariantu gravis oraz schemat typowania fagowego dla toksycznego maczugowca wariantu gravis.

Jedną z niebezpiecznych chorób zakaźnych, która w ostatnim czasie zyskuje na popularności, jest błonica. Jest niebezpieczna nie tyle ze względu na procesy zapalne górnych dróg oddechowych, skóry, oczu i narządów płciowych, ile raczej z powodu zatrucia organizmu toksynami patogenu – maczugowców błonicy. Uszkodzenie głównych układów organizmu (nerwowego i sercowo-naczyniowego) może być dość niebezpieczne, a także prowadzić do tragicznych konsekwencji. Przeczytaj artykuł na temat morfologii i mikrobiologii Corynebacterium diphtheria, ich patogeniczności i toksyczności, dróg zakażenia, objawów i leczenia choroby.

Błonica wczoraj i dziś

Choroba ta znana jest ludzkości od czasów starożytnych. Opisał ją w swoich pismach Hipokrates (460 p.n.e.); w XVII w. epidemie błonicy wyniszczyły mieszkańców miast europejskich, a od XVIII w. mieszkańców Ameryki Północnej i Południowej. Nazwę choroby (od greckiego Diphthera, co oznacza „film”) wprowadził do medycyny francuski pediatra Armand Trousseau. Czynnik wywołujący tę chorobę, bakteria Corynebacterium diphtheriae, został po raz pierwszy odkryty w 1883 r. niemiecki lekarz Edwina Klebsa. Ale jego rodak, mikrobiolog Friedrich Leffler, wyizolował bakterię w czystą kulturę. Ten ostatni był odpowiedzialny za odkrycie toksyny wydzielanej przez Corynebacterium diphtheria. Pierwsza szczepionka pojawiła się w 1913 roku, a jej wynalazcą był Emil Adolf von Behring, niemiecki mikrobiolog i lekarz, laureat Nagroda Nobla w fizjologii.

Od 1974 r. zapadalność i śmiertelność na błonicę znacznie spadła we wszystkich krajach będących członkami Światowej Organizacji Zdrowia w wyniku programów masowych szczepień. A jeśli wcześniej na świecie chorowało co roku ponad milion osób, a umierało aż 60 tysięcy, to po wdrożeniu programów szczepień odnotowuje się jedynie pojedyncze przypadki ognisk błonicy. A im większy odsetek obywateli, którzy przeszli szczepienia profilaktyczne, tym mniejsze prawdopodobieństwo wystąpienia epidemii. Tym samym spadek zaszczepienia ludności WNP w latach 90. XX w. doprowadził do wybuchu choroby, kiedy zarejestrowano około 160 tys. przypadków.

Obecnie, według władz odpowiedzialnych za służbę zdrowia, około 50% populacji zostało zaszczepionych przeciwko błonicy, a biorąc pod uwagę, że harmonogram szczepień przewiduje ponowne szczepienia co 10 lat, w mediach coraz częściej można usłyszeć o możliwym wybuchu epidemiologicznej błonicy w Rosji i kraje byłej WNP.

To już nie choroba wieku dziecięcego

Błonica jest ostrą chorobą zakaźną, występującą głównie u dzieci. Charakteryzuje się włóknikowym zapaleniem miejsca lokalizacji prątka błonicy i ciężkie zatrucie organizm z toksynami. Jednak w ciągu ostatnich 50 lat choroba ta „dojrzała” i coraz częściej dotyka osoby znacznie starsze niż 14 lat. U dorosłych pacjentów występuje błonica poważna choroba z możliwym skutkiem śmiertelnym.

Najbardziej podatną grupą ryzyka są dzieci w wieku od 3 do 7 lat. Źródłami infekcji mogą być chorzy i zdrowi nosiciele patogenu. Najbardziej zaraźliwi są pacjenci z błonicą górnych dróg oddechowych, ponieważ główną drogą zakażenia są kropelki unoszące się w powietrzu. Pacjenci z błonicą oczu i skóry mogą przenosić infekcję poprzez kontakt. Ponadto źródłem zakażenia mogą być osoby, które nie mają przejawy zewnętrzne choroby, ale są nosicielami Corynebacterium diphtheria - okres wylęgania choroba trwa do 10 dni. Dlatego objawy nie pojawiają się natychmiast.

Błonica jest chorobą niebezpieczną dla osoby nieszczepionej. W przypadku braku natychmiastowego podania surowicy przeciwbłoniczej prawdopodobieństwo fatalny wynik wynosi 50%. Nawet przy terminowym podaniu istnieje 20% ryzyko śmierci, której przyczyną jest uduszenie, wstrząs zakaźno-toksyczny, zapalenie mięśnia sercowego i paraliż oddechowy.

Rodzaj Corynebacterium

Czynnik wywołujący błonicę, Corynebacterium diphtheriae (diphtheria Bacillus lub Bacillus Lefflera) należy do rodzaju bakterii Gram-dodatnich, który ma ponad 20 gatunków. Wśród bakterii tego rodzaju znajdują się patogeny zarówno ludzi, jak i zwierząt i roślin. W medycynie praktycznej oprócz Bacillus błonicy ważni są także inni przedstawiciele tego rodzaju:

• Corynebacterium wrzodowe - powoduje zapalenie gardła, zakaźne zmiany skórne i często występuje w produktach mlecznych.
• Corynebacterium jeikeium - powoduje zapalenie płuc, zapalenie wsierdzia i zapalenie otrzewnej, infekuje skórę.
• Corynebacterium cistitidis – może być inicjatorem powstawania kamieni w drogach moczowych.
• Corynebacterium minutissimum - wywołuje ropień płuc, zapalenie wsierdzia.
• Corynebacterium xerosis i Corynebacterium pseudodiphtheriticum były wcześniej uważane za czynniki wywołujące zapalenie spojówek i zapalenie nosogardzieli, a dziś są uznawane za saprofity żyjące na błonach śluzowych w ramach innej mikroflory.

Morfologia maczugowców błonicy jest podobna do morfologii wszystkich przedstawicieli tego rodzaju. Bacillus błonicy ma torebkę i zwężenia (pili). Corynebacterium diphtheria w rozmazie ma kształt pręcików i jest ułożona względem siebie pod kątem, przypominającym rzymskie piątki. Wśród różnorodnych przedstawicieli tego typu bakterii występują zarówno formy toksykogenne (wytwarzające egzotoksyny o działaniu patogennym), jak i bakterie, które nie wydzielają toksyn. Istnieją jednak dowody na to, że nawet nietoksyczne szczepy prątków Loefflera zawierają w swoim genomie geny odpowiedzialne za produkcję toksyn. Oznacza to, że w odpowiednich warunkach geny te mogą się włączyć.

Zjadliwość i trwałość

Czynnik sprawczy błonicy jest dość stabilny w środowisku zewnętrznym. Corynebacterium zachowuje swoją zjadliwość na powierzchniach przedmiotów gospodarstwa domowego do 20 dni w temperaturze pokojowej. Mikroorganizmy dobrze tolerują suszenie i niskie temperatury. Bakterie umierają:

• Po obróbce cieplnej w temperaturze 58 °C przez 5-7 minut, a podczas gotowania - przez 1 minutę.
• Na ubraniach i pościeli - po 15 dniach.
• W kurzu umrą za 3-5 tygodni.
• Pod wpływem środków dezynfekcyjnych - chloraminy, sublimatu, kwasu karbolowego, alkoholu - w ciągu 8-10 minut.

Mechanizm rozwoju choroby

Przez bramy wejściowe (błony śluzowe migdałków, nosa, gardła, narządów płciowych, zmian skórnych, spojówki) maczugowców błonicy dostają się do organizmu, gdzie namnażają się i wytwarzają egzotoksyny. W obecności wysokiej odporności antytoksycznej toksyna zostaje zneutralizowana. Niemniej jednak w przyszłości istnieją dwie możliwe opcje rozwoju czynnika sprawczego błonicy:

• Corynebacteria umierają, a osoba pozostaje zdrowa.
• Przy niewystarczającym statusie odporności i wysokiej zjadliwości, prątki błonicy rozmnażają się w miejscu inwazji i powodują zdrowe przenoszenie bakterii.

W przypadku braku toksyny Corynebacterium diphtheria prowadzi do rozwoju klinicznych i morfologicznych objawów zakażenia. Toksyna wnika do tkanek, limfatycznych i układ krążenia, powoduje niedowład naczyń krwionośnych i zwiększoną przepuszczalność ich ścian. W przestrzeni międzykomórkowej powstaje wysięk fibrynogenny i rozwijają się procesy martwicze. W wyniku przemiany fibrynogenu w fibrynę na powierzchni dotkniętych błon śluzowych pojawiają się warstwy włóknistej płytki nazębnej - charakterystyczny objaw błonicy. Wraz z krwią toksyna przedostaje się do układu krążenia i układu nerwowego, nadnerczy i nerek oraz innych narządów. Tam dochodzi do zaburzenia metabolizmu białek, śmierci komórek i zastąpienia ich komórkami tkanki łącznej.

Toksyny patogenów

Corynebacterium diphtheria charakteryzuje się wysoką patogenicznością ze względu na zdolność wydzielania egzotoksyn, w skład których wchodzi kilka frakcji:

• Neurotoksyna, która powoduje martwicę komórek nabłonka błony śluzowej, rozszerza naczynia krwionośne i zwiększa ich przepuszczalność. W rezultacie płynny składnik krwi przedostaje się do przestrzeni międzykomórkowej, co prowadzi do obrzęku. Ponadto fibrynogen krwi reaguje z komórkami martwiczymi i tworzy błony włókniste.
• Druga frakcja toksyny składa się z substancji o strukturze podobnej do cytochromu C, białka wszystkich komórek organizmu, które zapewnia oddychanie. Toksyna Corynebacterium zastępuje normalny cytochrom komórki i prowadzi do jego głód tlenu i śmierć.
• Hialuronidaza - zwiększa obrzęk i przepuszczalność ścian naczyń.
• Element hemolizujący - prowadzi do zniszczenia czerwonych krwinek.

Te właściwości Corynebacterium diphtheria, których zadaniem jest rozprzestrzenianie patogennego działania poprzez toksyny po organizmie, są przyczyną powikłań tej infekcji.

Klasyfikacja choroby

Błonica jest chorobą o wielu postaciach i objawach. W zależności od lokalizacji inwazji wyróżnia się zlokalizowane i rozpowszechnione formy choroby.

Ze względu na formę i wariant przepływu wyróżnia się:

• Błonica jamy ustnej i gardła - zlokalizowana (z nieżytem, ​​zapaleniem wyspowym lub błonowym), rozległa (blaszki znajdują się poza nosogardłem), toksyczna (stopień 1, 2 i 3), hipertoksyczna. Występuje w 90-95% wszystkich przypadków choroby.
• Zad błoniczy - zlokalizowany (krtań), powszechny (krtań i tchawica), zstępujący (zakażenie rozprzestrzenia się na oskrzela).
• Błonica nosa, oczu, skóry i narządów płciowych.
• Połączona postać choroby, w której wpływa jednocześnie kilka narządów.

W zależności od stopnia zatrucia organizmu choroba może przybierać następujące formy: błonica nietoksyczna (wywoływana przez nietoksyczne szczepy maczugowców błonicy), błonica subtoksyczna, toksyczna, krwotoczna i hipertoksyczna.

Klinika i objawy

W przypadku kontaktu z pacjentami lub nosicielami toksycznego szczepu prawdopodobieństwo zakażenia wynosi około 20%. Pierwsze objawy w postaci wzrostu temperatury do 38-39°C, bólu gardła i trudności w połykaniu pojawiają się w dniach 2-10.

Ponieważ pierwsze objawy najczęstszej postaci błonicy o nietypowych objawach są podobne do objawów bólu gardła, przy pierwszych objawach zaleca się pobieranie wymazów w celu wykrycia patogenu. Ale oprócz objawów podobnych do bólu gardła, ma typową postać choroby cechy charakterystyczne, które wiążą się ze specyficznym uszkodzeniem migdałków. Powstała na nich włóknista płytka tworzy gęste filmy. Świeże można je łatwo usunąć, ale gdy zgęstnieją, po ich usunięciu pozostaje krwawiąca rana. Ale błonica jest straszna nie ze względu na filmy na błonach śluzowych, ale z powodu powikłań spowodowanych działaniem toksyny błoniczej.

Możliwe komplikacje

W miarę namnażania się patogenu uwalniana toksyna staje się coraz większa i rozprzestrzenia się w krwiobiegu po całym organizmie. To toksyna powoduje rozwój powikłań, które mogą obejmować:

• Toksyczny szok.
• Uszkodzenie mięśnia sercowego (zapalenie mięśnia sercowego).
• Zmiany dystroficzne nerki (nerczyca).
• Zaburzenia krwawienia (zespół DIC).
• Uszkodzenie obwodowego układu nerwowego (polineuropatia).
• Objawy krupowe (zwężenie krtani).

Rozpoznanie choroby

Główną metodą diagnostyczną jest badanie mikrobiologiczne. W przypadku każdego podejrzanego zapalenia migdałków ten test jest zalecany w celu identyfikacji maczugowców. W tym celu pobiera się wymaz z dotkniętych migdałków i umieszcza w nim materiał pożywka. Analiza trwa 5-7 dni i pozwala zrozumieć toksyczność szczepu Bacillus błonicy.

Dodatkiem do tej metody jest analiza przeciwciał we krwi. Metod przeprowadzenia tej analizy jest wiele, ale istota sprowadza się do tego, że jeśli we krwi pacjenta nie ma przeciwciał przeciwko toksynie błonicy, to w przypadku kontaktu z infekcją prawdopodobieństwo infekcji zbliża się do 99%.

Nieswoistym testem na błonicę jest ogólna analiza krew. Nie potwierdza ani nie zaprzecza obecności patogenu w organizmie, a jedynie pokazuje stopień aktywności procesu zakaźnego i zapalnego u pacjenta.

Leczenie wyłącznie w szpitalu

Bardzo ważne jest, aby natychmiast rozpocząć leczenie błonicy, tylko w ten sposób można zminimalizować prawdopodobieństwo wystąpienia powikłań. Pacjenci podejrzani o tę infekcję są natychmiast hospitalizowani na oddziałach chorób zakaźnych. Zapewnia izolację, odpoczynek w łóżku i pełne spektrum środki terapeutyczne, a mianowicie:

Aktywna profilaktyka błonicy

Ochrona przed tym niebezpiecznym choroba zakaźna jest szczepienie. Ponieważ główną szkodę wyrządza nie sama pałeczka błonicy, ale jej toksyna, szczepienie przeprowadza się za pomocą toksoidu. W odpowiedzi na jego wprowadzenie do organizmu powstają przeciwciała skierowane specjalnie przeciwko toksynom bakterii.

Dzisiaj szczepienie zapobiegawcze przeprowadza się z powiązanymi złożonymi szczepionkami przeciwko krztuścowi, błonicy i tężcowi (DTP). W Rosji zarejestrowanych jest kilka złożonych szczepionek, w tym toksoid błoniczy, produkcji krajowej i importowanej. Toksoid błoniczy jest całkowicie nieszkodliwy i nie powoduje wstrząsu anafilaktycznego ani reakcji alergicznych. W niektórych przypadkach (10%) mogą wystąpić miejscowe reakcje alergiczne w postaci obrzęku, zaczerwienienia i bólu, które znikają samoistnie w ciągu 2-3 dni. Przeciwwskazania do szczepienia mogą obejmować reakcje alergiczne do dowolnego komponentu złożona szczepionka, stosowanie leków immunosupresyjnych, stany niedoborów odporności.

Zgodnie z kalendarzem szczepień szczepionką objęte są dzieci w wieku od 3 do 6 miesięcy. Powtarzane szczepienia przypominające przeprowadza się po 1,5 roku, po 7 i 14 latach. W przypadku dorosłych zaleca się ponowne szczepienie co 10 lat.

Naturalna ochrona

Za szczepieniem przemawia również fakt, że po zakażeniu u człowieka rozwija się raczej niestabilna odporność, która utrzymuje się do 10 lat. Po tym okresie wzrasta prawdopodobieństwo zarażenia się tą chorobą. I choć nawracająca błonica w wielu przypadkach jest łagodniejsza i znacznie łatwiej tolerowana przez pacjenta, wystąpienie zatrucia jest dość prawdopodobne.

Obecnie kwestie szczepień rodzą wiele pytań w społeczeństwie. Jednak w naszym przypadku podejmując decyzję powinniśmy kierować się nie emocjami, a faktami.

Folie dyfterytowe mogą się zatykać drogi oddechowe w ciągu 15-30 minut. W takim przypadku pomoc w nagłych wypadkach może być jedynie profesjonalna - umieszczenie rurki tracheostomijnej. Czy jesteś gotowy zaryzykować życie swoje i swoich bliskich? Wybór należy do Ciebie.