Бледная трепонема (спирохета) и суммарные антитела к treponema palladium — что это такое? Treponema pallidum (сифилис), суммарные антитела - IgA, IgM, IgG, качественный, кровь.

Мир микроорганизмов чрезвычайно разнообразен и систематизирован учёными-исследователями. Изучение живого микромира активно велось в прошлом столетии. Однако, многие болезни до конца не изучены и в нынешнем веке.

Так, например, до сих пор не существует единого мнения по поводу происхождения сифилиса. Эта «французская болезнь», как наиболее древнее инфекционное заболевание человечества, по утверждению М. В. Милича, возникла на Земле одновременно с появлением человека.

К слову, М.В. Милич - ведущий сифилидолог страны периода 60-80-х годов, автора многочисленных книг и монографий, посвященных сифилису.

Официально открытие возбудителя сифилиса относится к 1905 году. Немецкие микробиологи Ф. Шаудин и Э. Гофман определили ряд морфологических, культуральных, биохимических свойств бледной трепонемы, а также некоторые особенности данного микроорганизма, положенные в основу таксономии.

В данной статье подробно разберем особенности строения, антигенную структуру, биохимические и физиологические свойства инфекционного агента, вызывающего сифилис.

Итак, единственным возбудителем сифилиса человека является Treponema pallidum (бледная трепонема). Она относится к порядку Spirochaetales типа Spirochaetes.

Показать всё

1. Морфология Treponema pallidum

Клетки бледных трепонем имеют длину 6-15 мкм, ширину 0,1-0,2 мкм, представляют собой протоплазматический цилиндр (цитоплазма, окружённая цитоплазматической мембраной), скрученный в спираль. Иногда клетка микроорганизма напоминает штопорообразную тонкую нить.

Рисунок 1 - Строение бледной трепонемы. OM, наружная мембрана; Ef (эндофлагелла или периплазматические жгутики); LP 1, 2, липопротеины; Pg - пептидогликан; CM - цитоплазматическая мембрана. (Из Cox DL, Chang P, McDowall AW и Radolf JD: Наружная мембрана, а не оболочка белков хозяина, ограничивает антигенность вирулентной трепонемы паллидум. Infect Immun 60: 1076)

Число завитков - от 8 до 14 штук. Завитки, одинаковые по размерам, сохраняются при любых движениях клетки, даже при движении трепонемы вдоль или между других клеток, например, форменных элементов крови.

Рисунок 2 - Электронная микрофотография Treponema pallidum. (From Fitzgerald TJ, Cleveland P, Johnson RC et al: Сканирующая электронная микроскопия Treponema pallidum (штамм Nichols), прикрепленная к культивируемым клеткам млекопитающих. J Bacteriol 130: 1333, 1977.)

С полюсов клетки, между оболочкой и цитоплазмой располагаются фибриллы. Одна часть фибриллы зафиксирована, вторая часть остаётся свободной. Фибриллы образуют двигательный аппарат трепонемы паллидум, позволяющий осуществлять несколько типов движения в жидкой среде:

1 Перемещение.
2 Вращение вдоль оси.
3 Сгибание.

Treponema pallidum является грамотрицательным микроорганизмом. Однако, по Грамму не окрашивается, так как имеет в своём составе гидрофобные частицы, не восприимчивые к анилиновым красителям.

При окраске по Романовскому-Гимзе приобретает слабо – розовый цвет. Эта особенность послужила основанием для видового названия возбудителя сифилиса.

Treponema pallidum subsp pallidum - это требовательный к условиям окружающей среды микроорганизм, который имеет узкие оптимальные диапазоны pH (7,2-7,4), Eh (-230-240 мВ) и температуру (30-37°C). Трепонемы быстро инактивируются слабым теплом, холодом, высушиванием и большинством дезинфицирующих средств.

Традиционно трепонемы паллидум считались строгими анаэробами, но теперь они известны как микроаэрофильные бактерии.

2. Культуральные и биохимические свойства

Несмотря на интенсивные усилия в течение последних 75 лет, T pallidum pallidum не были успешно культивированы in vitro. Жизнеспособные микроорганизмы могут сохраняться в течение 18-21 дней в комплексных средах, а ограниченная репликация была получена совместным культивированием с клетками культуры ткани. Другие три патогенных вида трепонем также не были успешно выращены in vitro.

При культивации бледная трепонема теряет свою патогенность, но, тем не менее, сохраняет некоторые антигенные свойства (эту особенность используют для постановки реакции Вассермана).

Культуру, в основном, культивируют в тестикулах кроликов. В ткани тестикул трепонема паллидум размножается, вызывая орхит у многострадальных животных.

Размножается Т. pallidum бинарным поперечным делением при температуре около 37˚С. Время генерации in vivo относительно велико (30 часов).

Трепонемы малоустойчивы во внешней среде.

1 Вне человеческого организма живут несколько минут, после высыхания погибают. Так, при температуре 40˚С трепонемы погибают в течение нескольких часов, при температуре свыше 50˚С - в течение 15 минут.
2 При неблагоприятных условиях микроорганизм образует L–формы, а также цисты, которые, в свою очередь, способны, к образованию вновь спиралевидных форм.

По типу метаболизма Т. pallidum является хемоорганогетеротрофом. Это означает, что в качестве источника энергии для жизнедеятельности бледная трепонема использует органические вещества и энергию химических связей.

Ввиду неспособности к существованию Т. pallidum in vitro биохимические свойства изучены не достаточно хорошо.

3. Антигенная структура

Т. pallidum имеет мало изученную антигенную структуру. Она представлена специфическим термолабильным протеиновым антигеном, неспецифическим липоидным антигеном, а также антигеном полисахаридной природы.

Проще говоря, антигены бледной трепонемы – это преимущественно белки, липиды и полисахариды наружной мембраны клетки.

Важную роль играет липополисахарид (ЛПС) клеточной стенки бактерии. Он выполняет антигенную и токсическую функции, являясь эндотоксином бледной трепонемы.

Липоидный антиген сходен с тканевым экстрактом бычьего сердца – кардиолипином.

4. Факторы патогенности

Как и биохимические свойства, факторы патогенности трепонем изучены не достаточно хорошо.

После попадания в макроорганизм Т. pallidum высвобождает специфические белки, липополипротеины и липополисахариды, проявляющие токсические свойства после ее гибели.

Липополипротеины участвуют в активации иммунной системы, а протеины сходны по отдельным свойствам с бактериальными гемолизинами.

К факторам патогенности бледной трепонемы относят способность высвобождать эндотоксины и липидные антигены по все видимости, из липидов митохондриальных мембран, обладающие свойством аутоантигенов.

Т. pallidum, являясь грамотрицательной бактерией, не продуцирует экзотоксины, однако обладает токсической активностью в отношении некоторых клеток, например, нейробластов.

5. Виды иммунитета

В ответ на внедрение возбудителя сифилиса в организм человека возникает клеточный и гуморальный иммунный ответ.

Клеточный иммунитет связан с фиксацией бледной трепонемы к клеткам органов и тканей и последующей активацией макрофагов, Т-лимфоцитов. При этом из организма человека возбудитель сифилиса не элиминируется.

Гуморальный иммунитет характеризуется образованием специфических иммуноглобулинов. На ранних этапах инфекции в организме человека образуются IgM. По мере прогрессирования инфекции активируется синтез IgG. IgA синтезируется в малых количествах. Вопросы участия и синтеза IgD и IgE не достаточно хорошо изучены.

6. Чувствительность к антибактериальным препаратам

Возбудитель сифилиса чувствителен практически ко всем антибиотикам, но к препаратам выбора относятся пенициллины.

В основе клеточной стенки бледной трепонемы лежит пептидогликан, выполняющий защитную функцию. Этот пептидогликан является «мишенью» для основного антибактериального препарата, предназначенного для лечения сифилиса – пенициллина. Антибиотики группы пенициллинов разрывают тетрапептидные связи пептидогликана.

При воздействии антибиотика на растущую бледную трепонему (возможно, при длительном воздействии) образуется L-форма бактерии. Такая форма лишена клеточной стенки, но всё ещё способна к размножению.

Определение чувствительности бледной трепонемы к антибактериальным препаратам не проводится.

7. Лабораторная диагностика сифилиса

Лабораторные методы диагностики сифилиса условно можно разделить на 2 группы:

1 Выявление самого возбудителя заболевания из биологических препаратов (содержимое шанкра, гнойное отделяемое папул, пунктаты из лимфатических узлов).
2 Серологические реакции.

Серологические реакции используются как для верификации диагноза, так и для оценки эффективности терапии сифилиса. Особенность серологии сифилиса сводится к отсутствию положительных результатов анализов на раннем этапе заболевания.

Объясняется это достаточно просто. Так, инкубационный период сифилиса в среднем составляет 3-5 недель. Было замечено, что у асоциальных лиц, злоупотребляющих спиртным, а также у лиц с туберкулёзом и ВИЧ-инфекцией инкубационный период отличается от средних показателей в сторону уменьшения (2 недели).

Инкубационный период увеличивается на фоне приёма различных антибактериальных препаратов (до 6 месяцев).

На протяжении этого времени концентрация антител не успевает достигнуть диагностического титра. Однако, у инфицированного человека могут присутствовать клинические симптомы. Такой сифилис называется серонегативным.

Серопозитивным называют сифилис с яркой клинической картиной и присутствием в крови диагностического титра антитела (то есть положительный результат серологических реакций). При отсутствии лечения серопозитивный сифилис перетекает во вторичный сифилис, длящийся несколько лет.

8. Выявление T. pallidum в субстрате

8.1. Методика исследования Т. pallidum в «тёмном поле»

Популярным методом диагностики является обнаружение бледной трепонемы в тёмном поле микроскопа. Этот метод позволяет наблюдать за трепонемой, учитывать особенности её морфологии и движения.

Материал для исследования забирают с твердого шанкра или с эрозий гранулём и папул. Осторожно захватывают предварительно очищенный материал петлей, смешивают с каплей физиологического раствора и наносят на предметное стекло.

Живой материал изучают в тёмном поле микроскопа. Для этого применяют специальный конденсор, позволяющий изучать трепонему «во всей красе».

8.2. Микроскопия мазков, окрашенных по Романовскому-Гимзе

Для исследования фиксированных (сухих) мазков используется метод окрашивания по Романовскому-Гимзе. При таком окрашивании другие виды трепонем приобретают фиолетовый оттенок, а Т. pallidum - бледно-розовый цвет.

Остальные методы исследования, такие как способ Бури, серебрение по Морозову, простой фуксиновый метод и др., не получили широкого практического применения, ввиду малой информативности.

9. Серодиагностика

Выявление антител к бледной трепонеме проводится для:

1 Подтверждения клинического диагноза сифилиса;
2 Установления диагноза скрытого сифилиса;
3 Контроля за эффективностью проводимого лечения;
4 Подтверждения выздоровления больных сифилисом;
5 Профилактика сифилиса и диспансеризация населения (исследование крови определённых категорий людей, например, относящихся к группам риска).

Современные методы серодиагностики основаны на выявлении специфических и неспецифических антител разных классов.

9.1. Неспецифические серологические реакции

Лабораторное исследование крови проводится на предмет обнаружения противолипидных антител.

Реакция Вассермана (РВ, RW)

Является классической неспецифической реакцией. В её основе лежит принцип связывания комплемента. Проводится реакция с двумя-тремя антигенами. Исполняется как для количественного, так и для качественного определения неспецифических антител.

RW ставится с кардиолипиновым и трепонемным антигеном. Последний позволяет повысить специфичность реакции и оценить состояние иммунитета больного.

При первичном сифилисе RW имеет положительное значение в конце инкубационного периода, т.е. через примерно 4 недели от начала заболевания.

При исследовании больных вторичным сифилисом положительная RW выявляется у 100% больных и у 75% больных в стадии третичного сифилиса.

Нередко, RW даёт ложноположительные результаты. Они имеют место быть при следующих физиологических состояниях:

1 При других инфекциях, вызванных вирусами, бактериями, простейшими;
2 При злокачественных опухолевых процессах;
3 При коллагенозах;
4 При беременности на поздних сроках (после 30 недели) и после родов;
5 У здоровых лиц, употребляющих спиртные напитки, а также после приёма жирной пищи.

Реакции, основанные на агглютинации кардиолипина (MP - RPR, VDRL)

Эти реакции являются методом экспресс-диагностики сифилиса. По своему существу, это микрореакции, проводимые с плазмой крови (наиболее чувствительный метод) и инактивированной сывороткой (второй по чувствительности).

Они проводятся капельным способом и требуют использование специального антигена. Этот метод серодиагностики проводится для отбора положительных проб с дальнейшим исследованием лиц с помощью специфических реакций.

9.2. Специфическая серодиагностика

В основе диагностики представлены различные методы обнаружения специфических антител.

9.2.1. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Занимает срединное положение из всех специфических методов серодиагностики. Реакция основана на принципах идентификации методом люминесцентной микроскопии флюоресцирующего комплекса, связанного с иммуноглобулином организма человека на поверхности клетки-патогена.

Флюоресцирующий комплекс состоит из человеческого глобулина и флюоресцеин тиоизоционата. Существует несколько модификаций этой реакции:

1 Реакция иммунофлюоресценции с адсорбцией;
2 Реакция IgМ – РИФ с адсорбцией.

9.2.2. Реакция иммобилизации Treponema pallidum (РИБТ)

Реакция РИБТ основана на особенности заражённой сыворотки крови людей обездвиживать бледные трепонемы.

В общих чертах методику можно объяснить так: в кровь больного добавляют антиген, приготовленный из сифиломы кролика и комплемент.

Иммобилизирующие антитела - это поздние антитела. Своего максимума они достигают к концу первого года болезни. Этот метод не применяется при первичном серонегативном сифилисе, считается наиболее трудоёмким.

9.2.3. Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA)

Данный метод диагностики автоматизирован. По чувствительности и специфичности сходен с реакцией иммунофлюоресценции с адсорбцией.

9.2.4. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

На фоне других серологических исследований, РНГА отличается более высокой чувствительностью и специфичностью, особенно при использовании высококачественного антигена.

Принцип реакции основан на агглютинации эритроцитов, несущих на своей поверхности антигены бледной трепонемы, если к ним добавить специфические антитела. Результат РПГА будет положительным уже в конце инкубационного периода, т. е. через 3-4 недели.

Учитывая все особенности возбудителя сифилиса, можно выделить мероприятия, направленные на защиту здорового человека от заражения сифилисом.

Так как заболевание передаётся половым и контактным (бытовой сифилис) путями, стоит знать, что эффективными способами защиты являются барьерная контрацепция и соблюдение общих правил гигиены.

Простое описание

Анализ на сифилис RPR, также называется антикардиолипиновым тестом и относится к нетрепонемным тестам, поскольку выявляет антитела (классов IgG и IgM) к составным элементам тканей трепонемы. Однако данное исследование определяет не только антитела к Treponema pallidum (бледной трепонеме), но также к другим разновидностям трепонем, или к некоторым собственным тканям организма (при аутоиммунных болезнях, хронических инфекциях).

Анализ на сифилис RPR это удобный и доступный тест, который отлично подходит для скрининга и для наблюдения за результативностью лечения болезни, за её течением.

Сифилис ранний (А51) - это венерическое заболевание, вызванное бледной трепонемой, характеризующееся медленным прогрессирующим течением.

Распространенность: около 20% в популяции. Предрасполагающие факторы: нарушение иммунитета, стрессы, длительное переутомление, переохлаждение. Инкубационный период - 3–4 недели.

Сифилис — это венерическое хроническое заболевание, которое передается половым путем. Инкубационный период организма составляет около трех недель.

После этого в месте, где возбудитель был внедрен, появляется первичный аффект в виде твердого шанкра или безболезненной язвы. При отсутствии лечения инфекции развивается вторичный и третичный сифилис.

Сифилис (Syphilis, lues) заболевание, передающееся половым, контактно-бытовым, трансфузионным и трансплацентарным путем. Обилие путей передачи и огромный вред, наносимый организму, делает его чрезвычайно опасным, как для человека, так и общества в целом.

Возбудителем заболевания является Treponema pallidum. Следы ее присутствия в организме можно очень четко увидеть в анализе крови. Ранняя диагностика позволяет прервать путь передачи, обезопасить окружающих и вернуть здоровье больному человеку.

Какие виды диагностики сифилиса применяются в нашей клинике?

Медицинский центр «Аспирин» в своей работе использует как классические, так и инновационные методики, поднявшие диагностику заболевания на совершенно новый качественный уровень. Среди применяемых методик:

диагностика сифилиса (RPR);
диагностика сифилиса (РПГА);
АТ к возбудителю сифилиса IgM (anti-Treponema Pallidum IgM);
АТ к возбудителю сифилиса, IgG суммарные (anti-Treponema Pallidum -суммарные);
диагностика сифилиса (РИФ).

Рассмотрим особенности каждой диагностической методики.

Лабораторная диагностика

Диагноз ставится на основании дерматовенерологической симптоматики и лабораторной диагностики: нетрепонемные (реакция Вассермана с кардиолипиновым антигеном) и трепонемные анализы крови (ИФА, реакция иммунофлюоресценции, реакция иммобилизации бледных трепонем, RW с трепонемным антигеном).

Теперь нам более-менее понятно, что это такое — Treponema Pallidum. В лаборатории диагностировать сифилис можно двумя методами:

Выявление возбудителя заболевания с помощью биологических препаратов.
Серологические реакции.

Последний способ диагностики может быть использован для постановки диагноза и для оценки эффективности лечения. Особенность серологии заключается в том, что положительные результаты на ранних этапах заболевания могут вообще отсутствовать, хотя симптомы у больного будут.

Это объясняется легко: инкубационный период сифилиса составляет 3-5 недель. Однако у людей, которые злоупотребляют спиртными напитками, болеют туберкулезом или ВИЧ-инфекцией, инкубационный период может длиться около двух недель.

При приеме антибактериальных препаратов инкубационный период может возрасти до 6 месяцев. В течение всего этого времени концентрация антител достаточного мала и не достигает диагностического титра.

Но у человека все равно могут наблюдаться клинические симптомы сифилиса. Такое заболевание называется серонегативным сифилисом.

Серопозитивный сифилис отличается ярко выраженными симптомами и клинической картиной. В крови сразу обнаруживаются антитела treponema pallidum.

Положительный результат предполагает немедленное лечение заболевания. В противном случае серопозитивный сифилис перетекает во вторичный, и он может длиться годами.

Анализ на определение сифилиса человеку приходится сдавать едва ли не чаще всех: приём на работу, медкомиссии, профилактические осмотры, беременность. Выполнение этих исследований необходимо – они позволяют выявить заболевание на ранних стадиях, когда лечение будет иметь наиболее высокую эффективность.

Полученный положительный результат нередко ставит в тупик человека, особенно при отсутствии каких-либо поводов. Выявление сифилиса ложноположительного – достаточно частое явление, а потому не стоит раньше времени поддаваться панике. Согласно информации из разных источников, до 30% первичных исследований могут давать неправильный результат. Причин такому явлению достаточно много: изменение состояния организма, соматические заболевания. Чтобы лучше понять, почему они появляются, стоит более тщательно разобраться в вопросе проведения исследования.

Типы анализов на сифилис

Методы клинических исследований стремительно совершенствуются с каждым годом. С разработкой новых способов диагностики, ложноположительная реакция на сифилис встречается всё реже. При необходимости диагностика может включать в себя несколько разных методик – это позволяет получить наиболее достоверный результат.

Нетрепонемные методы исследования

Эти методики направлены на выявление белков, которые образуются в результате активности бледной спирохеты. Они направлены на определение «следов» возбудителя. Такие методы имеют относительно высокий процент погрешности (до 10%). Подобные методики являются неспецифичными, но позволяют по титру антител определять степень заражения.

Реакция Вассермана RW

Наиболее распространённым анализом, который проводится для выявления бледной трепонемы, является серологическое исследование крови. Реакция Вассермана позволяет всего за несколько минут определить наличие болезни. Поэтому данная методика применяется в лабораториях чаще всего – она не требует много времени и имеет относительно низкую стоимость.

Для выполнения анализа используется спинномозговая жидкость или кровь. Забор исследуемого материала может осуществляться из пальца (если анализ всего один) или из вены (если требуется проведение нескольких исследований). В результате проведения анализа может быть не только ложноположительный, но и ложноотрицательный. Он возможен при следующих обстоятельствах:

ранняя стадия заражения, когда количество трепонем в организме ещё низкое;
хроническое заболевание в стадии затихания, когда число антител снижается.

Обратите внимание! Ложноотрицательный результат возникает крайне редко, а потому при наличии хотя бы одного плюса из четырёх, необходимо пройти дополнительное обследование.

Микрореакция реципитации (МР)

Данная методика исследования основана на реакции антиген-антитело. Она требует небольшого количества материала для выполнения. Направлена на выявление антилипидных антител, которые вырабатываются в процессе разрушения клеток трепонемой. Для исследования используется как кровь пациента, так и спинномозговая жидкость.

Поскольку разрушение клеток может происходить не только при сифилисе, анализ используется в качестве отборочного, а не подтверждающего. Существует два аналога этой методики:

Микроскопический тест (VDRL). Для выполнения анализа применяется инактивированная сыворотка крови. При подозрении на поражение нервной системы сифилисом, в качестве исследуемого материала используется спинномозговая жидкость.
Макроскопический тест (RPR). Считается методом экспресс-диагностики. Применяется визуальный подсчёт плазменных реагинов.

Данная реакция при несоблюдении необходимой стерильности может показывать ложноположительный результат. Появление такого анализа также возможно при неспецифическом повреждении тканей, что влечёт за собой разрушение липидов. При наличии положительного результата рекомендуется обязательное проведение трепонемного теста для подтверждения.

Трепонемные методы исследования

Эта категория анализов даёт наиболее точные данные и тут редко бывают ложноположительные результаты. Исследования направлены на выявление специфичных белков, которые выделяются организмом в ответ на заражение. Данные методики имеют более высокую стоимость, а потому применяются в качестве подтверждающих, а не отборочных.

Специфические антитела начинают вырабатываться организмом только через несколько недель после заражения трепонемой. Они могут сохраняться в течение продолжительного периода по излечении болезни. Поэтому специфичные тесты могут показывать положительные результаты в течение продолжительного времени после ремиссии.

Обратите внимание! При положительном RW и отрицательном специфическом применяется повторное проведение исследования через несколько недель.

Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA)

Основывается на оценке уровня иммуноглобулинов класса IgA, IgB и IgM. Первые два типа белков вырабатываются в организме уже с 2 недель инфицирования, а IgM – через месяц после заражения.

Интерпретация анализа осуществляется на основании соотношения наличия иммуноглобулинов:

обнаружены только IgA – с момента инфицирования прошло не более 14 дней;
обнаружены IgA и IgB – заражение произошло от 14 до 28 дней назад;
обнаружены все три типа – сифилис в организме более 28 дней;
обнаружен только IgM – поздний сифилис.

Наличие IgM может быть признаком уже вылеченного сифилиса – синтез иммуноглобулинов IgM может продолжаться ещё несколько месяцев после ремиссии.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ, FTA)

Используется для подтверждения заражения на самых ранних этапах. Для исследования проводится забор крови из пальца или вены. Результат похож на анализ RW, где указан минус, или от 1 до 4 плюсов. При наличии хотя бы одного плюса может назначаться дополнительное исследование.

Крайне редко встречаются ложноположительные результаты при выполнении РИФ – они могут быть у беременных, а также у пациентов с заболеваниями соединительных тканей.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА, TPHA)

Титр антител позволяет определить наличие сифилиса и его стадию. Достоверные данные эта методика даёт уже с 28 дня после заражения. Для оценки используется кровь из пальца или вены. Повышение количества антител означает более позднюю стадию болезни.

Наиболее точные методики исследования

Анализы этой группы отличаются высокой чувствительностью, а потому погрешность в их результатах крайне низка. Их отличает более высокая стоимость, в сравнении с другими методами, и более сложная техника выполнения.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Анализ ПЦР считается одним из самых высокоточных. Он направлен на определение участков патогенной ДНК в организме человека. Метод требует наличия специализированного оборудования и реактивов, а потому используется в редких случаях.

Имуноблоттинг

Комбинированный метод исследования. Направлен на определение иммуноглобулинов в сыворотке крови пациента. При анализе проверяется наличие комплекса антител, по которым и устанавливается диагноз. В данной методике применяется электрофорез, с помощью которого разделяют иммунодетерминанты, и реакция ИФА, которая проявляет разделённые точки.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Высокоспецифичный анализ, который определяет реакцию сыворотки крови на бледную трепонему. Он широко применяется во всём мире, поскольку имеет высокую вероятность точного результата. Специальные антитела (иммуномобилизины) у больного сифилисом способны обездвиживать трепонему. В крови здорового человека таких антител нет. Именно на наличии/отсутствии данной способности и основана методика исследования.

РИБТ используется для выявления тех разновидностей сифилиса, при которых реакция Вассермана даёт отрицательные результаты – поражение нервной системы, внутренних органов, скрытой формы болезни. Ложноположительный результат в странах СНГ встречается крайне редко. Причиной его появления может быть саркоидоз, лепра.

Причины ложноположительных результатов

Реакция Вассермана может определять «острый» и «хронический» ложноположительный результат. Его выраженность зависит от характера изменений состояния человека. Показывать стадию обострения RW может в таких случаях:

инфекционные заболевания в стадии обострения;
травматические повреждения;
инфаркт миокарда;
введение любой вакцины за несколько дней до пробы;
пищевое отравление.

Эти состояния характеризуются усиленной работой иммунной системы, что приводит к повышенной выработке антител. Они ошибочно распознаются в реакции как антитела к трепонеме, а потому возникает положительный результат.

При наличии патологий хронического характера, иммунная система вырабатывает большое количество неспецифических антител, которые могут вызвать реакцию. В RW такое состояние может показывать ложноположительный результат. Поэтому стоит предупредить врача о следующих заболеваниях:

хронические патологии соединительных тканей;
туберкулёз;
хронические заболевания вирусной этиологии: ВИЧ, гепатиты В, С, D;
хронические заболевания печени;
аутоиммунные патологии.

С возрастом в организме пациента окислительно-восстановительные реакции замедляются. Старение тканей также может показывать ложноположительный результат, а потому для пациентов преклонного возраста назначаются более точные методики исследования.

Обратите внимание! При положительной реакции Вассермана проводится дополнительное исследование, которое позволяет получить более точную картину.

Повторная проверка

Повторный проводится при сомнительных результатах скринингового исследования. Он назначается при наличии одного или двух крестов – такой анализ требует дополнительной проверки. Исследование может давать ложноположительные результаты в нескольких случаях:

Ранняя стадия болезни. До появления твёрдого шанкра количество иммуноглобулинов в организме достаточно низкое.
Поздняя стадия болезни. С момента заражения прошло более 2 лет, и титр антител постепенно начал снижаться.

Повторный анализ, который проводится через 2-3 недели, показывает точно, есть ли заболевание. При наличии положительного результата второй раз, используются дополнительные уточняющие методики.

Анализы при беременности

Одним из самых неожиданных может стать положительный результат теста на сифилис у беременных, особенно если женщина не меняла партнёра. Такая ситуация нередко приводит в ужас будущих мам, поскольку трепонема может негативно влиять на внутриутробное развитие малыша.

Скрининговое исследование при беременности проводится несколько раз:

при становлении на учёт, в 12 недель;
начало 3 триместра, в 30 недель;
перед родами.

Это то количество исследований, которое считается минимальным. Ложноположительный может проявляться из-за перестройки организма, происходящей во время беременности. Когда женщина вынашивает ребёнка, её иммунная система вырабатывает большое количество антител – это эволюционное приспособление для защиты малыша в первый год жизни.

Во время беременности назначают дополнительный уточняющий анализ, который характеризуется большей точностью. Если контрольное исследование показывает наличие возбудителя в организме, обязательно проводится лечение. Влияние терапии на растущий организм существенно меньше возможного вреда от трепонемы.

Как подготовиться к анализам?

Одним из способов предупреждения неправильного результата является подготовка к сдаче анализов. Из-за неправильной подготовки возможно появление реакций, которые сопровождаются выработкой неспецифических антител, что и приводит к появлению неправильного результата.

Анализ обязательно нужно сдавать натощак. Можно употреблять только чистую воду.
За сутки до забора крови стоит полностью исключить алкоголь – он создаёт дополнительную нагрузку на печень, что может привести к появлению положительного результата.
Рекомендуется накануне отказаться от употребления жирной и жареной пищи, острых блюд и большого количества специй.
Минимум за 60 минут до анализа рекомендуется воздержаться от курения.
Перед забором крови из вены нужно отдохнуть минут 10-15 в приёмном покое.
Женщинам не рекомендуется сдавать кровь во время менструаций.
Нельзя проводить анализ после рентгенологического исследования, физиотерапевтических процедур.
Запрещено сдавать кровь на сифилис в период обострения инфекционных заболеваний.

Обратите внимание! Если пациент принимает какие-либо лекарства, он должен проконсультироваться с врачом перед проведением исследования, может потребоваться перерыв в несколько дней между приёмом препаратов и анализом.

Что делать при подтверждении сифилиса?

Не стоит беспокоиться при получении первичного скрининга с положительными результатами. Ложный сифилис легко определяется повторным исследованием. Если всё же диагноз был подтверждён, нужно принять меры:

обследование полового партнёра у дерматовенеролога;
обследование близких родственников;
выполнение превентивного лечения, для предупреждения заражения у близких;
оформление больничного листа на период лечения – больничный лист не содержит информацию о диагнозе, гарантируя конфиденциальность;
по окончании курса лечения выдаётся специальная справка – её нужно иметь при себе, чтобы избежать в дальнейшие несколько месяцев вопросов о ложноположительных результатах.

Положительный результат на сифилис не всегда бывает достоверным. Поэтому не стоит беспокоиться и рекомендуется подождать дополнительного исследования. Правильное лечение, которое было начато вовремя, гарантирует быстрое выздоровление с минимумом остаточных явлений.

Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

Синонимы русские

Суммарные антитела к возбудителю сифилиса (бледной трепонеме), антитела к антигенам Treponema pallidum IgG/IgM.

Синонимы английские

Syphilis IgM, IgG; Treponema pallidum Antibodies, Total; Antibodies to T. pallidum, IgM/IgG, Anti-Treponema pallidum IgG/IgM.

Метод исследования

Иммунохемилюминесцентный анализ.

Какой биоматериал можно использовать для исследования ?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Анализ проводится в целях обнаружения Treponema pallidum (бледной трепонемы) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение. Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Различают несколько стадий сифилиса. Первичная наступает примерно через 2-3 недели после заражения. Одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, появляются, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Зачастую твердый шанкр безболезненный и может оставаться незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Исчезает язва через 4-6 недель.

Вторичный сифилис начинается через 2-8 недель после первого появления твердого шанкра. Эта стадия заболевания характеризуется появлением на коже розеолезно-папулезной сыпи, чаще на ладонях и подошвах. Бывают и другие симптомы, такие как лихорадка, усталость, опухание лимфатических узлов, боль в горле и ломота в теле. Если сифилис не лечить, он может развиваться в скрытой форме, при которой у инфицированного человека не проявляется никаких симптомов, но он продолжает оставаться носителем инфекции. Эта стадия иногда длится годами.

У 15 % больных, которые не лечатся, проявляется поздний, или третичный, сифилис, который может продолжаться несколько лет и в заключение приводить к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам (нейросифилису), болезням сердца и даже к смерти.

Существует несколько методов, которые могут быть использованы для проверки на сифилис. Один из них позволяет определять антитела к T. pallidum в крови. Этот анализ наиболее чувствительный и специфический для обнаружения трепонемных антител на всех стадиях, в том числе и на ранней.

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG.

В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени.

Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum.

После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более.

От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Для чего используется исследование?

Для диагностики сифилиса.
Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование?

При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле.
Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи.
При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его.
Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом).
Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: отрицательно.

Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Положительный результат у ранее серонегативного пациента, а также значительный прирост титров в парных сыворотках, взятых с интервалом 7 дней, говорит о первичной инфекции. Обнаружение антител к трепонеме в крови новорождённого помогает подтвердить диагноз «врождённый сифилис».

Кроме того, причиной положительного результата может быть третичный или скрытый сифилис.

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Что может влиять на результат?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности.

Важные замечания

Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.
Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.

Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр
Treponema pallidum, ДНК [ПЦР]
Сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), титр

Кто назначает исследование?

Дерматолог, дерматовенеролог, гинеколог, уролог, инфекционист, терапевт, педиатр.

Treponema – род бактерий, объединяющий многочисленные виды, из которых самым распространенным является возбудитель сифилиса – treponema pallidum (трепонема паллидум, бледная трепонема). В этот род также входят возбудители фрамбезии и пинты. Treponema pallidum является спиралевидной бактерией семейства Spirochaetiaceae (спирохеты), вызывающей инфекционное венерическое заболевание - . Патология отличается волнообразным течением и проявляется характерной клиникой. Заражение происходит преимущественно половым путем, благодаря чему сифилис относится к ИППП.

В настоящее время в мире регистрируется огромное количество венерических заболеваний, которые представляют реальную угрозу для жизни человека. Treponema pallidum – опасный микроб, вызывающий системное заболевание, поражающее кожу и внутренние органы. На месте внедрения спирохеты образуется первичный патологический очаг – . Затем на коже появляются сифилитические высыпания, увеличиваются регионарные лимфатические узлы. При отсутствии адекватной терапии поражаются внутренние органы, развиваются необратимые изменения, возможен летальный исход.

Treponema pallidum

Морфология

Treponema pallidum - грамотрицательный микроорганизм, имеющий форму тонкой спирали, скрученной в 8-12 мелких завитков. Свое название бледная трепонема получила благодаря способности не воспринимать обычные лабораторные красители.

Спирохета является строгим анаэробом, хорошо растущим в бескислородной среде. Но не смотря на это, жизнеспособность бактерий сохраняется на окружающих бытовых предметах в течение 3 и более дней. Трепонема имеет жгутики и фибриллы. Благодаря им и собственным сокращениям клетки бактерия совершает поступательные, вращательные, сгибательные, волнообразные, винтообразные и контрактильные движения. Она быстро проникает в живые клетки и стремительно размножается в них поперечным делением.

Бледная трепонема имеет трехслойную клеточную стенку, цитоплазму и органеллы: рибосомы, мезосомы, вакуоли. Рибосомы синтезируют белки, а мезосомы обеспечивают дыхание и обмен веществ. Ферменты и антигены содержатся в цитоплазматической мембране. Тело бактерии покрыто слизистой бесструктурной капсулой, выполняющей защитную функцию.

Физические свойства

Микробы устойчивы к низким температурам и чувствительны к высоким. При нагревании они гибнут в течение 20 минут, при высыхании в течение 15 минут, а при кипячении – мгновенно. Антисептики и дезинфектанты быстро уничтожают бледную трепонему. Губительное действие на бактерию оказывают: ультрафиолет, свет, спирт, щелочи, уксус, мышьяк, ртуть, хлорсодержащие дезинфицирующие средства. Treponema pallidum устойчива к некоторым антибиотикам.

Бледная трепонема проявляет свои патогенные свойства во влажной и теплой среде. В организме человека излюбленным местом размножения являются лимфатические узлы. На стадии вторичного сифилиса микробы концентрируются в крови и проявляют свои патогенные свойства.

Культуральные свойства

Трепонема паллидум не растет на искусственных питательных средах, в культуре клеток и куриных эмбрионах. Ее культивируют в яичках кролика. В этих клетках микроб хорошо растет и размножается, полностью сохраняя свои свойства и вызывая у животного орхит.

Существуют обогащенные питательные среды, предназначенные для выделения чистой культуры. Микробы на них растут под толстым слоем вазелинового масла. Таким способом получают антитела, необходимые для постановки специфических реакций на сифилис.

Трепонемы растут на кровяном или сывороточном агаре в бескислородной среде. При этом они теряют свои патогенные свойства, но сохраняют антигенные. Патогенные трепонемы способны ферментировать маннит, утилизировать лактат и образовывать специфические метаболиты.

Патогенность

К факторам и компонентам патогенности и вирулентности бактерий относятся:

Белки-адгезины, обеспечивающие фиксацию микроба на клетке-хозяина,
Миофибриллы, способствующие глубокому проникновению в организм и миграции бактерии в теле хозяина,
Образование L-форм,
Липополисахариды наружной мембраны,
Фрагменты болезнетворной клетки, проникающие вглубь тканей,
Способность внедряться в межклеточные соединения эндотелия,
Антигенная изменчивость.

Трепонема паллидум оказывает прямое токсическое действие на синтез макромолекул – ДНК, РНК и белков. Антигены Т. pallidum используются в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса. При неблагоприятных условиях спирохета трансформируется в L-формы, которые обеспечивают ее устойчивость к антибактериальным средствам и антителам.

Эпидемиология

Сифилис - строгий антропоноз. Инфекция персистирует только в организме человека, который является ее естественным резервуаром в природе. Входными воротами инфекции являются: поврежденный плоскоклеточный или цилиндрический эпителий ротовой полости или половых органов.

Распространение инфекционных агентов происходит:

Половым путем во время полового акта через сперму,
Бытовым путем через белье, средства гигиены, косметические принадлежности, при поцелуе,
Вертикальным путем от инфицированной матери ребенку во время родов, а также через молоко при кормлении грудью,
Трансплацентарным путем на поздних сроках беременности,
Гематогенным путем при прямом переливании крови, во время операций, при использовании общего шприца у наркоманов.

Риск инфицирования повышен у медицинских работников – стоматологов, косметологов. Заражение происходит при проведении медицинских манипуляций и процедур, повреждающих кожные покровы. Заражаются treponema pallidum лица, ведущие беспорядочную половую жизнь, имеющие несколько половых партнеров, пренебрегающие барьерными методами контрацепции. Для того, чтобы произошло инфицирование, у больного в секрете должно быть много бактерий, а у партнера - должны присутствовать повреждения на слизистой оболочке.

первые проявления болезни

Больной максимально заразен в периоды первичного и вторичного сифилиса, когда на коже и слизистой половых органов появляются первые признаки болезни. В это время в окружающую среду выделяется много спирохет.

В настоящее время регистрируется большое число больных с экстрагенитальными шанкрами, расположенными на слизистой рта, глотки, ануса. У них высыпания локализуются на лице, сифилиды – на ладонях и подошвах. Третичный период сифилиса в последнее время развивается в очень редких случаях и протекает практически бессимптомно.

Симптоматика

Инкубация характеризуется миграцией бактерий по лимфатическим и кровеносным сосудам и их активным размножением в лимфоузлах. Продолжительность периода - от 3 недель до 3 месяцев.

Врожденный сифилис развивается в результате внутриутробного заражения плода. Эта тяжелейшая патология проявляется характерной триадой симптомов у ребенка: врожденной глухотой, кератитом, гетчинсоновыми зубами.

Диагностика

Диагностика сифилиса включает опрос и осмотр пациента, сбор анамнестических сведений, а также клинические испытания, которые играют важную роль в обнаружении бледной трепонемы и постановке диагноза.

Микроскопическое исследование биоматериала. Бактериоскопию мазка-отпечатка шанкра или биоптата лимфатического узла проводят в первые 4 недели болезни. Для получения качественного мазка поверхность эрозии и язвы обрабатывают физраствором, производят соскоб и из полученного материала готовят препарат для микроскопии. Мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. Трепонема имеет бледно-розовый цвет. Живые микробы в неокрашенном и нефиксированном мазке не видны в световой микроскоп. Для их обнаружения применяют темнопольную или фазовоконтрастную микроскопию. Для проведения темнопольной микроскопии берут материал из сифилитической язвы и исследуют его в специальном аппарате. Бактерия обладает способностью преломлять свет: в микроскопе она имеет вид белой спиралевидной полоски. Для обнаружения трепонем в различных клинических материалах применяется также люминесцентная микроскопия.

Лечение

Лечением сифилиса занимается врач-дерматовенеролог. Он подбирает терапию индивидуально с учетом стадии, клиники болезни и особенностей пациента. Комплексное лечение способствует полному выздоровлению, которое должно подтверждаться лабораторно.

Лечение сифилиса этиотропное, направленное на уничтожение возбудителя – treponema pallidum. Больным назначают большие дозы антибиотиков, к которым чувствителен данный микроб. Обычно используют пенициллины «Бензилпенициллин», тетрациклины «Доксициклин», макролиды «Кларитромицин», «Сумамед», цефалоспорины «Цефазолин», фторхинолоны «Ципрофлоксацин». Антибактериальную терапию продолжают 2 месяца. Лечение беременных женщин проводят также.

Иммуностимуляция, витаминотерапия, физиопроцедуры дополняют этиотропное лечение и помогают больным восстановиться после болезни. Превентивная терапия проводится половому партнеру и лицам, контактировавшим с больным.

Видео: дерматовенеролог о лечении сифилиса

Профилактика

Профилактические мероприятия заключаются в соблюдении личной гигиены, использовании отдельного белья и посуды, индивидуальных косметических средств. Рекомендуется сразу после незащищенного полового акта обработать раствором хлоргексидина или альбуцида половые органы или другие части тела, с которыми произошел контакт. Эти средства необходимо иметь в домашней аптечке.

С профилактической целью обследуют:

Доноров,
Беременных женщин,
Работников детских садов, школ, общепита и лечебно-профилактических учреждений,
Больных, поступающих на стационарное лечение.

Современная противомикробная терапия позволяет избавиться от патологии и делает прогноз заболевания благоприятным. Только врач-дерматовенеролог сможет подобрать правильное и достаточное лечение, соответствующее стадии болезни. Заниматься самолечением сифилиса категорически запрещено. Не до конца излеченная патология может перейти в хроническую форму. Такой больной опасен для окружающих лиц.

Сифилис – социальный недуг, к лечению которого нужно подходить серьезно и ответственно.