Analiza wirusa HIV metodą ELISA: dokładność, niezawodność. Co to jest ELISA? Metoda testu immunoenzymatycznego: istota, zasada, wady Ifa wykazuje HIV

Szczególną uwagę zwraca się obecnie na diagnostykę HIV (wirusa niedoboru odporności) u ludzi. Wykrycie choroby na wczesnym etapie pozwoli na wcześniejsze rozpoczęcie leczenia, co znacząco wpłynie na wydłużenie życia pacjenta.

Po wykonaniu testu na obecność wirusa HIV jego wyniki są zazwyczaj pozytywne lub negatywne. W tym przypadku istnieje diagnoza pierwotna i wtórna. Podczas badań podstawowych osoba jest poddawana testowi ELISA. Jeśli to konieczne, wykonuje się ponowne badanie krwi na obecność wirusa HIV. Co oznacza wynik dodatni i ujemny? Jak rozszyfrować test na HIV? Dlaczego osoba, która nie jest narkomanem ani alkoholikiem, ale ma stałego partnera seksualnego, podczas czytania testu na obecność wirusa niedoboru odporności daje pozytywny, choć wątpliwy wynik?

O HIV

Czynnikami sprawczymi choroby są typy 1 i 2. Przez długi czas ich obecność u człowieka pozostaje niezauważona; wówczas atakowany jest przede wszystkim układ odpornościowy, a następnie inne układy człowieka.

Główną metodą diagnostyki laboratoryjnej wirusa niedoboru odporności jest wykrycie przeciwciał przeciwko HIV. Podstawą tej metody jest test immunoenzymatyczny (ELISA), charakteryzujący się czułością (99,5% i więcej) i swoistością (99,8% i więcej). Ponadto podczas diagnozowania wirusa HIV określa się antygen p24 za pomocą testu ELISA.

Każdy system testowy ma inne wskaźniki; dlatego określają różne struktury białkowe otoczek wirusa. Czynniki wywołujące HIV dzielą się na dwa podtypy: 1. i 2. lub HIV-1 i HIV-2. Cząsteczki wirusa mają kształt kulisty z zewnętrzną otoczką fosfolipidową. Dla podtypu 1 ma następującą masę cząsteczkową: gp120, gp41, gp160. Drugi podtyp zawiera gp105, gp36, gp140. W przypadku wewnętrznej otoczki wirusa znana jest również masa cząsteczkowa. Dla podtypu 1 jest to p55, p17, p24. Za 2. - s. 16, s. 25, s. 55.

Dla każdego systemu testowego wykrywającego wirusa istnieją trzy główne zestawy białek.

Ogólnie rzecz biorąc, wynik testu ELISA może być:

negatywny;
fałszywie pozytywny;
fałszywie negatywny;
wątpliwe lub niepewne.

Metody diagnostyczne identyfikują antygeny i przeciwciała.

O normalnym wyniku

Norma – co to znaczy? Jeśli wynik testu na obecność wirusa HIV jest ujemny, uważa się to za normalne.

1. Najnowsza generacja systemów testowych ELISA pozwala na określenie obecności przeciwciał przeciwko wirusowi HIV oraz cząstek białkowych. Jeśli analiza jest prawidłowa, we krwi nie stwierdza się przeciwciał ani cząstek białka patogenu. Ale na tej podstawie można z całą pewnością stwierdzić, że dana osoba jest zdrowa, jeśli przez 3 miesiące przed badaniem nie było ryzyka infekcji. W przeciwnym razie po pewnym czasie należy powtórzyć badania.

Zdarzały się przypadki, gdy HIV wykryto dopiero po 6 miesiącach. Dlatego też, jeśli wynik jest negatywny i doszło do kontaktu z pacjentem zakażonym wirusem HIV, dla wiarygodności konieczne jest powtórzenie testów po trzech, czterech i sześciu miesiącach. Zdarza się, że test ELISA daje wynik negatywny, ale dana osoba wyraźnie podejrzewa obecność oznak wirusa HIV, wówczas zaleca się ponowne wykonanie testu. Błędny wynik jest możliwy ze względu na wczesny moment analizy lub czynnik ludzki.

2. Jeżeli wynik immunoblotu jest negatywny, jest to obecnie najbardziej wiarygodna analiza.

Jeśli dana osoba jest zakażona wirusem niedoboru odporności, a wynik jest negatywny, najprawdopodobniej jest to błąd medyczny, który może wystąpić na dowolnym etapie testu. Jeśli po powtórzeniu immunoblotu po trzech i sześciu miesiącach wynik jest negatywny, nie ma się czym martwić, oznacza to normę. I dopiero po negatywnej odpowiedzi immunoblotu zostanie wydane zaświadczenie stwierdzające, że test na HIV jest negatywny.

3. Test PCR u dorosłych jest niezwykle rzadko stosowany w diagnostyce wirusa niedoboru odporności, a metodę tę stosuje się u noworodków.

Wynik negatywny również jest tutaj uważany za normę.

4. Jak wynika z badań socjologicznych, wiele osób korzysta z szybkich testów na obecność wirusa HIV. Widząc linię ujemną, ludzie uspokajają się i odmawiają pójścia do placówki medycznej, nawet jeśli mają wszystkie objawy zakażenia wirusem HIV. Ale musisz wiedzieć, że dokładność szybkiego testu wynosi osiemdziesiąt pięć procent. Ponadto w domu możesz to zrobić nieprawidłowo lub naruszone zostaną warunki przechowywania. Jeszcze większe jest ryzyko, że wynik będzie nieprawidłowy. Nawet wypicie alkalicznej wody mineralnej na 8 godzin przed badaniem będzie miało wpływ na wynik badania. Dlatego stwierdzenie, że dana osoba nie ma wirusa niedoboru odporności, co wynika z szybkiego testu, nawet jeśli wynik jest negatywny, nie zawsze jest prawdą.

Transkrypcja analizy

Po przeprowadzeniu badania często pojawia się pytanie, jak rozszyfrować wynik testu i co zrobić w przypadku uzyskania pozytywnego wyniku na obecność wirusa HIV.

1. Jeżeli test ELISA wykazał obecność wszystkich lub prawie wszystkich przeciwciał przeciwko antygenom zgodnie z tym systemem testowym, oznacza to pozytywny wynik testu na obecność wirusa HIV. Jeżeli odpowiedź po drugim serologicznym teście immunoenzymatycznym jest pozytywna, należy wykonać immunoblot. Odszyfrowanie jego wyników będzie dokładniejsze. Jeżeli test immunologiczny enzymatyczny dał wynik pozytywny, kolejna analiza immunoblot również wykazała obecność wirusa HIV, wówczas podawany jest wynik końcowy. Po rozszyfrowaniu testów musisz wiedzieć, że pozytywny wynik testu na obecność wirusa HIV określa:

60% do 65% 28 dni po zakażeniu;
w 80% - po 42 dniach;
w 90% - po 56 dniach;
w 95% - po 84 dniach.

Jeżeli odpowiedź na zakażenie wirusem HIV jest pozytywna, będzie to oznaczać, że wykryto przeciwciała przeciwko wirusowi. Aby uniknąć fałszywie pozytywnej odpowiedzi, należy przystąpić do testów ponownie, najlepiej dwukrotnie. Jeżeli przeciwciała na niedobór odporności zostaną wykryte po przejściu dwóch testów z dwóch lub po przejściu 3 testów w 2 z nich, wynik uważa się za pozytywny.

Antygen p 24 można wykryć we krwi w ciągu 14 dni od daty zakażenia. Stosując metodę immunoenzymatyczną, antygen ten wykrywa się od 14 do 56 dni. Po 60 dniach nie ma go już we krwi. Dopiero gdy w organizmie pojawi się AIDS, białko p24 ponownie rośnie we krwi. Dlatego też systemy testów immunoenzymatycznych wykorzystuje się do wykrycia wirusa HIV już w pierwszych dniach zakażenia lub do określenia przebiegu choroby i monitorowania procesu leczenia. Wysoka czułość analityczna testu enzymatycznego pozwala wykryć antygen p24 w materiale biologicznym w przypadku wirusa HIV pierwszego podtypu w stężeniu od 5 do 10 pkg/ml, w przypadku wirusa drugiego podtypu od 0,5 ng/ml lub mniej.

2. Wątpliwy wynik testu immunoenzymatycznego oznacza, że gdzieś w diagnostyce popełniono błąd, z reguły coś pomylili pracownicy służby zdrowia lub dana osoba ma objawy infekcji, ale wynik jest negatywny, co budzi podejrzenia, i osoba zostaje wysłana na powtórne badanie.

3. Przez wynik fałszywie dodatni rozumie się wynik wykonania badań krwi w następujących warunkach pacjenta:

ciąża;
jeśli dana osoba ma brak równowagi hormonalnej;
z długotrwałą immunosupresją.

Jak rozszyfrować analizę w tym przypadku? Wynik fałszywie dodatni jest podawany w przypadku wykrycia co najmniej jednego białka.

Ze względu na to, że antygen p24 jest bardzo zależny od osobniczej zmienności, przy zastosowaniu tej metody w pierwszym okresie infekcji wykrywa się od 20% do 30% pacjentów.

O wskaźnikach po badaniu metodą reakcji łańcuchowej polimerazy

Dzięki tej metodzie RNA i DNA wirusa HIV są wykrywane niemal natychmiast po zakażeniu. Ale nie postawiono ostatecznej diagnozy; wymagane jest obowiązkowe potwierdzenie innymi metodami. „Pomóż mi rozszyfrować wynik PCR.” - dość często można usłyszeć taką prośbę. Co jest napisane w tym przypadku, jeśli wykryty zostanie wirus niedoboru odporności? Odpowiadając na wynik analizy wykonanej metodą PCR, wskazywana jest liczba kopii RNA na mililitr krwi. Poniższa tabela przedstawia wynik w zależności od cech ilościowych we krwi.

Warto skorzystać z powyższej tabeli podczas wykonywania badań na AIDS, gdyż z łatwością można na jej podstawie określić stopień zaawansowania choroby.

Tabele te, uwzględniające różne systemy badawcze, są dostępne w pomieszczeniach laboratoryjnych dla każdej metody immunoenzymatycznej i immunoblottingu.

Często pyta się ich: „Odszyfruj odpowiedź po badaniu reakcji łańcuchowej polimerazy przy użyciu wskaźnika CD4”. Normalna liczba komórek CD4 wynosi od 600 do 1900 komórek na mililitr materiału biologicznego. Odpowiada to statusowi HIV-ujemnemu. Ale musisz wiedzieć, że te wskaźniki, nawet u zdrowych ludzi, nie mieszczą się w tym zakresie.

We współczesnym świecie wiele laboratoriów ma już dobry sprzęt, dzięki któremu można całkowicie zbadać organizm pod kątem zakażenia wirusem HIV.

W kontakcie z

Do kompleksowej oceny stanu organizmu wykorzystuje się metodę diagnostyczną ELISA. Badanie krwi metodą immunoenzymatyczną przeznaczone jest do diagnostyki zakaźnych, hematologicznych, pierwotnych i wtórnych niedoborów odporności.

Co to jest analiza ELISA

Wielu pacjentów interesuje się metodą ELISA: czym jest, dlaczego przeprowadza się badanie. Testy immunoenzymatyczne zaczęto stosować stosunkowo niedawno. Początkowo służyła do badania struktur antygenowych i była prowadzona wyłącznie w celach naukowych. Następnie naukowcy doszli do wniosku, że za pomocą enzymów można zidentyfikować specyficzne przeciwciała, które powstają w odpowiedzi na trwającą chorobę.

Początkowo technikę tę stosowały wyłącznie wysokospecjalistyczne placówki medyczne, głównie na stacjach transfuzji krwi. Szczególne znaczenie w wykrywaniu zakażenia wirusem HIV ma metoda ELISA.

Dziś metoda ta ma szeroki zakres zastosowania. Nowoczesne laboratoria wykorzystują ją do diagnozowania:

nowotwory;
zaburzenia hormonalne;
infekcje;
przewlekłe lub wcześniejsze procesy zakaźne;
robaki.

Jeśli w organizmie zachodzi proces zakaźny, wówczas ten rodzaj diagnozy uważa się za najbardziej optymalny do określenia rodzaju choroby.

Istota metody i jej rodzaje

Metoda ELISA – na czym polega, jaka jest istota tego typu badań? To i wiele innych pytań interesuje pacjentów. Podstawą tej metody diagnostycznej jest wiązanie się komórek odpornościowych organizmu z antygenami czynników zakaźnych. Powstały kompleks określa się za pomocą specjalnego enzymu.

Aby zrozumieć zasadę działania metody ELISA, należy wiedzieć, jak zachodzi reakcja antygen-przeciwciało. Antygen to obca dla organizmu cząsteczka białka, która przenika wraz z infekcją. Cząsteczki krwi innej osoby, które nie pasują do grupy, są również uważane za antygeny. W organizmie wywołują reakcję immunologiczną mającą na celu ochronę przed obcymi substancjami. Dlatego organizm ludzki wytwarza przeciwciała – immunoglobuliny, które mogą przyłączać się do antygenów, tworząc kompleks immunologiczny. Takie związki są znacznie łatwiejsze do rozpoznania i zniszczenia przez komórki odpornościowe.

Reakcję na obecność takich kompleksów immunologicznych przeprowadza się w warunkach laboratoryjnych, wykorzystując gotowe związki w celu ustalenia, czy we krwi występują podobne kompleksy.

Istota metody ELISA jest dość prosta, jednak ze względu na to, że badanie krwi przeprowadza się w celu wykrycia wielu infekcji i chorób, istnieje kilka jej odmian. Każdy z nich różni się schematem realizacji i zakresem. Może być bezpośredni lub pośredni ELISA. Metoda bezpośrednia zakłada, że stosuje się unieruchomione przeciwciała, które reagują z antygenami. Główną zaletą tej metody jest to, że wszystkie procesy można zautomatyzować, co sprawia, że diagnostyka zajmuje niewiele czasu.

Metoda pośrednia zakłada użycie przeciwciał wtórnych. Natomiast w fazie stałej antygen jest unieruchomiony. Analiza pozwala na oznaczenie przeciwciał przeciwko różnym antygenom. Pomaga to uzyskać dokładniejszy wynik, ale metoda jest złożona.

Korzyści ze studiów

Metoda ELISA ma wiele zalet w porównaniu z innymi metodami diagnostycznymi. Do najważniejszych z nich należą:

wysoka czułość;
stabilność przechowywania składników;
szybkość diagnostyki;
można zastosować niewielką ilość materiału do badania;
możliwa jest automatyzacja wszystkich procesów;
infekcję można wykryć na najwcześniejszym etapie.

Ta metoda diagnostyczna jest uniwersalna i dlatego nadaje się do badania masowego. Za pomocą analizy można prześledzić dynamikę procesu zakaźnego.

Wskazania do analizy i pobrania materiału

Badanie metodą ELISA można zlecić, jeśli podejrzewa się wiele chorób:

Krew żylną bada się na obecność przeciwciał. Przed analizą wyodrębnia się z niej elementy mogące skomplikować badanie. Można zbierać także inne płyny biologiczne.

Aby uzyskać jak najdokładniejsze informacje, pobieranie krwi pobiera się na pusty żołądek. Jeżeli zabieg został przepisany w celu ustalenia ukrytej infekcji, to na kilka tygodni przed badaniem należy zaprzestać przyjmowania leków przeciwbakteryjnych i przeciwwirusowych. W zależności od wyposażenia laboratorium, w którym pobrano materiał, wynik można uzyskać w ciągu 24 godzin. W sytuacjach awaryjnych czas ten ulega skróceniu do kilku godzin.

Test na kiłę

Zastosowanie metody ELISA pozwala określić obecność wielu infekcji w organizmie, w szczególności kiły. W celu przeprowadzenia badania krew pobierana jest z żyły na pusty żołądek. Następnie przeprowadza się badanie, które pomaga określić nie tylko obecność choroby w organizmie, ale także dokładny moment jej wystąpienia, ponieważ w trakcie choroby niektóre przeciwciała są zastępowane innymi w ściśle określonej kolejności.

W ostrej fazie, wskazującej na przedłużony przebieg choroby lub w czasie zaostrzenia przewlekłej infekcji, we krwi wykryte zostaną immunoglobuliny typu M. Obecność immunoglobulin typu A świadczy o tym, że infekcja żyje w organizmie dłużej niż 4 tygodnie. Immunoglobuliny grupy G wskazują na wysokość choroby lub poprzednią terapię.

Intensywność procesu infekcyjnego ocenia się na podstawie stopnia zabarwienia dziur, ponieważ jego nasycenie zależy od liczby utworzonych kompleksów immunologicznych.

Test na zakażenie wirusem HIV

Do analizy wykorzystuje się również metodę ELISA; w tym przypadku ma ona pewne cechy, które są związane z przebiegiem i postępem choroby. Ta metoda badawcza jest uważana za najbardziej akceptowalną do oznaczania, ale należy ją przeprowadzić nie wcześniej niż miesiąc po ekspozycji na czynniki ryzyka. Wynika to z obecności okresu inkubacji, który trwa od 45 dni do 6 miesięcy. Dlatego analizę należy powtórzyć po sześciu miesiącach.

glistnica;
lamblioza;
toksoplazmoza itp.

Pomimo wszystkich zalet metoda ELISA ma również wady. Główną wadą jest to, że przeprowadzając badanie, lekarz musi z góry mieć przypuszczenie na temat choroby.

Jeśli nie jest możliwe przypadkowe odnalezienie patogenu i określenie jego właściwości immunoenzymalnych. Badanie wskazuje jedynie na obecność przeciwciał we krwi pacjenta. Ponadto jest to dość kosztowna analiza.

Transkrypcja analizy

Wynikiem wysokiej jakości testu ELISA będzie albo obecność przeciwciał, albo ich brak we krwi. Jeśli przeprowadzana jest analiza ilościowa, stężenie przeciwciał można wyrazić albo jako wartość cyfrową, albo za pomocą określonej liczby znaków +.

Ponadto wskaźniki takie jak:

Wskaźnik IgM wskazuje na wystąpienie ostrego procesu zakaźnego w organizmie. Jego całkowity brak może wskazywać na brak czynnika sprawczego choroby lub jej przejście do stadium przewlekłego.

Odczyt IgA przy ujemnym wyniku testu IgM wskazuje na przewlekłą lub utajoną infekcję. Jednoczesna obecność IgM i IgA wskazuje, że choroba jest w ostrym stadium. Obecność IgG wskazuje na przejście choroby do stadium przewlekłego lub całkowite wyzdrowienie i rozwój odporności.

Teraz dostępne są specjalne testy ELISA, które możesz wykonać samodzielnie.

Terminowe rozpoznanie zakażenia wirusem HIV staje się niezwykle ważnym środkiem, ponieważ wczesne rozpoczęcie leczenia może w dużej mierze determinować dalszy rozwój choroby i przedłużyć życie pacjenta. W ostatnich latach nastąpił znaczny postęp w rozpoznawaniu tej strasznej choroby: starsze systemy testowe są zastępowane bardziej zaawansowanymi, metody badawcze stają się coraz bardziej dostępne, a ich dokładność znacznie wzrasta.

W tym artykule porozmawiamy o nowoczesnych metodach diagnozowania zakażenia wirusem HIV, których znajomość jest przydatna do szybkiego leczenia tego problemu i utrzymania normalnej jakości życia pacjenta.

Metody diagnostyki HIV

W Rosji przeprowadza się standardową procedurę diagnozowania zakażenia wirusem HIV, która obejmuje dwa poziomy:

System testowy ELISA (analiza przesiewowa);
immunoblot (IB).

Do diagnozy można również zastosować inne metody:

szybkie testy.

Systemy testów ELISA

Na pierwszym etapie diagnozy do wykrycia zakażenia wirusem HIV wykorzystuje się test przesiewowy (ELISA), który opiera się na powstałych w laboratoriach białkach wirusa HIV, które wychwytują specyficzne przeciwciała wytwarzane w organizmie w odpowiedzi na zakażenie. Po ich interakcji z odczynnikami (enzymami) układu testowego zmienia się kolor wskaźnika. Następnie te zmiany barwy poddawane są obróbce przy użyciu specjalnego sprzętu, który determinuje wynik przeprowadzonej analizy.

Takie testy ELISA mogą dać wyniki w ciągu kilku tygodni po wprowadzeniu zakażenia wirusem HIV. Test ten nie określa obecności wirusa, ale wykrywa wytwarzanie przeciwko niemu przeciwciał. Czasami w organizmie człowieka wytwarzanie przeciwciał przeciwko wirusowi HIV rozpoczyna się już po 2 tygodniach od zakażenia, jednak u większości osób powstają one później, po 3-6 tygodniach.

Istnieją cztery generacje testów ELISA o różnej czułości. W ostatnich latach coraz częściej stosuje się systemy testowe trzeciej i czwartej generacji, które opierają się na syntetycznych peptydach lub białkach rekombinowanych i charakteryzują się większą swoistością i dokładnością. Można ich używać do diagnozowania zakażenia wirusem HIV, monitorowania częstości występowania wirusa HIV i zapewnienia bezpieczeństwa podczas badania oddanej krwi. Dokładność systemów testów ELISA III i IV generacji wynosi 93-99% (testy produkowane w Europie Zachodniej są bardziej czułe – 99%).

Do wykonania testu ELISA pobiera się z żyły pacjenta 5 ml krwi. Pomiędzy ostatnim posiłkiem a analizą musi upłynąć co najmniej 8 godzin (zwykle wykonuje się ją rano na czczo). Zaleca się wykonanie takiego badania nie wcześniej niż 3 tygodnie od podejrzenia zakażenia (np. po stosunku płciowym bez zabezpieczenia z nowym partnerem seksualnym).

Wyniki testu ELISA uzyskuje się w ciągu 2-10 dni:

wynik negatywny: wskazuje na brak zakażenia wirusem HIV i nie wymaga konsultacji ze specjalistą;
wynik fałszywie ujemny: można zaobserwować we wczesnych stadiach infekcji (do 3 tygodni), w późniejszych stadiach AIDS z ciężką supresją układu odpornościowego i niewłaściwym przygotowaniem krwi;
wynik fałszywie dodatni: można zaobserwować w niektórych chorobach oraz w przypadku nieprawidłowego przygotowania krwi;
wynik pozytywny: wskazuje na zakażenie wirusem HIV, wymaga przeprowadzenia IB i skontaktowania się pacjenta ze specjalistą w ośrodku AIDS.

Dlaczego test ELISA może dawać fałszywie dodatnie wyniki?

Fałszywie dodatnie wyniki testu ELISA na HIV mogą wystąpić w wyniku nieprawidłowego przetwarzania krwi lub u pacjentów z następującymi schorzeniami i chorobami:

szpiczak mnogi;
choroby zakaźne wywołane wirusem Epsteina-Barra;
stan po;
choroby autoimmunologiczne;
na tle ciąży;
stan po szczepieniu.

Z powodów opisanych powyżej we krwi mogą znajdować się nieswoiste przeciwciała reagujące krzyżowo, których wytwarzanie nie zostało spowodowane zakażeniem wirusem HIV.

W ostatnich latach częstotliwość wyników fałszywie dodatnich znacznie spadła ze względu na stosowanie systemów testowych III i IV generacji, które zawierają bardziej czułe peptydy i białka rekombinowane (są syntetyzowane metodą inżynierii genetycznej in vitro). Po wprowadzeniu takich testów ELISA częstotliwość wyników fałszywie dodatnich znacznie spadła i wynosi około 0,02-0,5%.

Fałszywie pozytywny wynik nie oznacza, że dana osoba jest zakażona wirusem HIV. W takich przypadkach WHO zaleca wykonanie kolejnego testu ELISA (koniecznie IV generacji).

Krew pacjenta przesyłana jest do laboratorium referencyjnego lub arbitrażowego z oznaczeniem „powtórz” i badana systemem testowym ELISA IV generacji. Jeżeli wynik nowej analizy jest negatywny, wówczas pierwszy wynik uważa się za błędny (fałszywie pozytywny) i nie przeprowadza się IS. Jeśli wynik drugiego testu będzie pozytywny lub wątpliwy, pacjent musi po 4-6 tygodniach przejść IB, aby potwierdzić lub wykluczyć zakażenie wirusem HIV.

Immunoblotting

Ostateczną diagnozę zakażenia wirusem HIV można postawić dopiero po uzyskaniu dodatniego wyniku immunoblottingu (IB). Do jego przeprowadzenia wykorzystuje się pasek nitrocelulozowy, na który nanoszone są białka wirusowe.

Pobieranie krwi w kierunku IB pobiera się z żyły. Następnie poddawany jest specjalnej obróbce, a białka zawarte w jego surowicy zostają rozdzielone w specjalnym żelu według ich ładunku i masy cząsteczkowej (manipulacja odbywa się za pomocą specjalnego sprzętu pod wpływem pola elektrycznego). Na żel surowicy krwi nakłada się pasek nitrocelulozowy i w specjalnej komorze przeprowadza się bloting („blotting”). Pasek jest przetwarzany i jeśli użyte materiały zawierają przeciwciała przeciwko wirusowi HIV, wiążą się one z prążkami antygenowymi na IB i pojawiają się w postaci linii.

IB uważa się za pozytywne, jeżeli:

według amerykańskich kryteriów CDC - na pasku znajdują się dwie lub trzy linie gp41, p24, gp120/gp160;
zgodnie z amerykańskimi kryteriami FDA pasek ma dwie linie p24, p31 i linię gp41 lub gp120/gp160.

W 99,9% przypadków dodatni wynik IB wskazuje na zakażenie wirusem HIV.

Jeśli nie ma linii, IB jest ujemne.

Identyfikując linie z gr160, gr120 i gr41, IB jest wątpliwe. Wynik ten może wystąpić, gdy:

choroby onkologiczne;
ciąża;
częste transfuzje krwi.

W takich przypadkach zaleca się powtórzenie testu przy użyciu zestawu innej firmy. Jeżeli po dodatkowym IB wynik pozostaje wątpliwy, konieczna jest obserwacja przez pół roku (IB przeprowadza się co 3 miesiące).

Reakcja łańcuchowa polimerazy

Test PCR może wykryć RNA wirusa. Jego czułość jest dość wysoka i pozwala wykryć zakażenie wirusem HIV w ciągu 10 dni od zakażenia. W niektórych przypadkach PCR może dać wyniki fałszywie dodatnie, ponieważ jego wysoka czułość może również reagować na przeciwciała przeciwko innym infekcjom.

Ta technika diagnostyczna jest kosztowna i wymaga specjalnego sprzętu oraz wysoko wykwalifikowanych specjalistów. Powody te nie pozwalają na przeprowadzanie masowych badań populacji.

PCR stosuje się w następujących przypadkach:

do wykrywania wirusa HIV u noworodków urodzonych przez matki zakażone wirusem HIV;
w celu wykrycia wirusa HIV w „okresie okna” lub w przypadku wątpliwego IB;
kontrolować stężenie wirusa HIV we krwi;
do badania krwi dawców.

Sam test PCR nie pozwala na rozpoznanie wirusa HIV, ale jest przeprowadzany jako dodatkowa metoda diagnostyczna w celu rozwiązania kontrowersyjnych sytuacji.

Metody ekspresowe

Jedną z innowacji w diagnostyce HIV są szybkie testy, których wyniki można ocenić w ciągu 10-15 minut. Najbardziej efektywne i dokładne wyniki uzyskuje się stosując testy immunochromatograficzne oparte na zasadzie przepływu kapilarnego. Są to specjalne paski, na które nanosi się krew lub inne płyny testowe (ślina, mocz). Jeżeli obecne są przeciwciała przeciwko wirusowi HIV, po 10-15 minutach na teście pojawia się kolorowy pasek kontrolny – wynik pozytywny. Jeśli wynik będzie negatywny, pojawi się tylko pasek kontrolny.

Podobnie jak w przypadku testów ELISA, wyniki szybkich testów należy potwierdzić analizą IB. Dopiero po tym można postawić diagnozę zakażenia wirusem HIV.

Dostępne są zestawy do szybkich testów domowych. Test OraSure Technologies1 (USA) jest zatwierdzony przez FDA, jest dostępny bez recepty i może być stosowany do wykrywania wirusa HIV. Po badaniu, jeśli wynik jest pozytywny, zaleca się pacjentowi poddanie się badaniu w specjalistycznym ośrodku w celu potwierdzenia diagnozy.

Inne testy do użytku domowego nie zostały jeszcze zatwierdzone przez FDA, a ich wyniki mogą być bardzo wątpliwe.

Pomimo tego, że szybkie testy mają gorszą dokładność niż testy ELISA IV generacji, są one powszechnie stosowane w dodatkowych badaniach populacji.

Testy na wykrycie zakażenia wirusem HIV można wykonać w dowolnej przychodni, centralnym szpitalu powiatowym lub wyspecjalizowanych ośrodkach AIDS. Na terytorium Rosji przeprowadzane są one w sposób całkowicie poufny lub anonimowy. Każdy pacjent może liczyć na konsultację lekarską lub psychologiczną przed lub po badaniu. Za badania na obecność wirusa HIV zapłacisz jedynie w komercyjnych placówkach medycznych, natomiast w publicznych przychodniach i szpitalach są one wykonywane bezpłatnie.

Przeczytaj, w jaki sposób można zarazić się wirusem HIV i jakie mity krążą na temat możliwości zarażenia się.

W ostatnich latach nastąpił znaczny postęp w rozpoznawaniu tej strasznej choroby: starsze systemy testowe są zastępowane bardziej zaawansowanymi, metody badawcze stają się coraz bardziej dostępne, a ich dokładność znacznie wzrasta.

Metody diagnostyki HIV

W Rosji przeprowadza się standardową procedurę diagnozowania zakażenia wirusem HIV, która obejmuje dwa poziomy:

Do diagnozy można również zastosować inne metody:

Systemy testów ELISA

Wyniki testu ELISA uzyskuje się w ciągu 2-10 dni:

wynik negatywny: wskazuje na brak zakażenia wirusem HIV i nie wymaga konsultacji ze specjalistą;
wynik fałszywie ujemny: można zaobserwować we wczesnych stadiach infekcji (do 3 tygodni), w późniejszych stadiach AIDS z ciężką supresją układu odpornościowego i niewłaściwym przygotowaniem krwi;
wynik fałszywie dodatni: można zaobserwować w niektórych chorobach oraz w przypadku nieprawidłowego przygotowania krwi;
wynik pozytywny: wskazuje na zakażenie wirusem HIV, wymaga przeprowadzenia IB i skontaktowania się pacjenta ze specjalistą w ośrodku AIDS.

Dlaczego test ELISA może dawać fałszywie dodatnie wyniki?

Fałszywie dodatnie wyniki testu ELISA na HIV mogą wystąpić w wyniku nieprawidłowego przetwarzania krwi lub u pacjentów z następującymi schorzeniami i chorobami:

szpiczak mnogi;
alkoholowe zapalenie wątroby;
choroby zakaźne wywołane wirusem Epsteina-Barra;
stan po dializie;
choroby autoimmunologiczne;
na tle ciąży;
stan po szczepieniu.

Z powodów opisanych powyżej we krwi mogą znajdować się nieswoiste przeciwciała reagujące krzyżowo, których wytwarzanie nie zostało spowodowane zakażeniem wirusem HIV.

Fałszywie pozytywny wynik nie oznacza, że dana osoba jest zakażona wirusem HIV. W takich przypadkach WHO zaleca wykonanie kolejnego testu ELISA (koniecznie IV generacji).

Immunoblotting

IB uważa się za pozytywne, jeżeli:

według amerykańskich kryteriów CDC - na pasku znajdują się dwie lub trzy linie gp41, p24, gp120/gp160;
zgodnie z amerykańskimi kryteriami FDA pasek ma dwie linie p24, p31 i linię gp41 lub gp120/gp160.

W 99,9% przypadków dodatni wynik IB wskazuje na zakażenie wirusem HIV.

Jeśli nie ma linii, IB jest ujemne.

Identyfikując linie z gr160, gr120 i gr41, IB jest wątpliwe. Wynik ten może wystąpić, gdy:

Reakcja łańcuchowa polimerazy

Ta technika diagnostyczna jest kosztowna i wymaga specjalnego sprzętu oraz wysoko wykwalifikowanych specjalistów. Powody te nie pozwalają na przeprowadzanie masowych badań populacji.

PCR stosuje się w następujących przypadkach:

do wykrywania wirusa HIV u noworodków urodzonych przez matki zakażone wirusem HIV;
w celu wykrycia wirusa HIV w „okresie okna” lub w przypadku wątpliwego IB;
kontrolować stężenie wirusa HIV we krwi;
do badania krwi dawców.

Sam test PCR nie pozwala na rozpoznanie wirusa HIV, ale jest przeprowadzany jako dodatkowa metoda diagnostyczna w celu rozwiązania kontrowersyjnych sytuacji.

Metody ekspresowe

Jedną z innowacji w diagnostyce HIV są szybkie testy, których wyniki można ocenić w ciągu kilku minut. Najbardziej efektywne i dokładne wyniki uzyskuje się stosując testy immunochromatograficzne oparte na zasadzie przepływu kapilarnego. Są to specjalne paski, na które nanosi się krew lub inne płyny testowe (ślina, mocz). Jeżeli obecne są przeciwciała przeciwko wirusowi HIV, po minucie na teście pojawia się kolorowa linia i linia kontrolna – wynik pozytywny. Jeśli wynik będzie negatywny, pojawi się tylko pasek kontrolny.

Podobnie jak w przypadku testów ELISA, wyniki szybkich testów należy potwierdzić analizą IB. Dopiero po tym można postawić diagnozę zakażenia wirusem HIV.

Inne testy do użytku domowego nie zostały jeszcze zatwierdzone przez FDA, a ich wyniki mogą być bardzo wątpliwe.

Pomimo tego, że szybkie testy mają gorszą dokładność niż testy ELISA IV generacji, są one powszechnie stosowane w dodatkowych badaniach populacji.

O tym, jak można zarazić się wirusem HIV i jakie mity krążą na temat możliwości zarażenia, przeczytasz w tym artykule.

Z jakim lekarzem powinienem się skontaktować?

Aby poddać się badaniu na obecność wirusa HIV, należy udać się do terapeuty i uzyskać skierowanie na badanie. Ponadto możesz zgłosić się bezpośrednio do Centrum Zapobiegania i Kontroli AIDS i poddać się tam anonimowym testom. Specjalista chorób zakaźnych lub wenerolog również skieruje Cię na to badanie, jeśli podejrzewasz zakażenie wirusem HIV.

W jakich przypadkach i kiedy wykonuje się test ELISA na obecność wirusa HIV?

Ludzki wirus niedoboru odporności jest niebezpieczną chorobą, która pomimo wysiłków lekarzy specjalistów rozprzestrzenia się w dużym tempie. Na całym świecie wiele uwagi poświęca się walce z tą chorobą. Jednak nie wynaleziono jeszcze cudownej szczepionki przeciwko AIDS. We współczesnej medycynie istnieje kilka sposobów diagnozowania wirusa niedoboru odporności, ale najczęstszą z nich jest test immunologiczny enzymatyczny. Test ELISA HIV zaczęto stosować kilkadziesiąt lat temu. Przez te wszystkie lata ta metoda diagnostyczna była udoskonalana. A dziś jest również uważany za jeden z najdokładniejszych. Wiarygodność testu ELISA na obecność wirusa HIV jest wysoka. Jest to dziewięćdziesiąt sześć do dziewięćdziesięciu ośmiu procent. Margines błędu w przypadku wyniku fałszywie dodatniego lub fałszywie ujemnego jest niewielki. Dzięki temu widać popularność takiej diagnostyki. Jak wykrywa się HIV metodą ELISA, gdzie można wykonać to badanie i jak się do niego przygotować?

Opis testu ELISA na HIV

Test ELISA na obecność wirusa HIV ma na celu wykrycie przeciwciał przeciwko tej chorobie we krwi danej osoby. Gdy wirus ten przedostanie się do organizmu człowieka, nie rozpoczyna on natychmiast swojej aktywnej aktywności. W związku z tym do pewnego momentu identyfikacja może być niemożliwa. Eksperci medyczni zalecają wykonanie badania na obecność wirusa niedoboru odporności nie wcześniej niż kilka tygodni po podejrzeniu zakażenia.

Test ELISA wykrywa przeciwciała przeciwko wirusowi HIV z dużym prawdopodobieństwem. Warto zauważyć, że test ten pozwala wykryć przeciwciała w surowicy krwi. Decyduje nie tylko o ich obecności. Test ELISA krwi HIV pomaga również zidentyfikować pełne spektrum przeciwciał. W pewnym stopniu takie informacje pomagają określić czas wystąpienia infekcji, z dokładnością do tygodnia. Jest to konieczne nie tylko po to, aby osoba zakażona mogła odgadnąć, w jakich okolicznościach doszło do zakażenia. Ilość przeciwciał przeciwko wirusowi HIV w teście ELISA to informacja potrzebna także specjalistom medycznym. Za jego pomocą mogą następnie monitorować stan pacjenta, określając z dużą dokładnością, jak wirus będzie się zachowywał w nadchodzących tygodniach lub miesiącach. Pacjentowi, który został już zdiagnozowany, można zaproponować oddanie krwi za pomocą testu ELISA na obecność wirusa HIV. Procedura ta jest konieczna w celu określenia składu ilościowego przeciwciał i ustalenia prawidłowego schematu leczenia przeciwretrowirusowego.

We współczesnej medycynie, zwłaszcza w naszym kraju, w przypadku wirusa HIV stosuje się dziś test ELISA IV generacji. Analiza ta była udoskonalana przez lata i dziś jej wiarygodność wynosi dziewięćdziesiąt sześć do dziewięćdziesięciu ośmiu procent. Błąd jest niewielki, ale występuje. Dlatego dla bezpieczeństwa pacjenci z diagnozą ustaloną na podstawie testu immunologicznego enzymatycznego są również badani za pomocą immunoblottingu. Innymi słowy, systemy testów ELISA czwartej generacji na obecność wirusa HIV zwiększają prawdopodobieństwo identyfikacji osób, u których nie zdiagnozowano wirusa niedoboru odporności. W takim przypadku powtórna kontrola nie jest przeprowadzana. Jeżeli test immunologiczny enzymatyczny wykaże obecność przeciwciał przeciwko wirusowi niedoboru odporności, pacjenci kierowani są na inne rodzaje badań.

W jaki sposób przeprowadza się badanie na obecność wirusa HIV za pomocą testu ELISA?

Badanie krwi ELISA na AIDS pobiera się z żyły. Podobnie jak w przypadku innych znanych metod badań mających na celu identyfikację wirusa niedoboru odporności, surowicę krwi stosuje się jako materiał biologiczny w testach enzymatycznych. Pacjent przychodzi na badanie na czczo. Nie ma w tym zakresie specjalnych ograniczeń w zakresie spożywania posiłków i abstynencji od alkoholu. Jednak nadmierne spożycie napojów alkoholowych przed badaniem może negatywnie wpłynąć na wynik. Każdy powinien o tym wiedzieć.

Przeciwciała przeciwko wirusowi HIV są wykrywane metodą ELISA w kilku etapach. Oprócz materiału biologicznego pacjenta, w tym przypadku jest to krew żylna, do takiego zabiegu wymagana jest sztuczna surowica z białkiem wirusa niedoboru odporności i podłożem stałym. W tym ostatnim wykorzystuje się specjalną tabletkę, która może być wykonana z polistyrenu lub innego średnio porowatego materiału. Badanie próbek krwi w teście ELISA na obecność HIV/AIDS rozpoczyna się od połączenia krwi pacjenta z białkiem zawierającym wirusa. Następnie asystent laboratoryjny obserwuje reakcję pomiędzy surowicą krwi pacjenta a komórkami chorobowymi. Badany materiał płucze się kilkakrotnie specjalnymi enzymami. Jeżeli reakcja utrzymuje się i rozpoczyna się produkcja przeciwciał, oznacza to, że w organizmie pacjenta występuje wirus niedoboru odporności. Jednak lekarze nie wyciągają ostatecznych wniosków na podstawie testu immunoenzymatycznego na obecność wirusa HIV. W tym celu stosuje się dodatkowe metody diagnostyczne.

Warto zauważyć, że badanie HIV ELISA trzeciej generacji jest nadal stosowane. Różni się nieco od systemów testowych czwartej generacji bardziej skutecznymi enzymami. Ale ta analiza jest tańsza, dlatego najczęściej stosowana jest w klinikach publicznych.

Test ELISA na HIV: czas wykonania testu

Specjalistyczne laboratoria diagnostyczne HIV ELISA są już dostępne we wszystkich dużych miastach. Duże laboratoria specjalizujące się w różnych testach przeprowadzają również badania za pomocą testów immunoenzymatycznych. Warto dodać, że dziś osoby mieszkające w małych miejscowościach mają możliwość wykonania testu ELISA na obecność wirusa HIV już za miesiąc (wiarygodność wyniku w dużej mierze zależy od okresu wykonywania badania) lub dłużej po podejrzeniu zakażenia. I w tym celu nie muszą przyjeżdżać do ośrodków regionalnych. Badania na obecność wirusa niedoborów odporności przeprowadza się we wszystkich przychodniach, a nawet w niektórych przychodniach wiejskich i miejskich. Jednak pracownicy małych placówek medycznych wysyłają następnie próbki surowicy do wyspecjalizowanych laboratoriów. Test na HIV przy użyciu testu ELISA w obu przypadkach nie będzie różnił się wynikami. Jedyną wadą testów „startowych” jest dłuższy czas ich gotowości. Innymi słowy, mieszkańcy megamiast poznają wyniki testu następnego dnia lub nawet tego samego dnia. Ci, którzy poddają się testom w małych miejscowościach, czasami na wyniki testu ELISA czekają od jednego do kilku tygodni.

HIV ELISA za miesiąc, dwa lub kilka tygodni: kiedy się przebadać?

Głównym błędem popełnianym przez osoby chcące poddać się badaniu na obecność wirusa niedoboru odporności we krwi jest to, że poddaje się je zbyt wcześnie po podejrzeniu zakażenia. Eksperci medyczni zalecają przeprowadzenie tego typu kontroli po co najmniej trzech tygodniach. Czy test ELISA na obecność wirusa HIV zawsze pokaże wyniki w ciągu 4-6 tygodni, czy nie? To pytanie jest często zadawane lekarzom. Nikt nie ma prawa odpowiedzieć twierdząco i oświadczyć, że test ELISA na obecność wirusa HIV za 5 tygodni, 6 lub miesiąc wykaże sto procent. Wszystko zależy od indywidualnych cech organizmu. Faktem jest, że gdy komórki wirusa dostaną się do krwi lub innego środowiska, nie podejmują od razu aktywnego działania. Potrzeba im pewnego czasu, aby rozpocząć namnażanie się w organizmie człowieka i rozpocząć niszczenie leukocytów. Test ELISA w kierunku zakażenia wirusem HIV w okresie, gdy komórki wirusa nie rozprzestrzeniły się we krwi w wystarczającej ilości, jest nieskuteczny. Dlatego nie ma sensu przeprowadzać takiej analizy dzień, a nawet tydzień po rzekomej infekcji. Okres ten nazywany jest przez ekspertów medycznych oknem seronegatywnym. Warto zwrócić uwagę na jedną z jego charakterystycznych cech. W tym okresie nie da się określić obecności wirusa niedoboru odporności w organizmie. Jednak osoba, której choroba jest nadal niewykryta, jest już potencjalnie niebezpieczna dla innych, ponieważ może rozprzestrzeniać wirusa.

Badanie krwi ELISA na obecność wirusa HIV ujawni obecność tej choroby w ciągu 3-4 miesięcy. W niektórych przypadkach w tym okresie dana osoba po raz pierwszy dowiaduje się o strasznej diagnozie. To zależy od pewnych cech ciała. To, czy IFA wykryje obecność wirusa HIV po 2 miesiącach, miesiącu czy kilku tygodniach, w dużej mierze zależy od stężenia wirusa, który dostał się do organizmu. Jeśli mówimy o transfuzji krwi lub kontakcie bez zabezpieczenia, to jej stężenie będzie oczywiście wysokie. Dlatego za pomocą testu ELISA możliwe będzie oznaczenie przeciwciał przeciwko HIV nie za 5 miesięcy, ale znacznie wcześniej. W rzadkich przypadkach ludzie mogą dowiedzieć się o strasznej diagnozie znacznie później. Zdarzały się przypadki, gdy test HIV ELISA dał wynik pozytywny dopiero po roku. Można to określić na podstawie stężenia komórek wirusa. Na szczęście takie przypadki są bardzo rzadkie. Stanowią zaledwie 0,5% wszystkich zakażonych.

Gdzie mogę wykonać test ELISA na obecność wirusa HIV 1, 2?

Pytanie, gdzie wykonać test ELISA na obecność wirusa HIV 3 lub 8-10 tygodni po rzekomej infekcji, jest interesujące dla wielu. W naszym kraju można tego dokonać w przychodni znajdującej się w miejscu zamieszkania lub pobytu czasowego. Procedura jest bezpłatna. Aby wykonać test ELISA na HIV po 12 tygodniach lub wcześniej, nie jest wymagane skierowanie od lekarza pierwszego kontaktu lub wirusologa. Jeśli chcesz poddać się badaniu na tę chorobę, powinieneś poinformować recepcjonistę. Należy mieć przy sobie paszport i obowiązkowe ubezpieczenie zdrowotne. Swoją drogą, od niedawna można przejść weryfikację anonimowo. Takie badanie na obecność wirusa niedoboru odporności jest również bezpłatne. Pacjentowi przydzielany jest indywidualny numer, pod którym może zapoznać się z wynikami, gdy będą już gotowe.

Co to jest test ELISA HIV i jego cechy

Przystępując do testów, zawsze chcesz uzyskać tylko wiarygodne odpowiedzi. Zwłaszcza gdy przeprowadza się badanie na niedobór odporności. W tym przypadku ważna jest dokładność testów na obecność wirusa HIV, ponieważ od tego zależy przyszłe zdrowie danej osoby i jej rodziny. Testy na obecność wirusa HIV przeprowadza się w prawie każdym laboratorium klinicznym. Aby to zrobić, wystarczy oddać niewielką ilość krwi i poczekać kilka dni na wydanie wyniku. Test ELISA na obecność wirusa HIV jest najczęstszą metodą analizy, która pomaga wykryć przeciwciała przeciwko wirusowi, co potwierdza jego obecność w organizmie osoby zakażonej.

Co to jest ELISA

W tej metodzie badawczej wykorzystuje się enzymatyczny test immunoenzymatyczny, który opiera się na wykrywaniu przeciwciał. Metoda ta polega na reakcji immunochemicznej, która pozwala zobaczyć, z jakim antygenem powiązane jest przeciwciało. Ta analiza jest uważana za jedną z najdokładniejszych i najwygodniejszych. Stosuje się ją nawet w przypadkach, gdy metoda PCR po wiremii nie dała dokładnej odpowiedzi.

Najpowszechniejszy heterogenny wariant testu ELISA. W nim krew pacjenta miesza się z antygenem i dodaje się przeciwciała, aby pomóc w utworzeniu łańcucha molekularnego. To w nim można wykryć białko wirusa i udowodnić, że HIV istnieje w organizmie człowieka.

Kiedy wykonuje się test ELISA?

Ponieważ wirus nie jest widoczny natychmiast po ewentualnej infekcji, jego namnożenie i wykrycie zajmuje trochę czasu. Bardziej wiarygodną odpowiedź mogą dać tylko badania. W zależności od stężenia wirusa w organizmie i sposobu przedostawania się wirusa do pojawienia się wirusa może minąć kilka tygodni lub kilka miesięcy. Nikt nie wie dokładnie, kiedy się objawi; każda zarażona osoba ma indywidualne ramy czasowe.

Dlatego zaleca się kilkukrotne wykonanie testu ELISA. Zasadniczo zaleca się wykonanie go po 6 tygodniach, po 3 miesiącach i po sześciu miesiącach. To właśnie ten okres, od przedostania się wirusa do organizmu do jego wykrycia, będzie oknem seronegatywnym. Dlatego w okresie okna wykonywany jest test ELISA na obecność wirusa HIV. Zagraniczni lekarze zalecają wykonanie testu na obecność wirusa HIV po 3 miesiącach, ignorując test sześciomiesięczny. Ale wiele zależy od samego testu ELISA i jego generacji. Co więcej, ludzie stale się martwią i boją się, że HIV nie ujawni się w tym czasie. Aby naprawdę się upewnić i uspokoić, przystępują do tego testu trzy razy.

Cechy testu ELISA

Ta metoda badawcza została odkryta kilkadziesiąt lat temu. Rzeczywiście, pierwsza generacja testu ELISA nie była tak czuła, co wymagało wielu testów w różnym czasie. W końcu tylko wysokie miano wirusa pomogło wykryć HIV za pomocą testu ELISA. Nie było to zbyt wygodne, musiałam żyć długo w zmartwieniach i ciągłym strachu o swoje zdrowie.

Dlatego od tego czasu test ELISA nie stoi w miejscu. Nawet teraz wciąż się rozwija, szukając nowych możliwości szybszego i dokładniejszego badania i wykrywania wirusa. Pomoże to wykryć ją wcześniej po zakażeniu i wcześniej rozpocząć przyjmowanie leków, aby ją stłumić.

W tej chwili istnieją już 4 generacje testu ELISA. Im wyższa generacja, tym dokładniejsza i szybsza będzie analiza. Nowoczesne testy ELISA pozwalają wykryć antygen p24, który pojawia się przed przeciwciałami wirusa. Dzięki temu możemy zaobserwować objawy wirusa wcześniej niż w latach ubiegłych. Być może za jakiś czas pojawi się jeszcze kilka pokoleń, które będą w stanie wykryć HIV już na początku infekcji.

Jeśli wynik testu ELISA jest pozytywny

W przypadku pozytywnego wyniku testu ELISA na obecność wirusa HIV nie należy wpadać w panikę. Być może dana osoba nie zastosowała się do zaleceń dotyczących przygotowania przed przystąpieniem do testu lub cierpiała na ostrą infekcję wirusową. To właśnie może dać tak niechciane pozytywne rezultaty.

W takiej sytuacji zaleca się dodatkowe powtórzenie testu innymi metodami badawczymi. Do poszukiwania przeciwciał przeciwko poszczególnym białkom wirusowym często stosuje się metodę immunoblottingu. Wiarygodność takiego badania jest dość wysoka i pozwala nam dokładnie określić obecność lub brak wirusa w organizmie.

Przygotowanie do testu ELISA

Aby test ELISA na obecność wirusa HIV był prawdziwy i dokładny, warto posłuchać rad lekarzy dotyczących przygotowania się do badania. Pomaga to uniknąć fałszywie pozytywnych wyników i niepotrzebnych, niepotrzebnych zmartwień. Dlatego ważne jest wcześniejsze przygotowanie organizmu.

Nie zaleca się spożywania napojów alkoholowych bezpośrednio na dzień przed przystąpieniem do badania. Idealnie byłoby, gdyby zajęło to kilka dni. Nie należy też jeść zbyt dużo przed badaniem. Ostatni posiłek możliwy jest na 8 godzin przed oddaniem krwi do badania. Zwykle przyjmują go rano, więc ostatnim posiłkiem jest kolacja. A rano oddają krew na czczo.

Jeśli dana osoba cierpiała na ostrą chorobę wirusową, wiarygodność jego testów gwałtownie spadnie. Wskazane jest skonsultowanie się w tej sprawie z lekarzem lub wykonanie testu nieco później, gdy organizm zostanie całkowicie uwolniony od pozostałości ostrej choroby wirusowej. Jednak w przypadku powtórzenia testu można zastosować inną metodę, aby wiarygodnie sprawdzić obecność lub brak wirusa.

Ciąża i test ELISA

Kobiety w ciąży muszą przejść pewne badania, w tym test ELISA na obecność wirusa HIV. Ale ten czas ma swoją własną charakterystykę, ponieważ ciąża może wpływać na dokładność wyników HIV. Dlatego pozornie zdrowa kobieta otrzymuje pozytywny wynik testu na obecność wirusa HIV.

Ale nie rozpaczaj i nie martw się o swoje zdrowie i dobro swojego nienarodzonego dziecka. Takie fałszywe testy nie mogą być winą personelu laboratorium, ale szczególnym stanem matki. Niektóre procesy zachodzące w jej organizmie w tym czasie znacząco wpływają na wynik.

Zdarza się, że organizm kobiety postrzega ciało dziecka jako obcy obiekt i zaczyna wytwarzać przeciwko niemu przeciwciała. Jeśli okres jest dość krótki, a przeciwciał jest już dużo, często mogą wystąpić poronienia. Dlatego wskazane jest zarejestrowanie się na samym początku ciąży.

Również w tym cudownym dla kobiety czasie jej organizm nieco słabnie, podobnie jak jej układ odpornościowy, a choroby przewlekłe wykorzystują to, próbując mocniej wpłynąć na jej zdrowie.

Z powodu takich sytuacji pojawiają się fałszywie pozytywne wyniki. Ale nie martw się. Wystarczy ponownie podejść do testu i wszystko stanie się jasne.

Gdzie wykonać test na HIV

Ponieważ metoda badawcza ELISA jest powszechna, stosowana jest w każdym laboratorium. Dlatego każdy sam wybiera miejsce oddania krwi na HIV. Wystarczy znać godzinę i adres spotkania testowego.

Jeśli chcesz, możesz odwiedzić Centrum AIDS i tam przystąpić do testu, ponieważ praca tej instytucji jest ukierunkowana szczególnie na tę chorobę i rozwiązywanie problemów z nią związanych. Badania w nim nie różnią się od badań w innych laboratoriach.

Otrzymanie analizy zajmuje średnio około 5 dni. Ale niektóre laboratoria mogą to zrobić w ciągu 3 dni. Warto zrozumieć, że mogą zdarzyć się przypadki, gdy reakcja będzie opóźniona o dłuższy okres. Ale to nie znaczy, że wynik będzie koniecznie pozytywny. Być może jakaś sytuacja w laboratorium lub duży napływ testów nie pozwala na szybkie wykonanie tego.

Jeśli wynik testu ELISA jest pozytywny, zaleca się powtórzenie testu. Ma to zawsze na celu wyeliminowanie ewentualnych błędów po stronie pacjenta i czynnika ludzkiego personelu medycznego. W takim przypadku badania można przeprowadzić inną metodą.

Jeśli wielokrotna analiza da wynik pozytywny, należy skonsultować się z lekarzem. Zaleci odpowiednie leczenie i będzie monitorował stan zakażonej osoby. Leki i dawkowanie dobierane są indywidualnie dla każdej osoby. Wszystko zależy od wiremii i cech organizmu.

Jeżeli badania budzą wątpliwości, można je wykonać w kilku laboratoriach, a następnie porównać po otrzymaniu wyników. Jednak przypadki błędów są dość rzadkie, a wyniki są na ogół wiarygodne. Jeśli u jednego z partnerów zdiagnozowano zakażenie wirusem HIV, zaleca się, aby drugi partner również przeszedł badania.

Dzięki odpowiedniemu leczeniu rozprzestrzenianie się wirusa zostaje zahamowane, a dana osoba może żyć spokojnie. Jeśli nie powie o swojej chorobie, to nikt się o tym nie dowie, bo lekarze nie mają prawa ujawniać tajemnicy lekarskiej. Wskazane jest jednak, aby chronić swoich bliskich i krewnych, podejmując wszelkie środki bezpieczeństwa.

Analiza wirusa HIV za pomocą testu ELISA: dokładność, niezawodność

Ludzki wirus niedoboru odporności to poważna diagnoza. Błędy w diagnozie mogą prowadzić do katastrofalnych konsekwencji. HIV ELISA jest najbardziej dostępną metodą badawczą. Musisz dowiedzieć się, jaka jest skuteczność.

Co to jest ELISA

ELISA – test immunoenzymatyczny. Celem metody ELISA jest wykrycie przeciwciał lub specyficznych antygenów w materiale biologicznym. Za pomocą tej metody można monitorować obecność wirusów i innych dużych cząsteczek w cieczy. Badania znajdują zastosowanie w przemyśle spożywczym, rolnictwie i różnych dziedzinach medycyny. Test immunoenzymatyczny jest szeroko stosowany w diagnostyce chorób przenoszonych drogą płciową. Pomaga wykryć HIV i inne choroby przenoszone drogą płciową. W tym przypadku stosuje się metodę „kanapkową” – jest to odmiana testu ELISA do wykrywania antygenów.

„Antygen-przeciwciało” to nazwa systemu określającego obecność przeciwciał, które służą jako wskaźnik penetracji obcej cząsteczki. Aby zidentyfikować te „znaczniki”, składnik biologiczny poddaje się działaniu enzymów. Test immunoenzymatyczny określa przeciwciała z % dokładnością, błąd jest nieistotny. Jest to 2 – 4%.

ELISA – metoda diagnozowania wirusa HIV

I. Test ELISA na obecność wirusa HIV jest pierwszym etapem diagnozy. Największe stężenie komórek wirusa obserwuje się we krwi osoby zakażonej. Antygenami wirusa niedoboru odporności są białka p24, p15, p17, p31 i glikoproteiny gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160. Aby wykryć białko wirusa, pobiera się część krwi z żyły. Próbka wysłana do badania krwi ELISA jest poddawana działaniu odczynników do testów immunoenzymatycznych. Krew oddawana jest wyłącznie na czczo. Nie zaleca się spożywania tłustych potraw i picia alkoholu na 2 dni przed badaniem. Należy przerwać przyjmowanie leków przeciwwirusowych na 14 dni.

Surowica jest izolowana z krwi. Nakłada się go na specjalną tabletkę z wieloma małymi otworami (96 sztuk). Do materiału biologicznego dodaje się białko wirusowe. Płytkę przemywa się kilkakrotnie enzymami. Jeśli w trakcie takiego leczenia zaczną wytwarzać się przeciwciała i antygeny, oznacza to, że wirus był już obecny we krwi.

Zalety metody ELISA:

stosunkowo niski koszt;
wysoka stabilność odczynników;
wrażliwość;
przeprowadzone w krótkim czasie;
minimalny wpływ czynnika ludzkiego.

Nowoczesne systemy testów ELISA produkowane są według międzynarodowych standardów. Zwiększa to dokładność metody.

Po przedostaniu się wirusa do krwi rozpoczyna się utajony (ukryty) etap rozwoju. Okres, zanim niebezpieczne cząsteczki zaczną się namnażać i nie wytworzyły się jeszcze przeciwciała, nazywany jest „oknem seronegatywnym”. Na tym etapie nie ma sensu wykonywać testu na obecność wirusa HIV. W przypadku wystąpienia infekcji wynik będzie fałszywie ujemny. To, jak szybko wirus się ujawni, zależy od tego, ile niebezpiecznych komórek dostało się do organizmu. W przypadku stosunku płciowego bez zabezpieczenia lub transfuzji skażonej krwi okres ten będzie minimalny. Aby uzyskać wysoką wiarygodność testu HIV ELISA, test przeprowadza się trzykrotnie. Terminy wykonania testu ELISA w kierunku ludzkiego wirusa niedoboru odporności:

za 6 tygodni,
za 3 miesiące,
sześć miesięcy później.

Test ELISA czwartej generacji na obecność wirusa HIV jest metodą dostarczającą najwięcej informacji we wczesnych stadiach infekcji. Można je wykonać już po 1 miesiącu od podejrzenia zakażenia. Test na HIV czwartej generacji jest kosztowny w porównaniu z jego odpowiednikiem trzeciej generacji. Dlatego w publicznych placówkach medycznych jest stosowana jako dodatkowa metoda diagnostyczna. Badanie 3 przeprowadzane jest bezpłatnie, w przypadku gdy jego wyniki nie pozwolą na jednoznaczną odpowiedź, terapeuta skieruje Cię na badanie ELISA IV generacji.

Ważny! Natychmiast po zakażeniu osoba staje się zakaźna. Jest niebezpieczny dla innych, nawet jeśli jeszcze nie wie o swojej diagnozie!

II. Jeżeli w teście ELISA zostaną wykryte antygeny HIV, należy przeprowadzić dodatkowe badania. Należą do nich reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR). Wiarygodność tej metody wynosi 80%. PCR bada krew, nasienie i wydzielinę z pochwy. Płyn biologiczny jest rozkładany w reaktorze medycznym, a następnie poddawany działaniu enzymów. W rezultacie uzyskuje się dane dotyczące stężenia komórek HIV w płynnym podłożu. Ze względu na duży błąd (20%), w przypadku pozytywnego wyniku dodatkowo przeprowadza się immunoblot.

III. Kolejnym etapem diagnostyki jest test Combo (czyli immunoblotting). Jest to test o dużej czułości (98% pewności), który przeprowadza się, jeśli po 6 miesiącach wyniki testu ELISA są niejednoznaczne.

Dekodowanie wyników testu ELISA

Nawet jeśli wynik wstępnego i powtarzanego testu ELISA był pozytywny, danej osoby nie można uznać za zakażoną. Test na HIV może zawierać błędy. Przyczyny fałszywie dodatniego wyniku:

choroby przewlekłe,
długotrwałe choroby zakaźne,
ciąża.

Jeżeli wynik testu immunologicznego na obecność wirusa HIV jest pozytywny (reaktywny), osobę uważa się za zakażoną wirusem HIV, a wynik negatywny oznacza, że jest ona zdrowa. Reaktywność lub obciążenie wirusem HIV charakteryzuje się liczbą antygenów na jednostkę krwi. Za normę uważa się liczbę przeciwciał przeciwko wirusowi z 5000 komórek. Jeśli liczba mieści się w tych granicach lub jest mniejsza, wirus jest nieaktywny. Nawet jeśli pozytywny status HIV zostanie dodatkowo potwierdzony, dana osoba nie zauważy zmian w swoim zdrowiu przez długi czas (lata). Jeśli reaktywność jest mniejsza niż komórek, jest to bliskie normy. Gdy ich liczba wzrośnie, należy natychmiast rozpocząć terapię przeciwwirusową.

Czas odszyfrowania wynosi od 24 do 48 godzin. W przypadku konieczności uzyskania informacji w trybie pilnym (wymagana jest operacja) termin ten ulega skróceniu do 2 godzin. Wojewódzkie ośrodki medyczne nie zawsze dysponują niezbędnymi odczynnikami. Próbka pobierana jest w miejscu aplikacji, następnie przekazywana jest do ośrodka regionalnego. W takich okolicznościach wynik można poznać za 1-2 tygodnie.

Wynikiem testu immunologicznego enzymatycznego jest tabela zawierająca listę przeciwciał i antygenów. Naprzeciwko każdego znajduje się znak „+” lub „-”. Czasami wskazany jest wskaźnik ilościowy na jednostkę krwi.

W osobnej kolumnie przedstawiono wskaźnik awidności antygenu. Liczba procentowa jasno pokazuje, kiedy infekcja zaczęła się rozwijać.

Co zrobić, jeśli wynik testu ELISA jest pozytywny

Testy immunologiczne enzymatyczne trzeciej i czwartej generacji z dużą pewnością (98%) wykazują, że dana osoba jest zdrowa. Nie wystarczy potwierdzić pozytywny status wirusa HIV. Jeżeli podczas pierwszego i kolejnych badań we krwi wykryte zostaną antygeny wirusa HIV, osoba otrzymuje skierowanie na immunoblogging. Kiedy badania wykażą, że dana osoba jest nosicielem wirusa HIV, powinna skonsultować się z lekarzem. Określi wiremię i po rejestracji wybierze terapię. Z biegiem czasu komórki wirusa dostosowują się do przepisanych leków. W celu monitorowania skuteczności leczenia okresowo wykonuje się test ELISA.

Czasami immunoblogowanie daje fałszywie ujemny wynik. Niezwykle rzadko zdarza się, że wirus niedoboru odporności nie objawia się przez 6 miesięcy (lub dłużej). Jest to możliwe, jeśli niewielka ilość komórek wirusa dostanie się do krwi. W 0,5% całkowitej liczby przypadków infekcję można zdiagnozować dopiero po roku. W 99,5% przypadków w ciągu sześciu miesięcy test ELISA da wiarygodny wynik. Nawet w przypadku bardzo dokładnych badań ryzyko błędu wynosi 2%. Nie powinniśmy zapominać o czynniku ludzkim. Ludzie mają tendencję do popełniania błędów. Aby to wykluczyć, badanie można przeprowadzić w 2 różnych instytucjach.