Badanie cytologiczne i jego znaczenie w onkologii. Badanie cytologiczne jest delikatną metodą wczesnej diagnostyki. Metody badań cytologicznych w skrócie

Nie tylko ofiary tych chorób, ale także ich rodziny bardzo cierpią z powodu chorób dziedzicznych (genetycznych). Rodziców czasami dręczy poczucie winy, które popycha ich do alkoholu, narkotyków i prowadzi do rozwodu. Opieka nad chorym dzieckiem pochłania czas, energię i zasoby, czasami pozbawiając inne dzieci normalnego środowiska domowego.

Jednocześnie za pomocą metod genetycznych można określić, jak duże jest ryzyko urodzenia chorego dziecka. Istnieje kilka metod badania dziedziczności człowieka.

Metoda genetyczna

Podstawą tej metody jest badanie rodowodu konkretnej rodziny. Metoda ta pozwala ustalić wzorce dziedziczenia różnych cech człowieka, zarówno normalnych, jak i tych związanych z chorobami dziedzicznymi.

Metoda bliźniacza

Wiadomo, że różnice między bliźniętami dwujajowymi determinowane są genotypem, a bliźniętami jednojajowymi – czynnikami środowiskowymi. Dlatego też poprzez badania bliźniacze można ustalić wpływ środowiska i dziedziczności na rozwój różnych cech, w tym chorób. Na przykład na odrę chorują zarówno bliźnięta jednojajowe, jak i dwujajowe, co potwierdza zależność choroby od czynników środowiskowych, od przedostania się patogenu do organizmu.

Błonicę lub gruźlicę wywołują ich patogeny, ale genotyp odgrywa rolę w ryzyku zarażenia tymi chorobami. A jeśli jedno z bliźniąt jednojajowych zachoruje na tę chorobę, jest prawdopodobne, że drugie też na nią zachoruje.

Metoda cytologiczna

Metoda cytologiczna opiera się na badaniu mikroskopowym struktury chromosomów u osób zdrowych i chorych. Nieprawidłowa liczba chromosomów płciowych (więcej lub mniej niż 46) występuje w przypadkach, gdy rozbieżność chromosomów w mejozie zostaje zakłócona i jeden więcej lub mniej chromosomów trafia do gamet (zespół Downa, zespół Shereshevsky'ego-Turnera itp.).

Metoda biochemiczna

Metoda biochemiczna opiera się na badaniu procesów biochemicznych zachodzących w organizmie, zwanych metabolizmem (metabolizmem). Znanych jest wiele chorób dziedzicznych związanych z zaburzeniami metabolicznymi (wadami wrodzonymi), wśród których jest albinizm.

Zastosowanie opisanych metod w genetyce i medycynie pozwala w odpowiednim czasie zidentyfikować pewne zaburzenia występujące w organizmie na poziomie komórkowym. Zatem badanie krwi pozwala określić takie nieprawidłowości genetyczne, jak choroba Tay-Sachsa, anemia sierpowatokrwinkowa, hemofilia, mukowiscydoza, spowodowane pewnymi zaburzeniami genów (mutacje).

Inne anomalie genetyczne są spowodowane nie obecnością genów mutacji, ale naruszeniem zachowania chromosomów podczas mejozy (zespół Downa), a mianowicie: brakiem dysjunkcji 21. lub 22. pary chromosomów podczas mejozy. Osoby cierpiące na tę chorobę wyróżniają się szeregiem charakterystycznych cech: upośledzeniem umysłowym, obecnością fałdu skórnego w kącikach oczu, krępą budową ciała i pogodą ducha.

Obecnie genetyka i medycyna dysponują techniką pozwalającą wykryć nieprawidłową liczbę chromosomów u płodu już w 16. tygodniu ciąży. W tym celu pobiera się próbkę płynu owodniowego przez nakłucie worka owodniowego, bada się jego komórki i ustala, czy występują w nich nieprawidłowości chromosomalne.

Ostatnio wielu badaczom udało się zmniejszyć częstość występowania niektórych chorób dziedzicznych u zwierząt laboratoryjnych. Daje to nadzieję, że z czasem możliwe będzie wykrywanie i leczenie niektórych chorób genetycznych człowieka już w fazie płodowej.

Anufriev Igor Iwanowicz pulmonolog - profesor nadzwyczajny Katedry Ftyzjologii i Pulmonologii Państwowego Uniwersytetu Medycznego w Rostowie, kierownik Katedry Pulmonologii Państwowego Uniwersytetu Medycznego w Rostowie.

Bokhanova Elena Grigorievna - Kierownik wydziału terapeutycznego, kandydat nauk medycznych, lekarz najwyższej kategorii, asystent na oddziale propedeutyki chorób wewnętrznych Państwowego Uniwersytetu Medycznego w Rostowie, pulmonolog.

Kirtanasova Ludmiła Nikołajewna jest pulmonologiem o najwyższej kategorii kwalifikacji.

Redaktor strony: Metoda badań cytologicznych: Turbeeva E.A.

***********************

Książka „Choroby układu oddechowego tom 1”. (Autor N.R. Paleeva).

Metoda cytologiczna zajmuje znaczące miejsce w diagnostyce chorób płuc. Liczne metody pozyskiwania materiału do badań cytologicznych można podzielić na dwie grupy:

• 1) umożliwiające badanie materiału z ogniska pierwotnego – oskrzela, płuca: badanie plwociny, materiału uzyskanego podczas bronchoskopii (w tym BAL), cewnikowania oskrzeli, nakłucia przezklatkowego, otwartej biopsji płuc (odciski fragmentu tkanki);
• 2) pozwalające ustalić rozprzestrzenianie się procesu patologicznego poza płuca: badanie płynu opłucnowego, osierdziowego, puchlinowego, nakłuć regionalnych (nakłucie podostrowe) i obwodowych węzłów chłonnych, materiał z ognisk przerzutowych w innych narządach.

Naukowo oparty system organizacji badań cytologicznych zakłada racjonalną taktykę (algorytm). Algorytm badania cytologicznego stanowi integralną część całego algorytmu diagnostycznego (patrz rozdział 30). Jej najważniejszymi zasadami są: priorytetowe stosowanie metod skutecznych i bezpiecznych, preferowanie badań jednorazowych kompleksowych, pozwalających na uzyskanie dokładnej diagnozy cytologicznej w jak najkrótszym czasie przy minimalnej liczbie próbek materiału, ciągłość informacji. Ponadto uwzględnia się specyfikę przebiegu procesu patologicznego i poziom sprzętu endoskopowego rentgenowskiego instytucji.

Niejednorodność elementów komórkowych oskrzeli i płuc, duża plastyczność nabłonka dróg oddechowych, różnorodność chorób płuc, częste przerzuty nowotworów złośliwych innych narządów do płuc i wreszcie zastosowanie ww. metody pozyskiwania materiału – wszystko to powoduje duże zróżnicowanie obrazu cytologicznego, którego prawidłowa ocena wymaga od klinicysty Cytologa szczególnego doświadczenia i wiedzy.

Biorąc pod uwagę specyfikę wzorców cytologicznych oraz poziom uzyskiwanych informacji, poniżej osobno omówiono badanie cytologiczne plwociny, BALF i materiału uzyskanego podczas biopsji.

BADANIE CYTOLOGICZNE plwociny

Analiza cytologiczna plwociny jest bardzo obiecująca, ponieważ jej skład komórkowy zwykle odzwierciedla cechy procesu patologicznego w oskrzelach i płucach, a w wielu przypadkach umożliwia wyjaśnienie diagnozy morfologicznej, od której zależy wybór i wyniki leczenia [Kazantseva V. M. , 1980; Klyukina L. B., Tulchinsky B. R., 1983].

Badanie cytologiczne plwociny nie wymaga dodatkowych interwencji instrumentalnych w celu uzyskania materiału; można go uzyskać wielokrotnie, bez trudności w dynamice choroby, zarówno w szpitalu, jak i ambulatoryjnie.

Powodzenie badania cytologicznego zależy przede wszystkim od przestrzegania zasad pobierania, transportu, przechowywania, przygotowania i przetwarzania plwociny.

Zaleca się pobieranie plwociny na czczo poprzez odkrztuszanie, po uprzednim trzykrotnym przepłukaniu jamy ustnej wodą, a następnie 1% roztworem ałunu glinowego. Poranna porcja plwociny najpełniej odzwierciedla jej skład komórkowy, ponieważ powstała wydzielina gromadzi się przez całą noc.

Plwocina jest niejednorodną lepką cieczą, w której elementy komórkowe są nierównomiernie rozmieszczone. Utrudnia to prowadzenie ilościowych badań cytologicznych, które wymagają równomiernego rozmieszczenia komórek w polach widzenia i ich zliczenia w stabilnych warunkach. W związku z tym przed badaniem konieczne jest ujednolicenie plwociny.

Jedną z powszechnych metod homogenizacji jest dodanie do plwociny 0,5% roztworu alkalicznego w stosunku 1:1, a następnie wytrząsanie przez 10-15 minut; następnie mieszaninę utrzymuje się w łaźni wodnej przez 30 minut w temperaturze 55–56°C. Jednak pod wpływem zasad i temperatury część komórek ulega zniszczeniu, co wpływa na wynik badania. Bardziej wskazane jest homogenizowanie plwociny poprzez dodanie 1-2,5% wodnego roztworu dimeksydu w stosunku 1:1.

Dimeksyd łatwo przenika do tkanek i zapewnia dobre zachowanie struktur komórkowych badanego materiału. Homogenizację można również przeprowadzić za pomocą strumienia powietrza, który jest doprowadzany z kompresora poprzez kaniulę do spluwaczki z pokrywką. Supernatant odrzuca się, a osad komórkowy wykorzystuje się w przygotowaniu do kolejnych badań cytologicznych.

Aby przygotować preparat natywnej plwociny, istotne jest rozprowadzenie osadu komórkowego na szkiełku. Należy wziąć taką ilość materiału, aby po nałożeniu szkła nakrywkowego osad komórkowy rozłożył się równomiernie, cienką warstwą i nie wystawał poza krawędzie szkła nakrywkowego. Jeśli preparaty nie zostaną natychmiast zbadane, to aby uniknąć wyschnięcia, umieszcza się je w wilgotnej komorze.

Celem badania cytologicznego preparatu plwociny natywnej jest wstępna ocena materiału. W rodzimych preparatach łatwo wykryć spirale Kurshmana, które czasami są widoczne gołym okiem. Są to zwinięta, błyszcząca nić centralna pokryta płaszczem z leukocytów, kolumnowych komórek nabłonkowych, kryształów Charcota-Leydena, których ze względu na jasny kolor należy szukać w ciemnych grudkach plwociny.

Aby plwocina wytworzyła się w postaci kryształów, konieczne jest jej przechowanie pod szkłem nakrywkowym, tj. bez dostępu powietrza, przez 24–48 godzin. Obecność kryształów zwykle koreluje ze zwiększoną zawartością eozynofilów w plwocinie.

Nekrotyczne kawałki płuc to skrawki ciemnej tkanki, w których pod mikroskopem wykrywa się strukturę pęcherzykową oraz obojętne wtrącenia, takie jak pył. Martwicza tkanka płuc jest charakterystyczna dla zakaźnego zniszczenia płuc (ropień, zgorzel).

Komórki atypowe, istotne w diagnostyce nowotworów, można wykryć także w preparatach natywnej plwociny.
Nabłonek płaski gardła i fałdów głosowych to komórki wielokątne, które są 10–15 razy większe niż białe krwinki.

Urzęsione komórki nabłonkowe, które dominują w drogach oddechowych, w preparatach natywnych mają wygląd komórek cylindrycznych lub sześciennych z brzegiem rzęsek; jądro, zwykle owalne, leży w przeciwnej (podstawnej) części komórki. W preparacie natywnym rozróżnienie leukocytów (neutrofili, limfocytów) jest prawie niemożliwe.

Wyjątkiem są eozynofile, które są ciemniejsze niż inne komórki ze względu na obecność w nich grubych granulek. Czerwone krwinki to zaokrąglone formacje zlokalizowane w pasmach śluzu. W plwocinie zawsze znajdują się prawie pojedyncze czerwone krwinki. Makrofagi płucne w preparacie natywnym są większe niż inne komórki i zawierają różne wtrącenia.

Włókna elastyczne znajdują się w plwocinie pacjentów z wyniszczającą gruźlicą, ropniem płuc i nowotworami złośliwymi. Aby je wykryć, konieczne jest dokładne zbadanie leku natywnego, najpierw pod małym, a następnie pod dużym powiększeniem. Na jasnym tle włókna elastyczne pojawiają się w ciemniejszym kolorze. Są to cienkie, karbowane nitki, które dobrze załamują światło.

Dodatkowe informacje można uzyskać z badania cytologicznego utrwalonych, zabarwionych preparatów plwociny.
Do probówki wirówkowej pobiera się 0,1 ml plwociny i z tej ilości sporządza się rozmazy na dwóch szkiełkach, a na jedną szkiełkę nanosi się 0,5 ml osadu, który równomiernie rozprowadza się poprzez przesuwanie szkieł względem siebie (grubość osad komórek na jednym szkle wynosi około 50 µm).

Powstały rozmaz suszy się, utrwala metanolem i barwi według Romanovsky-Giemsa. Komórki zlicza się pod mikroskopem przy powiększeniu 200 (okular 10, obiektyw 20) i 280 (okular 7, obiektyw 40).

Ponadto można zastosować metodę Pappenheima, błękit metylenowy i mieszaninę aureozyny. W barwionych preparatach badanej plwociny wykrywa się elementy komórkowe krwi (erytrocyty, leukocyty neutrofilowe, leukocyty eozynofilne, limfocyty), makrofagi oraz komórki nabłonka wielowarstwowego płaskiego i walcowatego.

Komórki wielowarstwowego nabłonka płaskiego jamy ustnej i gardła mają kształt wielokątny, stosunkowo małe, centralnie położone jądra i cytoplazmę oksyfilną. Komórki głębszych warstw mają kształt owalny lub okrągły; można je łatwo rozpoznać.

Pewne trudności w różnicowaniu elementów komórkowych pojawiają się w okresie rekonwalescencji klinicznej, na przykład u pacjentów z zapaleniem płuc. Mają wzrost komórek nabłonka oskrzeli, które utraciły rzęski i charakterystyczny cylindryczny kształt. Zjawisko to tłumaczy się złuszczaniem regenerującego się nabłonka oskrzeli, hiperplastycznego w wyniku procesu zapalnego.

Wielojądrzaste komórki nabłonkowe pojawiają się w plwocinie podczas przewlekłych procesów zapalnych w płucach na skutek podrażnienia nabłonka oskrzeli.

Podczas badania cytologicznego plwociny na szczególną uwagę zasługuje wykrycie komórek atypowych. Pozwala to nie tylko zasugerować nowotwór złośliwy, ale czasami ocenić jego typ histologiczny (więcej szczegółów w rozdziale 28.3).

Komórki atypowe mogą również występować w przewlekłych postaciach gruźlicy z wyraźną reakcją proliferacyjną tkanki, ale ogólnie występuje niewielka liczba elementów komórkowych charakterystycznych dla plwociny w gruźlicy. Rozpoznanie wymaga jednak wyjaśnienia w oparciu o dodatkowe badania.

Na preparatach utrwalonych czerwone krwinki mają postać żółtawych krążków o podwójnym konturze. Ich liczba jest niewielka i nie mają wartości diagnostycznej. Podczas krwioplucia występują duże ilości czerwonych krwinek.

Główną częścią leukocytów form komórkowych są neutrofile, które mają okrągły, rzadziej nieregularny kształt z ziarnistą protoplazmą i jądrem składającym się z kilku części.

W ostrym zapaleniu płuc i zaostrzeniu przewlekłego zapalenia oskrzeli obserwuje się zwiększoną liczbę form zwyrodnieniowych leukocytów i dużą zawartość makrofagów pęcherzykowych. Podczas procesów destrukcyjnych w płucach w plwocinie dominują formy zwyrodnieniowe neutrofili z fragmentacją jąder i zniszczeniem cytoplazmy. Oznaką korzystnego przebiegu procesu jest wzrost liczby pozostałych neutrofili na niezmienionym poziomie.

Wykrywanie eozynofilów wymaga specjalnego barwienia plwociny aureozyną lub błękitem eozyno-metylenowym, w którym jednolita ziarnistość tych komórek jest zabarwiona na czerwono. Eozynofile są rozmieszczone w plwocinie wyjątkowo nierównomiernie, dlatego w celu ich identyfikacji konieczne jest czasami zbadanie całej próbki. Granulocyty eozynofilowe wykrywa się częściej w plwocinie pacjentów z astmą oskrzelową, przewlekłym zapaleniem oskrzeli ze składnikiem astmatycznym.

Labocyty barwi się 1% alkoholowym roztworem błękitu toluidynowego. Ich obecność jest charakterystyczna dla plwociny pacjentów z astmą oskrzelową. Wraz z zaostrzeniem choroby zwraca uwagę degranulacja komórek tucznych z niewielką intensywnością koloru granulek.

Limfocyty Romanowskiego-Giemsy barwią się intensywnie ze względu na obecność w nich gęstej sieci chromatyny. Komórki mają okrągły kształt, mały brzeg protoplazmy o niebieskawym kolorze. Zwiększoną zawartość limfocytów obserwuje się u pacjentów z gruźlicą, przewlekłym zapaleniem oskrzeli ze znacznymi zmianami w nabłonku [Shlopov V. G. i in., 1986].

Makrofagi pęcherzykowe to duże komórki z mimośrodowo położonym jądrem i wakuolowaną cytoplazmą. Są wybarwione na kolor jasnoniebieski za pomocą azur-eozyny i zawierają różne wtrącenia. Ich liczba w plwocinie zmienia się w zależności od fazy procesu.

Z klinicznego punktu widzenia ważne jest określenie liczby komórek fagocytarnych i ich aktywności funkcjonalnej. Charakterystykę aktywności fagocytarnej makrofagów płucnych można wyrazić wskaźnikiem stosunku makrofagów, które fagocytowały uszkodzone leukocyty do całkowitej liczby makrofagów, a także określeniem żywotności makrofagów za pomocą dożylnego barwienia błękitem trypanu.

Metoda polega na identyfikacji martwych komórek za pomocą trypanu lub błękitu metylenowego. Plwocinę miesza się z 2,5% roztworem dimeksydu w stosunku 1:1, a następnie wiruje przez 10 minut przy 1500 obr./min. Do mikropipety pobiera się 0,01 ml zawiesiny komórek, liczy się całkowitą liczbę makrofagów w komorze Fuchsa-Rosenthala i określa w stosunku do nich procent martwych komórek.
Oznaczanie całkowitej liczby komórek w 1 ml plwociny przeprowadza się w komorach Goryaeva lub Fuchsa-Rosenthala za pomocą hemocytometru [Zhuravlev A.V., 1980].

Bardziej szczegółowa (ultrastrukturalna) analiza komórek plwociny wymaga zastosowania transmisyjnej i skaningowej mikroskopii elektronowej.

Diagnostyczny BAL zapewnia płukanie oskrzelowo-pęcherzykowe lub płyn do płukania oskrzelowo-pęcherzykowego (BALF) zawierający elementy komórkowe, białko i inne składniki. Stosunek całkowitej powierzchni pęcherzyków i oskrzeli poddanych płukaniu wynosi około 20:1, dlatego też dominującym składnikiem płukania oskrzelowo-pęcherzykowego jest wypłukana zawartość pęcherzyków. Podczas jednego zabiegu wypłukiwana jest zawartość około 106 pęcherzyków płucnych.

W zależności od celów badania BALF można ograniczyć do określenia liczby i rodzaju elementów komórkowych lub uzupełnić o wyjaśnienie ich ultrastruktury, aktywności funkcjonalnej oraz zastosowanie technik mających na celu identyfikację mikroorganizmów chorobotwórczych. Badanie BALF uzyskanego po odwirowaniu elementów komórkowych pozwala na oznaczenie zawartości Ig, enzymów, substancji biologicznie czynnych i innych składników.

Aby określić całkowitą liczbę komórek, po przefiltrowaniu przez gazę w celu usunięcia śluzu pobiera się 1-2 ml BALF. Liczbę komórek w 1 ml BALF zlicza się w hemocytometrze. Do pozostałych badań cytologicznych wykorzystuje się osad elementów komórkowych uzyskany poprzez odwirowanie w temperaturze +4°C.

Z wytrąconych komórek przygotowuje się rozmazy, które barwi się Romanovsky-Giemsą, hematoksyliną-eozyną lub innymi barwnikami i poddaje badaniu mikroskopowemu. Stosunek elementów komórkowych (makrofagi pęcherzykowe, limfocyty i neutrofile) ustala się na podstawie zliczenia 200-500 komórek.

Aby dokładniej rozróżnić małe formy makrofagów pęcherzykowych od dużych limfocytów, można zastosować specjalne techniki: neutralne barwienie na czerwono, określenie zdolności fagocytarnej komórek. Badanie ultrastruktury makrofagów pęcherzykowych i innych komórek pod mikroskopem elektronowym przeprowadza się po utrwaleniu elementów komórkowych w 1,25% aldehydzie glutarowym i przygotowaniu preparatów.

Ze względu na fakt, że objętość zasysanego BALF waha się od 30 do 80% w stosunku do objętości wstrzykniętego płynu i nie ma możliwości określenia stopnia rozcieńczenia zawartości pęcherzyków płucnych, określając bezwzględną zawartość białka i innych składników w 1 ml BALF ma stosunkowo niewielkie znaczenie.

Aby ujednolicić uzyskane wskaźniki, stosuje się stosunek substancji białkowych do albumin, który zawsze występuje w BALF. Albumina nie jest syntetyzowana ani niszczona w płucach, a jej masa cząsteczkowa mieści się w zakresie białek surowicy przenikających przez barierę krew-pęcherzyki.

Stosunek do albuminy pozwala ocenić, czy zawartość badanego składnika w BALF jest zwiększona czy zmniejszona w porównaniu ze stężeniem w surowicy krwi.

Dane BAL ocenia się, biorąc pod uwagę specyfikę techniki pobierania materiału i inne czynniki, które mogą mieć wpływ na skład komórkowy i inne składniki, domieszka elementów komórkowych oskrzeli jest zwykle większa w pierwszej porcji płynu BAL i maleje w drugiej i drugiej; trzeci!

Jednocześnie zawartość elementów komórkowych pęcherzyków płucnych jest w przybliżeniu identyczna we wszystkich częściach. Ogólnie przyjmuje się, że dokładniejsze zrozumienie składu komórek pęcherzykowych można uzyskać poprzez badanie nie pierwszej, ale kolejnych części BALF. Zwiększenie domieszki neutrofili pochodzenia oskrzelowego obserwuje się w obecności procesu zapalnego w drzewie oskrzelowym, szczególnie przy ropnym zapaleniu oskrzeli, co jest przeciwwskazaniem do diagnostyki BAL.

Wskaźniki cytologiczne przyjęte jako norma różnią się pewną zmiennością ze względu na różnice w metodach badawczych. Całkowita liczba komórek w 1 ml BALF wynosi około 0,5-10-106. Większą zawartość pierwiastków komórkowych obserwuje się u palaczy. Wśród komórek dominują makrofagi pęcherzykowe (93 ± 5%).

Znacznie rzadziej (7 ± 1%) stwierdza się limfocyty. Neutrofile są reprezentowane tylko przez pojedyncze komórki (mniej niż 1%). Inne elementy komórkowe (eozynofile, komórki tuczne itp.) są jeszcze rzadsze (0,1%).

Proporcja różnych typów limfocytów jest w przybliżeniu podobna do tej we krwi obwodowej: limfocyty T stanowią 73%, limfocyty B 7%, a limfocyty, które nie wchodzą w interakcję z odczynnikami używanymi do identyfikacji limfocytów T i B (komórki zerowe) 19% .

Możliwości diagnostyczne płynu BAL w chorobach płuc są w dużej mierze związane z badaniem składu komórkowego płynu BAL.
Badanie cytologiczne umożliwia rozpoznanie niektórych chorób płuc na podstawie wykrycia charakterystycznych elementów komórkowych. Do takich chorób zalicza się przede wszystkim histiocytozę X, w której w makrofagach pęcherzykowych tworzą się osobliwe wtręty - ciała X.

Wykrywanie tych wtrąceń możliwe jest poprzez badanie ultrastruktury makrofagów pęcherzykowych pod mikroskopem elektronowym oraz metodą immunofluorescencyjną z przeciwciałami monoklonalnymi przeciwko antygenowi Te. Wtrącenia są mniej wyraźnie identyfikowane podczas barwienia preparatów hematoksyliną-eozyną. Nowotworowe uszkodzenie płuc można zdiagnozować poprzez identyfikację komórek nowotworowych w BALF, często zlokalizowanych w grupach w postaci kompleksów.

Pewną rolę w wyjaśnieniu rodzaju patologii odgrywa wykrycie makrofagów pęcherzykowych z nagromadzeniem hemosyderyny, czyli syderofagów charakterystycznych dla hemosyderozy płucnej lub makrofagów pęcherzykowych z inkluzjami białkowymi obserwowanymi w proteinozie.

Biorąc jednak pod uwagę, że podobne komórki, w szczególności syderofagi, można wykryć w innych chorobach (zespół Goodpasture'a itp.), należy uznać, że taki obraz cytologiczny nie może służyć jako podstawa do wyjaśnienia diagnozy, a jedynie ma charakter poglądowy. przybliżona wartość.

Stosunkowo często BAL jest metodą uzyskiwania informacji o charakterze i stopniu aktywności procesu patologicznego w płucach w różnych postaciach zapalenia pęcherzyków płucnych. Na podstawie porównania danych z badania składu komórkowego BALF i wyników badania histologicznego ustalono, że stosunek elementów komórkowych w BALF i tkance śródmiąższowej płuc jest prawie identyczny.

Badanie cytologiczne BALF przeprowadza się z uwzględnieniem dwóch głównych typów zapalenia pęcherzyków płucnych leżących u podstaw procesów rozsianych - neutrofilowego i limfocytowego. Cytologiczne objawy zapalenia pęcherzyków płucnych typu neutrofilowego, obserwowane w idiopatycznym włókniejącym zapaleniu pęcherzyków płucnych, pylicy azbestowej i innych chorobach, to wzrost liczby makrofagów pęcherzykowych i neutrofili.

Limfocytowe zapalenie pęcherzyków płucnych, któremu towarzyszy powstawanie ziarniniaków i rozwija się w chorobach takich jak sarkoidoza, egzogenne alergiczne zapalenie pęcherzyków płucnych itp., objawia się wzrostem liczby makrofagów pęcherzykowych i limfocytów. W niektórych chorobach płuc wartość diagnostyczną ma identyfikacja podtypów limfocytów, które biorą najbardziej aktywny udział w rozwoju limfocytowego zapalenia pęcherzyków płucnych.

Tymi podtypami w sarkoidozie są limfocyty T4 (pomocnicze), a w egzogennym alergicznym zapaleniu pęcherzyków płucnych – limfocyty Tg (supresory).

Oprócz wyjaśnienia postaci zapalenia pęcherzyków płucnych badanie cytologiczne BALF pozwala na ocenę stopnia aktywności tego procesu i pozwala przewidzieć przebieg choroby. Aktywność pęcherzyków płucnych jest zwykle proporcjonalna do wzrostu liczby neutrofili lub limfocytów.

Do niekorzystnych objawów prognostycznych należy utrzymujący się obraz cytologiczny BALF z dużą zawartością odpowiednich komórek, wskazujący na dużą aktywność procesu rozsianego. Jednak pojedyncze badanie zwykle nie wystarcza, aby wyciągnąć wnioski dotyczące rokowania choroby.

Dopiero ocena porównawcza cytologicznych cech działania w powtarzanych płynach BAL na tle prowadzonej terapii pozwala ocenić tendencję do progresji lub stabilizacji procesu.

Około jedna trzecia pacjentów z procesami rozsianymi nie ma charakterystycznych zmian w składzie komórkowym BALF.
Diagnostyczny BAL można wykorzystać do identyfikacji czynnika wywołującego infekcyjny proces zapalny w płucach, głównie w celu wykrycia mikroorganizmów powodujących rozwój tzw. infekcji oportunistycznej u pacjentów z niedoborami odporności. Metody badań mikrobiologicznych opisano w rozdziale 24.

BADANIE CYTOLOGICZNE MATERIAŁU UZYSKANEGO Z BIOPSJI.

Prawidłowa ocena danych z badania cytologicznego materiału uzyskanego podczas biopsji wymaga uwzględnienia niektórych szczegółów metod jej pobrania (patrz rozdział 22).

Podczas bronchoskopii pobierany jest materiał w postaci rozmazów, zeskrobin pędzlem z dotkniętego obszaru, aspiratów treści oskrzelowej, BALF, nakłuć przezoskrzelowych oraz wycisków fragmentu tkanki pobranej podczas biopsji. Pobieranie aspiratów i rozmazów jest metodą najmniej inwazyjną, pozwalającą na badanie powierzchownych obszarów błony śluzowej oskrzeli i form patologicznych.

Podczas badania rozmazów wynik negatywny czasami wynika z faktu, że z powierzchni ogniska patologicznego można uzyskać jedynie masy martwicze. Aby przeanalizować głębsze obszary obszaru podejrzanego o uszkodzenie oskrzeli, wykonuje się skrobanie za pomocą pędzla, a w przypadku okołooskrzelowej lokalizacji procesu patologicznego (na przykład guza) wykonuje się nakłucie przezoskrzelowe.

Badanie odcisków fragmentu tkanki pobranej podczas bronchoskopii zwiększa skuteczność diagnostyki morfologicznej wielu chorób. Wykazano większą zawartość informacyjną badania cytologicznego, jeśli bronchoskopię wykonuje się w znieczuleniu ogólnym.

Cewnikowanie oskrzeli można przeprowadzić podczas bronchoskopii i bez niej (donosowo w znieczuleniu miejscowym; przy tym drugim, dla najlepszego zachowania komórek, nie należy stosować wodnych roztworów środków znieczulających). Obie metody mają podobny charakter uzyskanego materiału. Zamiast zwykłej aspiracji zawartości zaleca się traumatyzację dotkniętego obszaru metalowym sznurkiem, kablem lub nylonową szczoteczką.

Racjonalne jest uzyskanie w trakcie jednego badania co najmniej trzech próbek materiału. W momencie usunięcia cewnika nie wykonuje się aspiracji, ponieważ materiał z ogniska patologicznego w płucach jest rozcieńczany wydzieliną oskrzelową, co utrudnia badanie mikroskopowe.

Głównym warunkiem udanego cewnikowania jest zgodność średnicy cewnika i oskrzela; cewnikowanie staje się niemożliwe w ogniskach patologicznych ograniczonych do uszkodzenia oskrzeli 5-6 rzędu.

Zaletą metod instrumentalnych jest to, że pozwalają na ukierunkowane badanie materiału z niemal dowolnej części płuc, czyli dostarczają informacji o lokalizacji procesu patologicznego. W odróżnieniu od plwociny i BALF materiał biopsyjny charakteryzuje się lepszą konserwacją, większą koncentracją komórek na jednostkę powierzchni szkiełka oraz brakiem domieszek komórek z jamy ustnej. Pod tym względem mikroskopia wymaga mniej czasu, co jest ważne przy badaniu pacjentów w warunkach badania klinicznego.

Przygotowane rozmazy suszy się na powietrzu, barwi mieszaninami aureozyny (wg Leishmana, Pappenheima, Romanovsky'ego - Giemso) lub hematoksyliną-eozyną. W razie potrzeby stosuje się specjalne plamy do śluzu, tłuszczu, żelaza, prątków gruźlicy (Ziehl-Nielsen), różnych bakterii, grzybów (srebro metenaminy, Gram) itp.

Aby prawidłowo ocenić zmiany w obrazie cytologicznym w różnych chorobach płuc, konieczne jest dokładne zrozumienie danych wyjściowych - cech cytologicznych komórek nabłonkowych i nienabłonkowych w materiale biopsyjnym (charakterystyka morfologiczna komórek układu oddechowego w rozdz. 1).

Komórki nabłonkowe są w nim reprezentowane przez komórki wielorzędowego cylindrycznego (pryzmatycznego) nabłonka oskrzeli, jednorzędowego prostopadłościennego nabłonka oskrzelików (komórki Clara) i nabłonka pęcherzykowego (oddechowego).

Znacznie rzadziej w biopsji stwierdza się nabłonek walcowaty błony śluzowej nosa, gardła, tchawicy, a także wielowarstwowy nabłonek płaski nierogowaciejący błony śluzowej jamy ustnej, migdałków, nosogardła, krtani, nagłośni i strun głosowych materiał (patrz sekcja 28.1).

W nabłonku oskrzeli występują trzy typy komórek: cylindryczne, rzęskowe, kubkowe i podstawne. W zależności od umiejscowienia na szkle, komórki rzęskowe mogą mieć kształt trójkątny, okrągły lub nieregularny. Kiedy cylindryczne komórki ułożone są w skupiska prostopadle do szkła, ujawniają się struktury siatkowe przypominające plaster miodu, w komórkach których widoczne są okrągłe jądra.

Komórki warstwy zarodkowej nabłonka (tzw. podstawnej) w materiale instrumentalnym wykrywa się, gdy głębokie warstwy błony śluzowej oskrzeli ulegają mechanicznemu uszkodzeniu podczas skrobania pędzlem. Te małe (w przybliżeniu wielkości leukocytu), jednolite, okrągłe i wielokątne komórki, ze stosunkowo dużym, centralnie położonym hiperchromicznym jądrem i wąskim, ledwo zauważalnym obrzeżem cytoplazmy, są czasami widoczne w tym samym skupisku z komórkami rzęskowymi.

Prostopadłościenne komórki nabłonkowe oskrzelików można rozpoznać po ich charakterystycznym ułożeniu w postaci rzędu palisadowego; typowe jest jądro pęcherzykowe z małym jąderkiem i lekką jednorodną cytoplazmą.

Komórki nabłonka pęcherzyków płucnych (pneumocyty typu I i II) zwykle nie są identyfikowane jako takie. W rozmazach „gubią się” w grupie sześciennych komórek nabłonkowych różnego pochodzenia (izolowane komórki nabłonka oskrzelików, komórki, które utraciły rzęski i część cytoplazmy nabłonka cylindrycznego).

Komórki nienabłonkowe (histiocyty, pęcherzykowe, makrofagi, leukocyty, komórki plazmatyczne, monocyty, komórki tuczne, erytrocyty, megakariocyty), a także struktury nienabłonkowe (śluz, spirale Courshmana, kryształy Charcota-Leydena, kryształy cholesterolu w kształcie igieł, bezpostaciowe masy wapienne, ciała azbestowe) opisano w rozdziale 28.1.

Ocena zmian ujawnionych w badaniu cytologicznym materiału instrumentalnego odbywa się z uwzględnieniem Międzynarodowej Klasyfikacji Histologicznej Guzów Płuca (WHO, wyd. 2, 1981), klasyfikacji cytologicznej zmian w płucach (CMEA, 1983), klasyfikacji chorób i stanów patologicznych układu oskrzelowo-płucnego („Podręcznik pulmonologii”, pod redakcją N.V. Putova, G.B. Fedoseeva, A.G. Khomenko, 1987).

W różnych chorobach płuc związanych z patogenami biologicznymi, narażeniem na czynniki chemiczne, fizyczne, nowotwory itp. dochodzi do zespołu stereotypowych zmian reaktywnych, obejmujących rozrost, metaplazję płaskonabłonkową i zwyrodnienie komórek nabłonkowych (patrz także rozdział 2).

Choć zmiany te nie mogą stanowić podstawy do weryfikacji konkretnej choroby płuc, ich prawidłowa ocena pozwala wyeliminować błędy diagnostyczne, a w niektórych przypadkach może stać się wyznacznikiem interpretacji danych klinicznych i pozwolić na wybór racjonalnej taktyki badania i monitorowania. pacjenci.

Hiperplazja komórek cylindrycznych i kubkowych. Manifestuje się wzrostem liczby i objętości odpowiednich elementów. Często obserwowany w przewlekłym zapaleniu oskrzeli, rozstrzeniach oskrzeli, astmie oskrzelowej, rzadziej w chorobach wirusowych i innych chorobach płuc. O hiperplazji komórek rzęskowych świadczy wzrost wielkości komórek, jąder, jąderek w rozmazach, pojawienie się komórek dwu-, trój- i wielojądrzastych oraz nagromadzenie brodawek.

Te ostatnie powstają z tego samego typu okrągłych komórek z hiperchromatycznymi jądrami i są częściowo lub całkowicie pokryte sześciennym (cylindrycznym) nabłonkiem; w poszczególnych komórkach znajduje się granica naskórka i rzęski. Oznaką hiperplazji jest także wzrost liczby mitoz.

Pojawienie się dużej liczby wielojądrzastych komórek nabłonka oskrzeli z wieloma podobnymi jądrami (do 20), dużymi jąderkami i zasadochłonną cytoplazmą uważa się za oznakę „podrażnienia” błony śluzowej oskrzeli, na przykład po wielokrotnej bronchoskopii.

Na rozrost komórek kubkowych wskazuje wzrost ich liczby, pojawienie się skupisk i objawy podobne do przerostu komórek rzęskowych.

Występuje rozrost komórek rzęskowych i kubkowych z łagodną, ​​umiarkowaną lub ciężką atypią. W rozroście z łagodną atypią normalny stosunek jądrowo-cytoplazmatyczny jest zachowany w powiększonych komórkach, a chromatyna jest jednolicie drobnoziarnista.

W hiperplazji z umiarkowaną atypią zwiększa się stosunek jądrowo-cytoplazmatyczny w poszczególnych komórkach, pojawiają się komórki z hiperchromatycznymi jądrami i powiększonymi jąderkami, chromatyna jest równomiernie drobnoziarnista, a kontury błony jądrowej są gładkie.

Rozrost nabłonka z ciężką atypią (obecnie zmiany takie częściej nazywane są ciężką dysplazją nabłonka) charakteryzuje się zmiennością wielkości komórek i jąder, stosunkiem jądrowo-cytoplazmatycznym z wyraźną tendencją do zwiększania się tego ostatniego, a także pojawieniem się duże jądra hiperchromiczne, czasem z pogrubioną błoną jądrową, nierównomierne rozmieszczenie grubej chromatyny, powiększenie jąder.

W niektórych przypadkach ocena izolowanych komórek cylindrycznych z cechami atypii jest trudna. Ich lokalizacja wśród niezmienionych komórek nabłonka rzęskowego powinna budzić niepokój w przypadku nowotworu. Nienowotworowy charakter komórek staje się oczywisty, jeśli prześledzi się ich połączenie z nabłonkiem rzęskowym lub jeśli zostaną znalezione w nich rzęski i (lub) granica naskórka.

Czasami w komórce wielojądrowej nakładanie się jąder na siebie prowadzi do powstania hiperchromicznego konglomeratu, podobnego do brzydkiego jądra komórki nowotworowej. Jednolite wybarwienie jąder, ze względu na nierozróżnialną strukturę chromatyny, ich jednorodność, brak grup, skupień i izolację komórek, przemawiają przeciwko rozpoznaniu nowotworu.

Szczególne trudności pojawiają się w diagnostyce różnicowej brodawkowatych nagromadzeń nabłonka (z cechami ciężkiej atypii) i kompleksów brodawkowatych dobrze zróżnicowanego gruczolakoraka. Dowodami przemawiającymi za rozrostem nabłonka jest wyraźne zachowanie komórek, przewaga ciemnych jąder o gładkich konturach, połączenie komórek cylindrycznych i kubkowych w jednym skupisku, obecność na obrzeżach skupisk rzędów komórek cylindrycznych, czasami z kutykulą granica i rzęski, brak skupisk komórek satelitarnych, masy martwicze wokół, nawarstwianie się komórek, ostry polimorfizm jąder.

Hiperplazja komórek podstawnych. Częściej występuje przy przewlekłych chorobach płuc (infekcje bakteryjne i grzybicze, rozstrzenie oskrzeli, gruźlica). W rozmazach widoczne są nagromadzenia komórek podstawnych przy owrzodzeniu błony śluzowej oskrzeli lub przy stosowaniu inwazyjnych metod instrumentalnych w celu uzyskania materiału (zeskrobywanie pędzlem, odciski biopsji).

Skupiska zwarto rozmieszczonych małych komórek ze stosunkowo dużymi hiperchromicznymi, często ciemnymi (o nierozróżnialnej strukturze chromatyny) jądrami i „fasetami” na sąsiadujących powierzchniach cytoplazmatycznych przypominają kompleksy występujące w raku drobnokomórkowym.

O hiperplazji komórek podstawnych świadczy jednakowa wielkość i kształt komórek i jąder, równy kontur błony jądrowej, intensywnie ciemne zabarwienie jąder i bazofilia cytoplazmy, obecność skupisk pojedynczych kolumnowych komórek nabłonkowych na obwodzie, czasami z zachowanymi rzęskami, wyraźniejszą zwartością komórek w skupiskach i brakiem komórek - satelitów (w przypadku raka komórki często są luźno rozmieszczone i istnieje tendencja do oddzielania się zewnętrznych warstw od kompleksu).

Rozrost komórek nabłonkowych oskrzelików i pęcherzyków płucnych.

Obserwuje się go w przewlekłych chorobach płuc, zwłaszcza w obszarach włókniakowatości połączonej ze stanem zapalnym, w okolicach blizny. Spłaszczone komórki pęcherzykowe zostają zastąpione sześciennymi (metaplazja pęcherzykowa), nabłonek oskrzelików staje się wielorzędowy, a czasami z komórek sześciennych powstają małe brodawki.

W rozmazach, częściej w materiale uzyskanym w wyniku cewnikowania oskrzeli obwodowych, hiperplastyczne komórki oskrzelików i pęcherzyków płucnych z pewnym prawdopodobieństwem obejmują komórki sześcienne ułożone w jednym rzędzie w kształcie palisady, czasem małe grupy komórek okrągłych z mimośrodowo położonym jądrem i obfite jasna, wyraźnie zarysowana cytoplazma.

W przypadku rozrostu nabłonka z ciężką atypią (polimorfizm komórek sześciennych, hiperchromatoza jądrowa) grupy i skupiska są trudne do odróżnienia od kompleksów komórek raka oskrzelowo-pęcherzykowego. Hiperplazja charakteryzuje się rzadkimi skupiskami, które różnią się znacznie liczbą zawartych w nich komórek, niewielkimi wahaniami wielkości i kształtu jąder, licznymi zaokrąglonymi ciemnymi jądrami, gładkimi konturami błony jądrowej; brak komórek wielojądrzastych i komórek satelitarnych wzdłuż obrzeży klastrów.

W przypadku raka obraz jest inny: liczne kompleksy tego samego typu, w tym niewielka liczba komórek; oddzielenie komórek marginalnych; większy polimorfizm jądrowy, nierówny kontur otoczki jądrowej, komórki dwu- i wielojądrowe, duże jąderka.

Podstawą metaplazji płaskonabłonkowej nabłonka oskrzeli jest zastąpienie wielorzędowego cylindrycznego nabłonka rzęskowego nabłonkiem wielowarstwowym płaskim poprzez etap zmian przejściowych (metaplazja przejściowa), kiedy pogrubiona warstwa nabłonkowa składa się z kilku warstw sześciennych, wielokątnych komórek, pozbawionych rzęsek i brzeg naskórka.

Częstość występowania metaplazji płaskonabłonkowej jest szczególnie wysoka wśród nałogowych palaczy w wieku powyżej 50 lat. Przewlekłe choroby płuc przyczyniają się do rozwoju metaplazji płaskonabłonkowej.

Głównym objawem cytologicznym metaplazji komórek rzęskowych jest utrata charakterystycznego cylindrycznego kształtu (komórki stają się okrągłe, owalne, wielokątne). Są zwykle większe niż komórki podstawne, ale mniejsze niż komórki nabłonka płaskiego błony śluzowej jamy ustnej.

Jądra są stosunkowo duże, okrągłe, o gładkich konturach i jednolicie drobnoziarnistej chromatynie, zawierające pojedyncze jąderka. Cytoplazma ma wyraźne kontury, półprzezroczysta, bazofilna, czasem oksyfilowa, bardziej wyraźna niż w komórkach podstawnych.

Komórki metaplastyczne występują pojedynczo lub w skupiskach. Czasami w jednym skupisku widoczne są komórki cylindryczne i metaplastyczne. Metaplazja jest wskazywana przez spłaszczoną krawędź w skupisku komórek kolumnowych. Przy małych rozmiarach tzw. małe komórki metaplastyczne mają kształt elipsoidalny lub owalny, wyraźnie zarysowaną kwasochłonną cytoplazmę i ciemne jądra.

Stosunek jądrowo-cytoplazmatyczny jest wyższy niż w komórkach cylindrycznych. Komórki znajdują się obok siebie w małych grupach, każde jądro jest „starannie” zlokalizowane w centrum cytoplazmy.

Różnią się od komórek raka płaskonabłonkowego minimalną zmiennością wielkości i kształtu jąder i cytoplazmy, zwłaszcza w obrębie tego samego skupiska, brakiem rozwarstwienia jąder, gładkimi konturami jąder i cytoplazmy, bardziej wyraźną cytoplazmą (różnica od małych rak komórkowy), brak dużych, brzydkich komórek (różnica od raka płaskonabłonkowego).

W badaniu cytologicznym istotna jest ocena stopnia atypii komórek metaplastycznych. Przy łagodnej atypii obserwuje się niewielki wzrost stosunku jądrowo-cytoplazmatycznego w poszczególnych komórkach; zachowana jest jednorodność większości komórek i jąder metaplastycznych.

Przy umiarkowanej atypii wzrasta polimorfizm i hiperchromatoza jądrowa, ale kontury jąder są przeważnie gładkie, a stosunek jądrowo-cytoplazmatyczny jest niższy niż w przypadku raka. W przypadku ciężkiej atypii (takie zmiany są obecnie określane jako ciężka dysplazja nabłonkowa), w wielu komórkach stosunek jądrowo-cytoplazmatyczny gwałtownie wzrasta, wzrasta polimorfizm (ryc. 28.1, a), liczba jąder z gruboziarnistą chromatyną, skupiska z warstwami widocznych jąder, jest szczególnie trudny do odróżnienia od kompleksów raka płaskonabłonkowego.

W przeciwieństwie do raka w skupiskach komórek metaplastycznych, jądra, jąderka i ziarna chromatyny mają gładkie kontury, charakterystyczne są ciemne jądra z nierozróżnialną strukturą chromatyny, brak wielojądrowych i gigantycznych dziwacznych komórek, a oznaki keratynizacji są rzadsze. W przypadku raka widoczne są izolowane komórki nowotworowe wraz z kompleksami; ze względu na silniejsze połączenia międzykomórkowe izolowane komórki metaplastyczne z cechami atypii są rzadkie.

Podczas analizy materiału instrumentalnego prawidłowa ocena cytogramu może być utrudniona (choć rzadziej niż przy badaniu plwociny) ze względu na zmiany dystroficzne i autolityczne w komórkach. W komórkach cylindrycznych częstymi objawami dystrofii są utrata rzęsek i zniszczenie brzegów naskórka, wakuolizacja i zmniejszenie intensywności koloru

rozmyte kontury lub całkowite zniszczenie cytoplazmy, pojawienie się „nagich” jąder. Czasami wręcz przeciwnie, cytoplazma wygląda na nieprzezroczystą i ma kolor oksyfilny. W jądrach struktura chromatyny jest często zaburzona - widoczna jest wielkopętlowa sieć polimorficznych gruboziarnistych grudek, piknoza, rzadziej - wakuolizacja, reksja, liza).

Specyficzną postacią dystrofii komórek nabłonka oskrzeli jest ciliocytophthoria (termin zaproponowany przez Papanicolau G. N., 1963). W tym przypadku dystalna część cytoplazmy komórki rzęskowej odrywa się i tworzy bezjądrową „kępkę” rzęskową.

Pozostała zaokrąglona część cytoplazmy zawiera jądro, które często ulega zmianom przypominającym reksję. Ciliocytoforię częściej obserwuje się w przypadku chorób wirusowych, ale czasami w przypadku raka i innych zmian w płucach.

Zniszczenie cytoplazmy w hiperplastycznych komórkach nabłonkowych prowadzi do pojawienia się dużych „nagich” jąder i jąder z małym obrzeżem cytoplazmy. W przypadku ciężkiej atypii jąder stwierdza się nagromadzenia komórkowe podobne do kompleksów zmienionych dystroficznie komórek nowotworowych.

Aby wykluczyć błędy związane ze zmianami dystroficznymi i autolitycznymi w nabłonku oskrzeli, należy przestrzegać zasady: twierdzenie o określonej chorobie płuc nie może opierać się na wykryciu „nagich” jąder lub nagromadzeń komórek nabłonkowych o niewyraźnych konturach jądra i cytoplazma; w takich przypadkach wskazane jest powtórzenie badania.

W ostrych chorobach zapalnych (zapalenie oskrzeli, zapalenie płuc, ropień) w materiale uzyskanym za pomocą instrumentów często stwierdza się ropny wysięk składający się z mieszaniny nitkowatych lub amorficznych mas martwiczych, zakonserwowanych lub zniszczonych leukocytów wielojądrzastych; W nabłonku rozwijają się zmiany reaktywne, symulujące nowotwór w obecności ciężkiej atypii, a w niektórych przypadkach powodujące błędne rozpoznanie cytologiczne raka płuc (patrz poniżej). Czasami proces zapalny maskuje guz.

W przewlekłych chorobach zapalnych (przewlekłe zapalenie oskrzeli, zapalenie płuc, ropień) w rozmazach stwierdza się komórki nacieku zapalnego (leukocyty wielojądrzaste, limfocyty, monocyty, plazmocyty, makrofagi, histiocyty) oraz złuszczone komórki nabłonka oskrzeli, często z wyraźnymi zmianami odczynowymi. kombinacje.

Rozrost komórek kubkowych jest zwykle pośrednim objawem przewlekłego zapalenia oskrzeli, zwłaszcza rozstrzeni oskrzeli. Wraz z zaostrzeniem procesu zapalnego w rozmazach wzrasta liczba leukocytów wielojądrzastych i złuszczonych komórek nabłonkowych, a liczba makrofagów maleje; Podczas powrotu do zdrowia i remisji obserwuje się odwrotną tendencję.

Podstawą diagnostyki cytologicznej gruźlicy jest wykrycie prątków gruźlicy w materiale uzyskanym instrumentalnie, z mniejszym stopniem pewności – obecność komórek nabłonkowych i olbrzymich wielojądrowych komórek Pirogowa-Langhansa, mas martwiczych (guzowatych).

Sarkoidoza charakteryzuje się tworzeniem się ziarniniaków sarkoidalnych w tkance. W preparatach cytologicznych komórki olbrzymie nabłonkowate i wielojądrzaste nie wykazują cech patognomonicznych dla sarkoidozy, dlatego na podstawie samego badania cytologicznego zwykle nie da się odróżnić gruźlicy od sarkoidozy.

Jednak w wielu przypadkach, biorąc pod uwagę kliniczne dane radiologiczne i laboratoryjne, wyniki badania cytologicznego można interpretować jako dane wskazujące na gruźlicę lub sarkoidozę.

Sarkoidozę charakteryzuje:

• 1) większe zróżnicowanie jąder i cytoplazmy komórek nabłonkowych pod względem kształtu i wielkości z obecnością „typowych” komórek nabłonkowych oraz elementów przypominających histiocyty i monocyty;
• 2) obfita jasna cytoplazma o wyraźnych konturach i wyższym stężeniu substancji PAS-dodatnich w komórkach nabłonkowych;
• 3) bardziej wyraźna zmienność kształtu i wielkości jąder komórek wielojądrzastych oraz ich umiejscowienie nie tylko wzdłuż obwodu, ale także w centralnych częściach cytoplazmy (przejawia się to obecnością dwóch typów komórek olbrzymich, przypominających kształt i położenie jąder „typowych” komórek Pirogova-Langhansa i komórek obcych tel);
• 4) sporadyczna obecność blaszkowatych wtrąceń krystalicznych (ciał Schaumanna) w cytoplazmie komórek olbrzymich;
• 5) brak szczątków serowatych w rozmazach („czyste” tło rozmazu).

Czasami w materiale oskrzeli wraz z elementami ziarniniaka gruźliczego lub sarkoidalnego stwierdza się nagromadzenie komórek nabłonkowych przypominających komórki nowotworowe. W sarkoidozie takie nagromadzenia są często fragmentami reaktywnie zmienionego nabłonka. Oceniając takie kumulacje u chorych na gruźlicę, należy pamiętać o częstym współistnieniu gruźlicy i raka płuc.

Niekiedy w rozpoznaniu twardzika pomaga badanie cytologiczne materiału pobranego z okolicy rozwidlenia tchawicy, którego podstawą rozpoznania cytologicznego jest wykrycie w rozmazie komórek Mikulicza, dużych (o średnicy 50-60 µm, niektóre do do 100-200 µm), okrągłe, owalne lub o nieregularnym kształcie, z lekko wakuolowaną cytoplazmą.

Liczne małe wakuole (o średnicy 1-5 µm) w większości komórek nadają cytoplazmie pienisty wygląd (cytoplazma w kształcie plastra miodu), ale może zawierać także jedną dużą (o średnicy do 20 µm) wakuolę.

Jądra są stosunkowo małe, okrągłe, a struktura chromatyny jest drobno grudkowata. Często jądra są pyknotyczne i położone mimośrodowo; Widoczne 1-2 jąderka.

Aby ustalić rozpoznanie twardzina, ważne jest zidentyfikowanie fuksynofilowych kulek szklistych (ciałek Roussella). W cytoplazmie komórek Mikulicza czasami widoczne są bakterie Frischa-Volkovicha. W materiale z oskrzeli zwykle stwierdza się ciężką dysplazję nabłonka płaskiego walcowatego i metaplastycznego.

W wirusowych chorobach płuc cechy obrazu cytologicznego wynikają z bezpośredniego cytopatogennego działania wirusa i reakcji dotkniętej tkanki (głównie nabłonka błony śluzowej). Działanie cytopatogenne objawia się zwyrodnieniem komórek, osłabieniem połączeń międzykomórkowych, dysocjacją i złuszczaniem komórek nabłonkowych błony śluzowej oskrzeli oraz gromadzeniem się makrofagów pęcherzykowych w świetle pęcherzyków płucnych.

Zmiany dystroficzne wyrażają się w ciliocytofthoria. Pojawienie się w cytoplazmie wtrętów zasadochłonnych (mikrokolonie wirusa i RNA dotkniętej komórki) lub dużych wtrętów oksyfilowych (eozynofilowych, fuksynofilowych) otoczonych jasną obwódką odzwierciedla częściową (lokalną) strefę zwyrodnienia. W jądrze obserwuje się także inkluzje bazofilowe i oksyfilowe. Odpowiedź nabłonkowa na cytopatogenne działanie wirusa objawia się wzmożonymi procesami regeneracji wewnątrzkomórkowej i proliferacją komórek nabłonkowych.

Wykrycie wymienionych zmian komórkowych w rozmazie pomaga zasugerować wirusowy charakter choroby. Cechy obrazu cytologicznego w połączeniu z danymi klinicznymi mogą z grubsza wskazywać podtyp wirusa, który go spowodował (grypa, paragrypa, syncytialny układ oddechowy, wirus cytomegalii, infekcja adenowirusem itp.).

W szczególności w przypadku zapalenia tchawicy i oskrzeli i zapalenia płuc wywołanego wirusem opryszczki pospolitej wielojądrzaste komórki olbrzymie pojawiają się w rozmazach (ryc. 28.1, b) z powiększonymi jądrami, które wyglądają jak szkiełko zegarkowe (hipochromiczna część środkowa z rozmytymi granulkami chromatyny i ciemniejszą , wyraźny zarys); Ze względu na wzajemne ciśnienie sąsiadujące powierzchnie jąder są często przystające. Czasami w jądrze widoczne są duże wtrącenia oksyfilowe. Takie jądra mogą symulować jądra komórek nowotworowych.

W przypadku podejrzenia raka płuc należy przestrzegać poniższych zasad mikroskopii. W pierwszej kolejności wyszukują komórki nabłonkowe wykazujące oznaki złośliwości, za które należy uznać każdy polimorficzny objaw atypii (polimorfizm komórek, jąderek, zlepków chromatyny pod względem kształtu i wielkości, a także stopień wybarwienia jądra, jego kontur, jądro -stosunek cytoplazmatyczny itp.).

Obecność zespołu objawów złośliwości w komórkach nabłonkowych umożliwia ustalenie cytologicznej diagnozy raka.
Na podstawie oceny częstości i nasilenia komórkowych, strukturalnych i funkcjonalnych objawów różnicowania określa się kształt i stopień zróżnicowania guza.

Wysoko zróżnicowane warianty raka płaskonabłonkowego i gruczołowego (rak płaskonabłonkowy z irygacją, gruczolakorak dobrze zróżnicowany), rak drobnokomórkowy charakteryzują się wysoce informacyjnymi objawami cytologicznymi, co zapewnia wiarygodną weryfikację rozpoznania.

Mniej zróżnicowane warianty raka płaskonabłonkowego i gruczolakoraka (rak płaskonabłonkowy bez rogowacenia i o niskim stopniu zróżnicowania, gruczolakorak o umiarkowanym i niskim stopniu zróżnicowania) oraz niezróżnicowany rak wielkokomórkowy są weryfikowane cytologicznie jedynie w materiale biopsyjnym i tylko w formie domniemanej.

Rak płaskonabłonkowy z rogowaceniem (wariant wysoce zróżnicowany) ma charakterystyczny obraz: większość oznak różnicowania komórek płaskonabłonkowych jest wyraźnie wyrażona. Ponadto ostry polimorfizm komórek (okrągły, wielokątny, dziwnie ukształtowany w kształcie rakiety, wstążki, elipsy, kijanki; mały, duży, gigantyczny), polimorfizm jąder hiperchromicznych z nierównomiernym rozkładem grubej chromatyny są bardzo pouczające; wielojądrowość, stosunkowo niski stosunek jądrowo-cytoplazmatyczny, brak jąderek w większości jąder.

W raku płaskonabłonkowym bez rogowacenia (ryc. 28.1, e) (wariant umiarkowanie zróżnicowany) dominują duże, okrągłe i wielokątne komórki nowotworowe z dużymi centralnie położonymi jądrami zawierającymi powiększone jąderka o nieregularnym kształcie i wąskim obrzeżem cytoplazmy. Widoczne są kompleksy takich komórek, czasami z różnymi mostkami międzykomórkowymi. Nie ma oznak keratynizacji.

Rozpoznanie raka płaskonabłonkowego o niskim zróżnicowaniu opiera się na przewadze małych, okrągłych, łagodnie polimorficznych komórek nowotworowych ze stosunkowo dużymi, centralnie położonymi jądrami i małym obrzeżem cytoplazmy. Charakterystyczne są duże kompleksy takich komórek z pojedynczymi wydłużonymi elementami wzdłuż obwodu.

Dobrze zróżnicowany gruczolakorak (zrogowaciały, brodawkowaty). Charakterystyczne są wyraźnie wyrażone oznaki różnicowania gruczołów. Ponadto pouczające jest równomierne rozmieszczenie drobnoziarnistej chromatyny i dużych jąderek.

Rodzajem dobrze zróżnicowanego gruczolakoraka jest rak oskrzelowo-pęcherzykowy. Rozmazy charakteryzują się obecnością monomorficznych powiększonych sześciennych i cylindrycznych komórek nowotworowych z mimośrodowo położonymi jądrami, często 1-2 dużymi jąderkami (ryc. 28.1, e), licznymi małymi gruczołowymi (głównie brodawkowatymi) kompleksami tej samej wielkości, wyraźnym śluzem i czasami psamiczne ciała wapienne.

W przypadku średnio zróżnicowanego gruczolakoraka (gruczołowo-litego) następuje względny wzrost liczby okrągłych komórek nowotworowych, izolowanych i tworzących kompleksy. Weryfikację gruczolakoraka o niskim stopniu zróżnicowania stwierdza się poprzez wykrycie śluzu w cytoplazmie okrągłych komórek nowotworowych z centralnie położonymi jądrami.

Kryteriami rozpoznania cytologicznego raka drobnokomórkowego są: przewaga stosunkowo małych, nieznacznie zmiennych pod względem wielkości, okrągłych, wielokątnych komórek nowotworowych ze stosunkowo dużymi jądrami, nierównomierne rozmieszczenie gruboziarnistej chromatyny, nierozróżnialne jąderka, obecność zwartych kompleksów w komórkach których cytoplazma nie jest widoczna, a na sąsiednich powierzchniach tworzą się „gołe” „jądra” „fasety” (przystające kontury w postaci wgłębień, wypukłości, płaskich obszarów).

W niezróżnicowanym raku wielkokomórkowym przeważają duże komórki nowotworowe z dużymi, centralnie położonymi jądrami hiperchromicznymi lub „pęcherzykowymi”, licznymi dużymi jąderkami oraz domieszką komórek olbrzymich (ponad 12%).

Łagodne i złośliwe nienabłonkowe nowotwory płuc występują dość rzadko. Częściej niż inne diagnozuje się włókniaki, włókniakomięsaki, mięsaki angiogenne i gładkokomórkowe oraz chłoniaki złośliwe (warianty Hodgkina i nieziarnicze).

Kryteria ich diagnozy cytologicznej są podobne do kryteriów lokalizacji nowotworów w dowolnych narządach. Określenie pierwotnego lub przerzutowego charakteru guza płuc w większości przypadków jest możliwe tylko na podstawie kompleksowego przeglądu danych cytologicznych, anamnestycznych i klinicznych danych radiologicznych.

Charakterystyczne cechy cytomorfologiczne występują w tak osobliwej formacji jak hamartoma, w której w tych samych polach widzenia obserwuje się połączenie tych samych sześciennych i cylindrycznych komórek nabłonkowych z elementami tkanki chrzęstnej i śluzowej.
W tej części opisano tylko niektóre z różnorodnych obrazów, jakie cytolog napotyka podczas badania próbek biopsyjnych pobranych od pacjentów z patologią oskrzelowo-płucną.

Aby zilustrować znaczenie metody cytologicznej w diagnostyce różnicowej chorób płuc z dużej liczby postaci nozologicznych, rozważono tylko główne i podano przepisy potwierdzające ich weryfikację cytologiczną.

Jednocześnie należy podkreślić, że metoda cytologiczna, jak każda inna rozpatrywana oddzielnie, odgrywa znaczącą, ale nie samowystarczalną rolę w ustaleniu diagnozy. Aby uniknąć błędów diagnostycznych, wyniki badania cytologicznego należy oceniać w powiązaniu z danymi z badań klinicznych, radiologicznych, laboratoryjnych i instrumentalnych pacjentów.

(Greckie kytos – komórka, komórka) – nauka o komórce. Przedmiotem cytologii jest komórka jako strukturalna i funkcjonalna jednostka życia. W zadania cytologia obejmuje badanie budowy i funkcjonowania komórek, ich składu chemicznego, funkcji poszczególnych składników komórkowych, wiedzę o procesach rozmnażania komórek, adaptację do warunków środowiskowych, badanie cech strukturalnych wyspecjalizowanych komórek, etapy powstawania ich specjalnych funkcji, rozwój specyficznych struktur komórkowych itp. Aby je rozwiązać, do rozwiązywania problemów cytologicznych stosuje się różne metody.

Główną metodą badania komórek jest mikroskopia świetlna. Przyrządy optyczne - mikroskopy - służą do badania małych struktur. Rozdzielczość mikroskopów wynosi 0,13-0,20 mikrona, tj. około tysiąc razy większa niż rozdzielczość ludzkiego oka. Za pomocą mikroskopów świetlnych, które wykorzystują światło słoneczne lub sztuczne, można odsłonić wiele szczegółów wewnętrznej struktury komórki: poszczególnych organelli, błony komórkowej itp.

Ultradrobną strukturę struktur komórkowych bada się za pomocą mikroskopii elektronowej. W przeciwieństwie do mikroskopów świetlnych, mikroskopy elektronowe zamiast promieni świetlnych wykorzystują wiązkę elektronów. Rozdzielczość współczesnych mikroskopów elektronowych wynosi 0,1 nm, dzięki czemu mogą ujawnić bardzo małe szczegóły. Mikroskop elektronowy pokazuje błony biologiczne (grubość 6-10 nm), rybosomy (średnica około 20 nm), mikrotubule (grubość około 25 nm) i inne struktury.

Powszechnie stosowane są metody badania składu chemicznego i określania lokalizacji poszczególnych substancji chemicznych w komórce. cyto- I histochemia, oparty na selektywnym działaniu odczynników i barwników na określone substancje chemiczne cytoplazmy. Metoda wirowania różnicowego pozwala szczegółowo zbadać skład chemiczny organelli komórkowych po ich rozdzieleniu za pomocą wirówki. Metoda dyfrakcji promieni rentgenowskich umożliwia określenie układu przestrzennego i właściwości fizycznych cząsteczek (np. DNA, białek) tworzących struktury komórkowe.

Znajduje szerokie zastosowanie w identyfikacji lokalizacji miejsc syntezy biopolimerów, określaniu dróg przenoszenia substancji w komórce, monitorowaniu migracji czy właściwości poszczególnych komórek. metoda autoradiografii- rejestracja substancji znakowanych izotopami promieniotwórczymi. Za pomocą rejestrowanych jest wiele procesów życiowych komórek, w szczególności podział komórek film- I fotografia.

Do badania komórek narządów i tkanek roślin i zwierząt, procesów podziału komórek, ich różnicowania i specjalizacji wykorzystują metoda hodowli komórkowej- hodowanie komórek (i całych organizmów z pojedynczych komórek) na pożywce w sterylnych warunkach.

Używają ich do badania żywych komórek i wyjaśniania funkcji poszczególnych organelli metoda mikrochirurgii- działanie chirurgiczne na komórkę polegające na usunięciu lub wszczepieniu poszczególnych organelli, ich przeszczepieniu z komórki do komórki i wprowadzeniu do komórki dużych makrocząsteczek.

Obecnie szeroko stosowany w medycynie metody badań cytologicznych I diagnostyka cytologiczna do rozpoznawania wielu chorób.

Diagnostyka cytologiczna opiera się na badaniu obrazu mikroskopowego preparatu zawierającego zarówno pojedyncze komórki, jak i komórki w obrębie tkanki, a także środowisko komórkowe w warunkach normalnych oraz w różnych procesach patologicznych.

Cytolodzy prowadzą badania profilaktyczne, stawiają wstępne diagnozy i oceniają wyniki leczenia.

Badania cytologiczne wykorzystuje się w onkologii do rozpoznawania nowotworów; w hematologii – do diagnozowania chorób i oceny skuteczności ich leczenia; w ginekologii – w celu diagnostyki nowotworów i zaburzeń hormonalnych; do rozpoznawania wielu chorób układu oddechowego, trawienia, oddawania moczu, układu nerwowego itp.

Walery Iwanowicz Klyuchnikov pracuje jako cytolog w Narodowym Centrum Medyczno-Chirurgicznym im. N.I. Pirogova.

„Prowadzę badania głównie z wykorzystaniem mikroskopii rozmazów cytologicznych, odcisków, zeskrobin, materiału uzyskanego podczas biopsji i nakłucia” – relacjonuje Walery Iwanowicz, przedstawiając część wyników swojej codziennej pracy. „Mikrofotografie pozyskuję przy pomocy trójokularowego Mikromed-1, aparatu Altami USB 3150 R6 1/2 CMOS (3 Mpix) i programu 2.0.0, który jest wygodny w pomiarach elementów.”

Ryc.1. Nabłonek gruczołowy

NA Rysunek 1 Przedstawiono mikrofotografię nabłonka gruczołowego z kanału kościelnego. Gruczołowe komórki nabłonkowe są zarysowane w kształtach eliptycznych.

„Badania cytologiczne kanału szyjki macicy, czyli kanału szyjki macicy, przeprowadza się w celu zapobiegania stanom przedrakowym i rakowi szyjki macicy. Mikrofotografia pokazuje normalny nabłonek gruczołowy kanału szyjki macicy, ale uważam, że to przykład słabo wybarwionego rozmazu. Nie da się z niego wyciągnąć żadnych wniosków ze względu na obecność artefaktów. Artefakty to luźne nagromadzenia farby (wady w kolorystyce pociągnięć pędzla). Są to obiekty zakłócające, a czasami zniekształcające ogólny obraz analizy” – wyjaśnia Walery Iwanowicz.

Badanie normalnego proliferacyjnego typu rozmazu pokazano w Rysunek 2. Pobrano wymaz z zewnętrznej powierzchni szyjki macicy i kanału szyjki macicy (CC). „Tutaj widzimy komórki powierzchniowe wielowarstwowego nabłonka płaskonabłonkowego (MSE) z małymi jądrami i nagromadzenie gruczołowych komórek nabłonkowych z CC w postaci struktury gruczołowej (paska) z dużymi hiperchromicznymi (gęstymi) jądrami. W programie Studio Altami wyprodukowano: zmierzono średnicę takiego rdzenia i okazało się, że jego wartość wynosi 11,46 mikrona” – komentuje V.I. Klyuchnikov.

Ryż. 2. Pomiar średnicy jądra nabłonka gruczołowego

Mikrofotografia włączona Rysunek 3 z obrazem rozmazu typu proliferacyjnego z zewnętrznej powierzchni szyjki macicy. „To normalny rozmaz kobiety w wieku rozrodczym (rozrodczym). W pierwszej fazie cyklu charakteryzuje się dużą ilością dojrzałych powierzchniowych komórek MSE. W innych przypadkach tego typu rozmaz może być oznaką patologii. Na mikrofotografii widać komórki MSE z małymi jądrami, obecna jest także mikroflora drobnopręcikowa” – mówi cytolog Walerij Iwanowicz.

Ryż. 3. Rozmaz typu proliferacyjnego

Badanie mikroskopowe rozmazu typu proliferacyjnego pozwala czasami zdiagnozować wirusowy charakter patologii szyjki macicy ( Ryż. 4). „Na tej mikrofotografii obserwuję normalną mikroflorę pręcików pochwy, ale wzrost jąder poszczególnych komórek wraz z utworzeniem okołojądrowej strefy oczyszczania (koilocytoza). Wskazuje to na uszkodzenie komórek nabłonkowych przez infekcję wirusem brodawczaka ludzkiego” – zauważa V. I. Klyuchnikov.

Ryż. 4. Zakażenie wirusem brodawczaka ludzkiego (PVI)

NA Rysunek 5 W pracy przedstawiono mikrofotografię wymazu z zewnętrznej powierzchni szyjki macicy kobiety w okresie menopauzy. „Tutaj mogę potwierdzić diagnozę ostrego stanu zapalnego, a mianowicie zanikowego zapalenia jelita grubego (zapalenia pochwy). Wskazuje na to obfita akumulacja leukocytów i wzrost jądra komórkowego. W Altami Studio zmierzono średnicę jądra wybranego losowo z mikrofotografii. Średnica wynosiła 14,71 mikrona – odpowiada nasz respondent.

Zanikowe zapalenie jelita grubego jest zespołem objawów spowodowanym znacznym spadkiem zawartości estrogenów, co prowadzi do ścieńczenia nabłonka wielowarstwowego płaskiego.

„Badanie cytologiczne jest jedną z głównych metod obiektywnej diagnozy zanikowego zapalenia jelita grubego” – mówi Walery Iwanowicz.

Ryż. 5. Zanikowe zapalenie jelita grubego

Oprócz badań ginekologicznych Walery Iwanowicz diagnozuje guzki tarczycy ( Ryż. 6). „Na tej mikrofotografii możemy zaobserwować prawidłowe komórki nabłonka tarczycy (TG) w masie wytwarzanego przez nie rozpuszczalnego koloidu (zagęszczonej substancji przypominającej śluz). Pobrany rozmaz wykazuje wakuolizację, czyli rodzaj zwyrodnienia komórkowego charakteryzującego się tworzeniem wakuoli w cytoplazmie. Wskazuje to na różne zaburzenia metabolizmu komórek, ich funkcji i struktury” – relacjonuje Walery Iwanowicz.

Wole koloidowe tarczycy to choroba, która rozwija się na skutek niedoboru jodu. Jako środek zapobiegawczy zapobiegający tworzeniu się guzków wystarczy spożywać jod i witaminy.

Ryż. 6. Przeważnie wole koloidowe

„Badam także rozmazy przygotowane z punktu. Punktak to niewielka ilość tkanki lub płynu usunięta przez nakłucie cienką igłą. Poniższa mikrofotografia przedstawia badanie punkcika z guzka tarczycy ( Ryż. 7).

W tym przypadku reprezentuje monomorficzne (zachowujące jeden kształt przez cały okres rozwoju) małe komórki tarczycy typu A w małych skupiskach. Istnieje tendencja do tworzenia struktur mikropęcherzykowych (paski, rozety), czyli istnieje podejrzenie gruczolaka.

Gruczolak monomorficzny to najprościej mówiąc pojedynczy, gęsty węzeł zlokalizowany głęboko w gruczole.

Ale tej diagnozy nie należy się bać, gruczolak tarczycy jest nowotworem łagodnym i rzadko kiedy zmienia się w nowotwór złośliwy.”

Ryż. 7. Gruczolak tarczycy

Do badania żołądka wykorzystuje się także cytologię – na podstawie materiałów uzyskanych podczas endoskopii ( Ryż. 8). W programie Altami Studio mierzono średnicę jądra komórek nabłonka żołądka. „Są to normalne komórki nabłonkowe, średnica jednego z największych jąder wynosi 54,7449 mikronów” – zauważa V. I. Klyuchnikov.

Ryż. 8. Materiał endoskopowy z żołądka

„Do liczenia elementów krwi, ich stężenia i określania mobilności używam Kamera Goryaeva(ryc. 9). Kalibrowany jest w programie Altami Studio. Używając aparatu Goryaeva, wygodnie jest mi określić powiększenie mikroskopu. Używam go wyłącznie jako kalibratora.”

Ryż. 9. Kamera Goryaeva

„Cytologia jest nauką dość złożoną, a ponadto subiektywną. Z tego powodu cytolog musi posiadać nie tylko odpowiednie kwalifikacje, ale także duże doświadczenie w dziedzinie cytologii” – dzieli Walerij Iwanowicz. „Badania cytologiczne są potrzebne do diagnozowania różnych schorzeń szyjki macicy, badania nowotworów tarczycy i innych badań profilaktycznych. Obecnie badania cytologiczne, które zyskały uznanie i szerokie zastosowanie, osiągają wielki sukces w zapewnieniu zdrowia populacji” – mówi cytolog Walery Iwanowicz Klyuchnikov.

Metoda cytologiczna polega na określeniu struktury komórek i charakterystyki zachodzących w nich procesów chemicznych. Badania takie są najczęściej stosowane do wykrywania złośliwego zwyrodnienia komórek, w tym w stadium przednowotworowym, do diagnozowania chorób krwi i do wykrywania chorób narządów moczowo-płciowych.
Materiał do badania cytologicznego uzyskuje się różnymi sposobami. Zatem metoda złuszczająca polega na osadzeniu się płynów biologicznych pacjenta (krew, plwocina), które w wyniku tego ulegają rozwarstwieniu: osocze oddziela się od powstałych elementów krwi, a w plwocinie osadzają się śluz, nabłonek i bakterie. Materiał do badań można pozyskać za pomocą zeskrobin lub popłuczyn, rozmazów wydzieliny z przetoki, sutków gruczołów sutkowych itp. Coraz częściej w ten sposób uzyskuje się materiał do diagnostyki chorób skóry (w tym nowotworów).
Do badania cytologicznego tarczycy, szpiku kostnego, płynu mózgowo-rdzeniowego, cyst, nowotworów i narządów wewnętrznych pobiera się materiał od pacjenta poprzez nakłucie. Aby to zrobić, wykonuje się nakłucie igłą (zastrzykową lub specjalną), a płynną zawartość formacji jamy pobiera się zwykłą strzykawką. Pobranie tkanki z narządów wewnętrznych do badania nazywa się biopsją, którą wykonuje się za pomocą specjalnych instrumentów. Analizie można również poddać cząstki tkanki twardej pozostające we wnęce igły lub narzędzia biopsyjnego po nakłuciu.
Próbki tkanek narządów wewnętrznych do badania można pobrać za pomocą biopsji endoskopowej: do przewodu pokarmowego, oskrzeli lub jamy brzusznej wprowadza się elastyczne urządzenie z układem światłowodowym i narzędziem tnącym. Następnie wybiera się najbardziej podejrzane miejsce patologiczne i wykonuje się kilka skrawków tkanek. W takim przypadku przestrzegana jest następująca zasada: pierwszą sekcję wykonuje się na najbardziej zmienionym obszarze narządu, a następnie pobiera się kilka kolejnych próbek z sąsiednich obszarów i innych zmian. W takim przypadku krwawienie z uszkodzonych tkanek nie doprowadzi do błędnego pobrania próbki.
Nakłucie i biopsja są złożonymi metodami pobrania materiału do badań, często są dość bolesne, dlatego przeprowadzane są w znieczuleniu, ale pozwalają na ograniczenie błędów diagnostycznych do minimum.
Badaniom poddawane są zarówno wybarwione, utrwalone próbki tkanek, jak i próbki żywe. Analizę przeprowadza się za pomocą mikroskopii i reakcji chemicznych. Badania cytologiczne uzyskanego materiału są dość szybkie w wykonaniu i dotyczą diagnostyki przyżyciowej. Najczęściej wykorzystuje się je do wykrywania nowotworów i chorób przednowotworowych podczas masowych badań profilaktycznych. W trakcie badania określa się rodzaj komórek nabłonkowych, etap ich rozwoju oraz zachodzące w nich zmiany patologiczne. Tylko dzięki tej metodzie możliwe jest wykrycie i obserwacja dynamiki chorób przednowotworowych czy nowotworów we wczesnych stadiach.
W zależności od sposobu pobrania od pacjenta materiału do badań możliwe jest określenie wielkości nowotworu złośliwego, rozległości procesu (częściowe, całkowite uszkodzenie narządu, przerzut do tkanki otaczającej narząd i narządów sąsiadujących) . Za pomocą badania cytologicznego można odróżnić guz pierwotny od guza wtórnego, spowodowanego rozprzestrzenianiem się komórek nowotworowych po całym organizmie.
Dokładne dane dotyczące pochodzenia materiału mają ogromne znaczenie w badaniach cytologicznych, zwłaszcza jeśli jest on pobierany z kilku miejsc. Dlatego też wszystkie rozmazy i zeskrobiny po pobraniu muszą być odpowiednio oznakowane (oznaczenia robione są zarówno na szkiełku, jak i w załączonej dokumentacji). Aby uzyskać wiarygodne wyniki badania cytologicznego, ważna jest informacja o przeprowadzanym leczeniu, gdyż wiele leków (hormony, cytostatyki) działa bezpośrednio na komórki i zmienia ich stan. Ponadto, jeśli miejsce pobrania materiału od pacjenta zostanie wybrane nieprawidłowo, choroba może nie zostać wykryta. Jeśli wynik analizy jest wątpliwy, zaleca się ponowne badanie cytologiczne.
Objawy złośliwości komórek ujawnione podczas badania:
1) zmiana ułożenia komórek względem siebie w niektórych tkankach (nawarstwianie się, grupowanie);
2) niejasne granice;
3) jednoczesna obecność żywych zmodyfikowanych i martwych komórek;
4) zmiana wielkości komórki (zmniejszenie, zwiększenie);
5) zmiana kształtu komórki;
6) różnorodność budowy komórek (badany materiał zawiera komórki na różnych etapach rozwoju, wiele komórek niedojrzałych);
7) barwienie cytoplazmy na niebiesko barwnikami chemicznymi;
8) obecność wielu wakuoli i stałych wtrętów w cytoplazmie;
9) różnorodność budowy jąder;
10) wzrost wielkości jąder;
11) zmiana stosunku objętości między jądrem a cytoplazmą;
12) nierównomierny rozkład chromatyny;
13) zmiana struktury chromatyny;
14) zwiększone barwienie jąder;
15) obecność jąder o różnym stopniu zabarwienia;
16) wzrost wielkości jąder i ich liczby;
17) wzrost liczby komórek w stanie mitozy (podziału);
18) obecność komórek z nieprawidłowym podziałem.