ELISA ile HIV analizi: doğruluk, güvenilirlik. ELISA nedir? Enzim immünoassay yöntemi: özü, prensibi, dezavantajları Ifa HIV gösterir

Şu anda insanlarda HIV'in (immün yetmezlik virüsü) teşhisine özel dikkat gösterilmektedir. Hastalığın erken dönemde tespiti tedavi sürecine daha erken başlanmasına yardımcı olacak ve bu da hastanın yaşam süresinin uzamasını önemli ölçüde etkileyecektir.

HIV testi yapıldıktan sonra sonuçlar genellikle pozitif veya negatiftir. Bu durumda birincil bir tanı ve ikincil bir tanı vardır. Birincil test sırasında kişi ELISA kullanılarak test edilir. Gerekirse HIV için tekrar kan testi yapılır. Olumlu ve olumsuz sonuç ne anlama geliyor? HIV testi nasıl çözülür? Uyuşturucu bağımlısı veya alkolik olmayan, ancak düzenli bir cinsel partneri olan bir kişi, bağışıklık yetersizliği virüsü testini okurken neden pozitif ama şüpheli bir sonuç veriyor?

HIV hakkında

Hastalığın etken maddeleri tip 1 ve 2'dir. Uzun bir süre insandaki varlığı fark edilmeden kalır; daha sonra öncelikle bağışıklık sistemi, ardından diğer insan sistemleri etkilenir.

İmmün yetmezlik virüsünün laboratuvar tanısının ana yöntemi HIV'e karşı antikorları tespit etmektir. Enzime bağlı immünosorbent tahlili (ELISA) yöntemin temelini oluşturur; duyarlı (%99,5 ve üzeri) ve spesifiktir (%99,8 ve üzeri). Ayrıca HIV tanısı konurken ELISA kullanılarak p24 antijeni belirlenir.

Her test sisteminin farklı göstergeleri vardır, dolayısıyla viral kabukların farklı protein yapılarını belirlerler. HIV'e neden olan ajanlar iki alt tipe ayrılır: 1. ve 2. veya HIV-1 ve HIV-2. Viral parçacıklar, dış fosfolipid kabuklu küresel bir şekil olarak görünür. Alt tip 1 için aşağıdaki moleküler ağırlığa sahiptir: gp120, gp41, gp160. 2. alt tip gp105, gp36, gp140'ı içerir. Virüsün iç kabuğunun moleküler ağırlığı da biliniyor. Alt tip 1 için bu p55, p17, p24'tür. 2. için - p16, p25, p55.

Bir virüsü tespit etmek için kullanılan her test sistemi için üç ana protein seti vardır.

Genel olarak ELISA sonucu şöyle olabilir:

olumsuz;
yanlış pozitif;
yanlış negatif;
şüpheli veya belirsiz.

Tanı yöntemleri antijenleri ve antikorları tanımlar.

Normal sonuç hakkında

Norm - Bu ne anlama geliyor? HIV testi negatif olduğunda bu normal kabul edilir.

1. En yeni nesil ELISA test sistemleri, HIV'e ve protein parçacıklarına karşı antikorların varlığını belirlemenizi sağlar. Analiz normalse, kanda patojenin antikorları veya protein parçacıkları bulunmaz. Ancak testten önceki 3 ay boyunca enfeksiyon riski yoksa, buna dayanarak kişinin sağlıklı olduğundan kesin olarak söylemek mümkündür. Aksi takdirde bir süre sonra testleri tekrarlamanız gerekir.

HIV'in yalnızca 6 ay sonra keşfedildiği durumlar olmuştur. Bu nedenle sonuç negatifse ve HIV enfeksiyonu olan bir hastayla temas varsa, güvenilirlik açısından testlerin üç, dört ve altı ay sonra tekrarlanması gerekir. ELISA negatif sonuç verir, ancak kişi HIV belirtilerinin varlığından açıkça şüpheleniyorsa, testin tekrar yapılması önerilir. Analizin erken zamanlaması veya insan faktörü nedeniyle hatalı sonuç alınması mümkündür.

2. İmmünoblotlama kullanılarak sonuç negatifse, bu şu anda en güvenilir analizdir.

Bir kişide bağışıklık yetersizliği virüsü varsa ve sonuç negatifse, bu büyük olasılıkla testin herhangi bir aşamasında meydana gelebilecek tıbbi bir hatadır. Üç ve altı ay sonra immünoblot tekrarlandığında sonuç negatifse endişelenecek bir şey yoktur, bu normu gösterir. Ve ancak negatif immünoblot yanıtından sonra HIV testinin negatif olduğunu belirten bir sertifika verilecektir.

3. Yetişkinlerde PCR testi, immün yetmezlik virüsünün teşhisinde son derece nadiren kullanılır ve bu yöntem yeni doğan çocuklar için kullanılır.

Negatif bir sonuç da burada norm olarak kabul edilir.

4. Sosyolojik araştırmalara göre birçok kişi hızlı HIV testini kullanıyor. Negatif bir çizgi gördüklerinde insanlar sakinleşiyor ve HIV enfeksiyonunun tüm belirtilerine sahip olsalar bile tıbbi bir tesise gitmeyi reddediyorlar. Ancak hızlı testin doğruluk oranının yüzde seksen beş olduğunu bilmeniz gerekir. Ayrıca evde yanlış bir şekilde yapabilirsiniz veya saklama koşulları ihlal edilecektir. Sonucun hatalı olma ihtimali daha da yüksektir. Testten 8 saat önce maden alkali su içmek bile test sonucunu etkileyecektir. Bu nedenle hızlı test sonucu negatif olsa bile kişinin bağışıklık yetersizliği virüsüne sahip olmadığı her zaman doğru bir ifade değildir.

Analiz transkripti

İnsanlara test yapıldıktan sonra, test sonucunun nasıl çözüleceği ve HIV pozitif sonuç alındığında ne yapılacağı sorusu sıklıkla ortaya çıkıyor.

1. ELISA, bu test sistemine göre antijenlere karşı antikorların tamamının veya hemen hemen tamamının varlığını gösteriyorsa, bu, HIV testinin pozitif olduğu anlamına gelir. İkinci serolojik enzim immün testinden sonraki cevap pozitifse immünoblotlama yapılmalıdır. Sonuçlarının deşifre edilmesi daha doğru olacaktır. Enzim immünoanalizi pozitif sonuç verdiyse, bir sonraki immünoblot analizi HIV'in varlığını da gösterdi, ardından nihai sonuç verildi. Testler deşifre edildiğinde, pozitif bir HIV testinin şu şekilde belirlendiğini bilmeniz gerekir:

Enfeksiyondan 28 gün sonra %60 ila %65;
%80'de - 42 gün sonra;
%90'da - 56 gün sonra;
%95'te - 84 gün sonra.

HIV'e verilen yanıt pozitifse bu, virüse karşı antikorların tespit edildiği anlamına gelecektir. Yanlış pozitif yanıtlardan kaçınmak için testleri tekrar, tercihen iki kez yapmanız gerekir. İki testten ikisini geçerken veya 2 testten 3'ünü geçerken immün yetmezliğe karşı antikorlar tespit edilirse sonuç pozitif kabul edilir.

p 24 antijeni enfeksiyon tarihinden itibaren 14 gün içinde kanda tespit edilebilir. Enzim immünoassay yöntemi kullanılarak bu antijen 14 ila 56 gün arasında tespit edilir. 60 gün sonra artık kanda değildir. Ancak vücutta AIDS oluştuğunda bu p24 proteini kanda yeniden çoğalır. Bu nedenle enfeksiyonun ilk günlerinde HIV'i tespit etmek veya hastalığın nasıl ilerlediğini belirlemek ve tedavi sürecini izlemek için enzim immünoassay test sistemlerinden yararlanılır. Enzim immünoanalizinin yüksek analitik hassasiyeti, birinci alt tipteki HIV için biyolojik materyaldeki p24 antijenini 5 ila 10 pkg/ml konsantrasyonda, ikinci alt tipteki HIV için ise 0,5 ng/ml veya daha düşük bir konsantrasyonda tespit eder.

2. Enzim immünolojik testinin şüpheli bir sonucu, tanıda bir yerde bir hata olduğu anlamına gelir, kural olarak, tıbbi çalışanlar tarafından bir şeyler karıştırılmıştır veya kişide enfeksiyon belirtileri vardır, ancak sonuç negatiftir, bu da şüphe uyandırır, ve kişi tekrar teste gönderilir.

3. Hastanın aşağıdaki durumlarında kan tahlili yapıldığında yanlış pozitif sonuç anlaşılır:

gebelik;
bir kişinin hormonal dengesizliği varsa;
uzun süreli immünsüpresyon ile.

Bu durumda analizin şifresi nasıl çözülür? En az bir protein tespit edilirse yanlış pozitif sonuç verilir.

P24 antijeninin bireysel varyasyonlara oldukça bağımlı olması nedeniyle bu yöntem kullanılarak enfeksiyonun ilk döneminde hastaların %20 ila %30'u tespit edilir.

Polimeraz zincir reaksiyonu yöntemini kullanarak çalışma sonrası göstergeler hakkında

Bu yöntemi kullanarak HIV RNA'sı ve DNA'sı enfeksiyondan hemen sonra tespit edilir. Ancak kesin bir teşhis yapılmaz; diğer yöntemlerle zorunlu olarak onaylanması gerekir. "PCR sonucunu çözmeme yardım et." - sıklıkla böyle bir isteği duyabilirsiniz. Bir immün yetmezlik virüsü tespit edilirse bu durumda ne yazılır? PCR kullanılarak yapılan bir analizin sonucuna yanıt verirken, mililitre kan başına RNA kopya sayısı belirtilir. Aşağıdaki tablo kandaki kantitatif özelliklere bağlı olarak sonucu göstermektedir.

Hastalığın evresini belirlemek için kolaylıkla kullanılabileceğinden, AIDS testi yaparken yukarıdaki tabloyu kullanmak iyidir.

Çeşitli test sistemlerini dikkate alan bu tablolar, enzim immünolojik testi ve immünoblotlamanın her yöntemi için laboratuvar odalarında mevcuttur.

Onlara sıklıkla şu soru sorulur: "CD4 göstergesini kullanarak polimeraz zincir reaksiyonu çalışmasının ardından cevabı deşifre edin." CD4 hücrelerinin normal sayısı mililitre biyolojik materyal başına 600 ila 1900 hücre arasındadır. Bu, HIV negatif durumuna karşılık gelir. Ancak bilmeniz gerekir ki bu göstergeler sağlıklı insanlarda bile bu aralıkta değildir.

Modern dünyada, birçok laboratuvar halihazırda vücudu HIV enfeksiyonu açısından tamamen inceleyebileceğiniz iyi ekipmanlara sahiptir.

Temas halinde

Vücudun durumunun kapsamlı bir değerlendirmesini yapmak için ELISA teşhis yöntemi kullanılır. Enzim immünoassay kan testi, bulaşıcı, hematolojik, birincil ve ikincil immün yetmezliklerin teşhisi için tasarlanmıştır.

ELISA analizi nedir

Birçok hasta ELISA yöntemiyle ilgileniyor: nedir, çalışma neden yapılıyor? Enzim immünolojik testleri nispeten yakın zamanda kullanılmaya başlandı. Başlangıçta antijenik yapıları incelemek için kullanıldı ve yalnızca bilimsel amaçlarla gerçekleştirildi. Daha sonra bilim adamları, devam eden bir hastalığa yanıt olarak ortaya çıkan spesifik antikorları enzimlerin yardımıyla tanımlamanın mümkün olduğu sonucuna vardılar.

Başlangıçta, bu teknik yalnızca son derece uzmanlaşmış tıbbi kurumlar tarafından, özellikle kan nakil istasyonlarında kullanıldı. ELISA yöntemi, HIV enfeksiyonunu tespit etmek için özellikle önemlidir.

Bugün bu yöntemin geniş bir uygulama alanı vardır. Modern laboratuvarlar bunu teşhis etmek için kullanır:

tümörler;
hormonal bozukluklar;
enfeksiyonlar;
kronik veya önceki bulaşıcı süreçler;
Helmintler.

Vücutta bulaşıcı bir süreç meydana geliyorsa, bu tür bir teşhis, hastalığın türünü belirlemek için en uygun yöntem olarak kabul edilir.

Yöntemin özü ve türleri

ELISA yöntemi - nedir, bu tür araştırmaların özü nedir? Bu ve diğer birçok soru hastaların ilgisini çekiyor. Bu teşhis yönteminin temeli, vücudun bağışıklık hücrelerinin bulaşıcı ajanların antijenlerine bağlanması olarak kabul edilir. Ortaya çıkan kompleks özel bir enzim kullanılarak belirlenir.

ELISA yönteminin prensibini anlamak için antijen-antikor reaksiyonunun nasıl oluştuğunu bilmeniz gerekir. Antijen, enfeksiyonla birlikte nüfuz eden vücuda yabancı bir protein molekülüdür. Başka birinin kanındaki grupla eşleşmeyen parçacıklar da antijen olarak kabul edilir. Vücutta yabancı maddelere karşı korunmayı amaçlayan bir bağışıklık reaksiyonuna neden olurlar. Bu nedenle insan vücudu, antijenlere bağlanabilen ve bir bağışıklık kompleksi oluşturan antikorlar - immünoglobulinler üretir. Bu tür bileşiklerin bağışıklık hücreleri tarafından tanınması ve yok edilmesi çok daha kolaydır.

Bu tür bağışıklık komplekslerinin varlığına verilen reaksiyon, kanda benzer olup olmadığını belirlemek için hazır bileşikler kullanılarak laboratuvar koşullarında gerçekleştirilir.

ELISA yönteminin özü oldukça basittir, ancak birçok enfeksiyon ve hastalığı tespit etmek için kan testi yapıldığı için birkaç çeşidi vardır. Her birinin uygulama şeması ve kapsamı farklılık gösterir. Doğrudan veya dolaylı ELISA olabilir. Doğrudan yöntem, antijenlerle reaksiyona giren hareketsizleştirilmiş antikorların kullanıldığını ima eder. Bu yöntemin temel avantajı tüm süreçlerin otomatikleştirilebilmesidir, bu da teşhisin çok az zaman alması anlamına gelir.

Dolaylı yöntem, ikincil antikorların kullanıldığını ima eder. Katı fazda ise antijen immobilize edilir. Analiz, çeşitli antijenlere karşı antikorları belirlemenizi sağlar. Bu, daha doğru bir sonuç elde edilmesine yardımcı olur, ancak yöntem karmaşıktır.

Çalışmanın faydaları

ELISA yönteminin diğer tanı yöntemlerine göre birçok avantajı vardır. Başlıcaları aşağıdakileri içerir:

yüksek hassasiyet;
bileşenlerin depolama stabilitesi;
teşhis hızı;
az miktarda test materyali kullanılabilir;
tüm süreçleri otomatikleştirmek mümkündür;
Enfeksiyon erken aşamalarda tespit edilebilir.

Bu teşhis yöntemi evrenseldir ve bu nedenle kitle muayenesi için uygundur. Analiz yardımıyla bulaşıcı sürecin dinamiklerini takip etmek mümkündür.

Analiz ve materyal toplama endikasyonları

Birçok hastalıktan şüpheleniliyorsa ELISA yöntemini kullanan bir çalışma önerilebilir:

Venöz kan, antikorların varlığı açısından incelenir. Analiz öncesinde çalışmayı zorlaştırabilecek unsurlar izole edilir. Diğer biyolojik sıvılar da toplanabilir.

En doğru bilgiyi elde etmek için kan alımı aç karnına yapılır. Prosedür gizli bir enfeksiyonu belirlemek için reçete edilmişse, testten birkaç hafta önce antibakteriyel ve antiviral ilaçları almayı bırakmalısınız. Malzemenin toplandığı laboratuvarın donanımına bağlı olarak 24 saat içerisinde sonuç alınabilmektedir. Acil durumlarda bu süre birkaç saate indirilir.

Frengi testi

ELISA yöntemini kullanmak, başta frengi olmak üzere vücutta birçok enfeksiyonun varlığının belirlenmesine yardımcı olur. Çalışmayı yürütmek için aç karnına bir damardan kan alınır. Daha sonra, yalnızca hastalığın vücutta varlığını değil, aynı zamanda başlangıcının kesin zamanlamasını da belirlemeye yardımcı olan bir çalışma gerçekleştirilir, çünkü hastalığın seyri sırasında bazı antikorlar, kesin olarak tanımlanmış bir sırayla başkalarıyla değiştirilir.

Hastalığın uzun süreli seyrini gösteren akut fazda veya kronik bir enfeksiyonun alevlenmesi sırasında kanda tip M immünoglobulinler tespit edilecektir. A tipi immünoglobulinlerin varlığı, enfeksiyonun vücutta daha uzun süredir yaşadığını gösterir. 4 haftadan fazla. G grubunun immünoglobulinleri hastalığın yüksekliğini veya önceki tedaviyi gösterir.

Bulaşıcı sürecin yoğunluğu, doygunluğu oluşan bağışıklık komplekslerinin sayısına bağlı olduğundan deliklerin renklenme derecesi ile değerlendirilir.

HIV enfeksiyonu testi

ELISA yöntemi bu durumda analiz için de kullanılır; hastalığın seyri ve ilerlemesi ile ilişkili bazı özelliklere sahiptir. Bu araştırma yöntemi, tespit için en kabul edilebilir yöntem olarak kabul edilir, ancak risk faktörlerine maruz kaldıktan en geç bir ay sonra yapılmalıdır. Bunun nedeni 45 günden 6 aya kadar süren bir kuluçka döneminin varlığıdır. Bu nedenle analizin altı ay sonra tekrarlanması gerekiyor.

askariazis;
giardiasis;
toksoplazmoz vb.

ELISA yönteminin tüm avantajlarının yanı sıra dezavantajları da bulunmaktadır. Ana dezavantaj, bir çalışma yaparken doktorun önceden hastalık hakkında bir varsayımda bulunması gerektiğidir.

Patojeni yanlışlıkla bulmak ve immünoenzim özelliklerini belirlemek mümkün değilse. Test yalnızca hastanın kanında antikor varlığını gösterir. Ayrıca bu oldukça pahalı bir analizdir.

Analiz transkripti

Yüksek kaliteli bir ELISA'nın sonucu, antikorların varlığı veya kanda yokluğu olacaktır. Kantitatif bir analiz yapılması durumunda antikor konsantrasyonu dijital bir değer olarak veya belirli sayıda + işaretiyle ifade edilebilir.

Ayrıca aşağıdaki gibi göstergeler:

IgM göstergesi vücutta akut bulaşıcı bir sürecin ortaya çıktığını gösterir. Tamamen yokluğu, hastalığın etken maddesinin yokluğunu veya kronik aşamaya geçişini gösterebilir.

Negatif IgM testi sonucu olan bir IgA okuması, kronik veya latent bir enfeksiyonu gösterir. IgM ve IgA'nın eş zamanlı varlığı hastalığın akut aşamada olduğunu gösterir. IgG'nin varlığı, hastalığın kronik aşamaya geçişini veya tamamen iyileşmeyi ve bağışıklığın geliştiğini gösterir.

Artık kendi başınıza yapabileceğiniz özel ELISA testleri var.

HIV enfeksiyonunun zamanında teşhisi son derece önemli bir önlem haline gelir, çünkü tedavinin erken başlatılması büyük ölçüde hastalığın daha da gelişmesini belirleyebilir ve hastanın ömrünü uzatabilir. Son yıllarda bu korkunç hastalığın tanımlanmasında önemli ilerlemeler kaydedildi: Eski test sistemleri yerini daha gelişmiş sistemlere bırakıyor, muayene yöntemleri daha erişilebilir hale geliyor ve bunların doğruluğu önemli ölçüde artıyor.

Bu yazıda, bilgisi bu sorunun zamanında tedavisi ve hastanın normal yaşam kalitesinin sürdürülmesi için yararlı olan HIV enfeksiyonunun teşhisine yönelik modern yöntemlerden bahsedeceğiz.

HIV tanı yöntemleri

Rusya'da HIV enfeksiyonunu teşhis etmek için iki seviye içeren standart bir prosedür yürütülmektedir:

ELISA test sistemi (tarama analizi);
immünoblotlama (IB).

Teşhis için başka yöntemler de kullanılabilir:

hızlı testler.

ELISA test sistemleri

Teşhisin ilk aşamasında, HIV enfeksiyonunu tespit etmek için laboratuvarlarda oluşturulan ve enfeksiyona yanıt olarak vücutta üretilen spesifik antikorları yakalayan HIV proteinlerine dayanan bir tarama testi (ELISA) kullanılır. Test sisteminin reaktifleri (enzimleri) ile etkileşime girdikten sonra göstergenin rengi değişir. Daha sonra bu renk değişiklikleri, yapılan analizin sonucunu belirleyen özel ekipmanlar kullanılarak işlenir.

Bu tür ELISA testleri, HIV enfeksiyonunun ortaya çıkmasından sonraki birkaç hafta içinde sonuçları gösterebilir. Bu test virüsün varlığını belirlemez ancak ona karşı antikor üretimini tespit eder. Bazen insan vücudunda HIV'e karşı antikor üretimi enfeksiyondan 2 hafta sonra başlar, ancak çoğu insanda daha sonraki bir tarihte, 3-6 hafta sonra üretilir.

Farklı hassasiyetlere sahip dört nesil ELISA testi vardır. Son yıllarda sentetik peptidlere veya rekombinant proteinlere dayanan ve daha yüksek özgüllük ve doğruluğa sahip olan üçüncü ve dördüncü nesil test sistemleri giderek daha fazla kullanılmaktadır. HIV enfeksiyonunu teşhis etmek, HIV yaygınlığını izlemek ve bağışlanan kanı test ederken güvenliği sağlamak için kullanılabilirler. Nesil III ve IV ELISA test sistemlerinin doğruluğu %93-99'dur (Batı Avrupa'da üretilen testler daha hassastır - %99).

ELISA testinin yapılabilmesi için hastanın damarından 5 ml kan alınır. Son öğün ile analiz arasında en az 8 saat geçmelidir (genellikle sabahları aç karnına yapılır). Böyle bir testin, şüphelenilen enfeksiyondan en geç 3 hafta sonra (örneğin, yeni bir cinsel partnerle korunmasız cinsel ilişkiden sonra) yapılması önerilir.

ELISA testi sonuçları 2-10 gün içinde elde edilir:

Negatif sonuç: HIV enfeksiyonunun olmadığını gösterir ve bir uzmana başvurmayı gerektirmez;
Yanlış negatif sonuç: enfeksiyonun erken evrelerinde (3 haftaya kadar), AIDS'in sonraki evrelerinde bağışıklık sisteminin ciddi şekilde baskılanması ve yanlış kan hazırlığı ile gözlemlenebilir;
Yanlış pozitif sonuç: Bazı hastalıklarda ve kanın uygunsuz hazırlanması durumunda görülebilir;
Olumlu sonuç: HIV enfeksiyonunu gösterir, IB yapılmasını ve hastanın AIDS merkezindeki bir uzmana başvurmasını gerektirir.

ELISA testi neden yanlış pozitif sonuçlar verebilir?

Yanlış pozitif HIV ELISA testi sonuçları, kanın yanlış işlenmesi nedeniyle veya aşağıdaki durum ve hastalıklara sahip hastalarda ortaya çıkabilir:

multipil myeloma;
Epstein-Barr virüsünün neden olduğu bulaşıcı hastalıklar;
sonrasındaki durum;
otoimmün hastalıklar;
hamileliğin arka planına karşı;
aşılama sonrası durum.

Yukarıda açıklanan nedenlerden dolayı kanda, üretimi HIV enfeksiyonu tarafından tetiklenmeyen, spesifik olmayan çapraz reaksiyona giren antikorlar mevcut olabilir.

Son yıllarda, daha hassas peptit ve rekombinant proteinler içeren (bunlar in vitro genetik mühendisliği kullanılarak sentezlenir) nesil III ve IV test sistemlerinin kullanılması nedeniyle yanlış pozitif sonuçların sıklığı önemli ölçüde azalmıştır. Bu tür ELISA testlerinin kullanıma sunulmasından sonra yanlış pozitif sonuçların sıklığı önemli ölçüde azaldı ve yaklaşık %0,02-0,5 oldu.

Yanlış pozitif sonuç, kişinin HIV ile enfekte olduğu anlamına gelmez. Bu gibi durumlarda, DSÖ başka bir ELISA testinin (mutlaka IV nesil) yapılmasını önermektedir.

Hastanın kanı “tekrar” işaretiyle bir referans veya tahkim laboratuvarına gönderilir ve IV nesil ELISA test sistemi kullanılarak test edilir. Yeni analizin sonucu negatifse, ilk sonuç hatalı (yanlış pozitif) kabul edilir ve IS yapılmaz. İkinci testte sonuç pozitif veya şüpheli çıkarsa, HIV enfeksiyonunu doğrulamak veya çürütmek için hastanın 4-6 hafta sonra IB yaptırması gerekir.

Bağışıklık lekeleme

HIV enfeksiyonunun kesin tanısı ancak pozitif immünoblotlama (IB) sonucu elde edildikten sonra yapılabilir. Bunu gerçekleştirmek için üzerine viral proteinlerin uygulandığı bir nitroselüloz şeridi kullanılır.

IB için kan örneklemesi damardan yapılır. Daha sonra özel işlemlere tabi tutulur ve serumunda bulunan proteinler, yüklerine ve moleküler ağırlıklarına göre özel bir jel içerisinde ayrılır (manipülasyon, elektrik alanının etkisi altında özel ekipman kullanılarak gerçekleştirilir). Kan serumu jeline bir nitroselüloz şeridi uygulanır ve özel bir odada lekeleme ("blotlama") gerçekleştirilir. Şerit işlenir ve kullanılan malzemeler HIV'e karşı antikor içeriyorsa IB üzerindeki antijenik bantlara bağlanarak çizgiler halinde görünürler.

Aşağıdaki durumlarda IB pozitif kabul edilir:

Amerikan CDC kriterlerine göre - şerit üzerinde iki veya üç satır gp41, p24, gp120/gp160 vardır;
Amerikan FDA kriterlerine göre şeritte iki p24, p31 çizgisi ve bir gp41 veya gp120/gp160 çizgisi bulunur.

Vakaların %99,9'unda pozitif IB sonucu HIV enfeksiyonunu gösterir.

Hiçbir çizgi yoksa IB negatiftir.

IB, gr160, gr120 ve gr41 ile hatları tanımlarken şüphelidir. Bu sonuç şu durumlarda ortaya çıkabilir:

onkolojik hastalıklar;
gebelik;
sık kan nakli.

Bu gibi durumlarda başka bir firmanın kiti kullanılarak testin tekrarlanması tavsiye edilir. İlave IB'den sonra sonuç şüpheli kalırsa, altı ay süreyle gözlem gereklidir (IB her 3 ayda bir gerçekleştirilir).

Polimeraz zincirleme reaksiyonu

Bir PCR testi virüsün RNA'sını tespit edebilir. Duyarlılığı oldukça yüksektir ve enfeksiyondan sonraki 10 gün içinde HIV enfeksiyonunun tespit edilmesine olanak sağlar. Bazı durumlarda PCR, yüksek duyarlılığı diğer enfeksiyonlara karşı antikorlara da yanıt verebileceğinden yanlış pozitif sonuçlar verebilir.

Bu teşhis tekniği pahalıdır ve özel ekipman ve yüksek nitelikli uzmanlar gerektirir. Bu nedenler nüfus üzerinde kitlesel testlerin yapılmasını mümkün kılmamaktadır.

PCR aşağıdaki durumlarda kullanılır:

HIV ile enfekte annelerden doğan yenidoğanlarda HIV'i tespit etmek;
HIV'i “pencere döneminde” veya şüpheli IB durumunda tespit etmek;
kandaki HIV konsantrasyonunu kontrol etmek;
donör kanının incelenmesi için.

PCR testi tek başına HIV tanısı koymaz ancak tartışmalı durumların çözümüne yönelik ek bir tanı yöntemi olarak gerçekleştirilir.

Ekspres yöntemler

HIV teşhisindeki yeniliklerden biri de sonuçları 10-15 dakika içinde değerlendirilebilen hızlı testlerdir. En etkili ve doğru sonuçlar, kılcal akış prensibine dayanan immünokromatografik testler kullanılarak elde edilir. Üzerine kan veya diğer test sıvılarının (tükürük, idrar) uygulandığı özel şeritlerdir. HIV'e karşı antikorlar mevcutsa, 10-15 dakika sonra testte renkli ve kontrol şeridi belirir - pozitif sonuç. Sonuç negatifse yalnızca kontrol şeridi görünür.

ELISA testlerinde olduğu gibi hızlı testlerin sonuçlarının IB analizi ile doğrulanması gerekir. Ancak bundan sonra HIV enfeksiyonu tanısı konulabilir.

Hızlı ev test kitleri mevcuttur. OraSure Technologies1 testi (ABD) FDA onaylıdır, reçetesiz satılır ve HIV'i tespit etmek için kullanılabilir. Testin ardından sonuç pozitifse, tanının doğrulanması için hastanın uzman bir merkezde muayene edilmesi önerilir.

Evde kullanıma yönelik diğer testler henüz FDA tarafından onaylanmamıştır ve sonuçları oldukça şüpheli olabilir.

Hızlı testlerin doğruluğu IV. nesil ELISA testlerinden daha düşük olmasına rağmen, popülasyonun ek testleri için yaygın olarak kullanılmaktadırlar.

Herhangi bir klinikte, merkezi bölge hastanesinde veya özel AIDS merkezlerinde HIV enfeksiyonunu tespit etmek için test yaptırabilirsiniz. Rusya topraklarında kesinlikle gizli veya isimsiz olarak gerçekleştirilirler. Her hasta testten önce veya sonra tıbbi veya psikolojik danışmanlık almayı bekleyebilir. HIV testleri için yalnızca ticari tıbbi kurumlarda ödeme yapmanız gerekecek, kamu kliniklerinde ve hastanelerde ise bu testler ücretsiz olarak yapılmaktadır.

HIV'e nasıl yakalanabileceğinizi ve enfekte olma olasılıkları hakkında hangi efsanelerin mevcut olduğunu okuyun.

Son yıllarda bu korkunç hastalığın tanımlanmasında önemli ilerlemeler kaydedildi: Eski test sistemleri yerini daha gelişmiş sistemlere bırakıyor, muayene yöntemleri daha erişilebilir hale geliyor ve bunların doğruluğu önemli ölçüde artıyor.

HIV tanı yöntemleri

Rusya'da HIV enfeksiyonunu teşhis etmek için iki seviye içeren standart bir prosedür yürütülmektedir:

Teşhis için başka yöntemler de kullanılabilir:

ELISA test sistemleri

ELISA testi sonuçları 2-10 gün içinde elde edilir:

Negatif sonuç: HIV enfeksiyonunun olmadığını gösterir ve bir uzmana başvurmayı gerektirmez;
Yanlış negatif sonuç: enfeksiyonun erken evrelerinde (3 haftaya kadar), AIDS'in sonraki evrelerinde bağışıklık sisteminin ciddi şekilde baskılanması ve yanlış kan hazırlığı ile gözlemlenebilir;
Yanlış pozitif sonuç: Bazı hastalıklarda ve kanın uygunsuz hazırlanması durumunda görülebilir;
Olumlu sonuç: HIV enfeksiyonunu gösterir, IB yapılmasını ve hastanın AIDS merkezindeki bir uzmana başvurmasını gerektirir.

ELISA testi neden yanlış pozitif sonuçlar verebilir?

Yanlış pozitif HIV ELISA testi sonuçları, kanın yanlış işlenmesi nedeniyle veya aşağıdaki durum ve hastalıklara sahip hastalarda ortaya çıkabilir:

multipil myeloma;
alkolik hepatit;
Epstein-Barr virüsünün neden olduğu bulaşıcı hastalıklar;
diyaliz sonrası durum;
otoimmün hastalıklar;
hamileliğin arka planına karşı;
aşılama sonrası durum.

Yukarıda açıklanan nedenlerden dolayı kanda, üretimi HIV enfeksiyonu tarafından tetiklenmeyen, spesifik olmayan çapraz reaksiyona giren antikorlar mevcut olabilir.

Yanlış pozitif sonuç, kişinin HIV ile enfekte olduğu anlamına gelmez. Bu gibi durumlarda, DSÖ başka bir ELISA testinin (mutlaka IV nesil) yapılmasını önermektedir.

Bağışıklık lekeleme

Aşağıdaki durumlarda IB pozitif kabul edilir:

Amerikan CDC kriterlerine göre - şerit üzerinde iki veya üç satır gp41, p24, gp120/gp160 vardır;
Amerikan FDA kriterlerine göre şeritte iki p24, p31 çizgisi ve bir gp41 veya gp120/gp160 çizgisi bulunur.

Vakaların %99,9'unda pozitif IB sonucu HIV enfeksiyonunu gösterir.

Hiçbir çizgi yoksa IB negatiftir.

IB, gr160, gr120 ve gr41 ile hatları tanımlarken şüphelidir. Bu sonuç şu durumlarda ortaya çıkabilir:

Polimeraz zincirleme reaksiyonu

Bu teşhis tekniği pahalıdır ve özel ekipman ve yüksek nitelikli uzmanlar gerektirir. Bu nedenler nüfus üzerinde kitlesel testlerin yapılmasını mümkün kılmamaktadır.

PCR aşağıdaki durumlarda kullanılır:

HIV ile enfekte annelerden doğan yenidoğanlarda HIV'i tespit etmek;
HIV'i “pencere döneminde” veya şüpheli IB durumunda tespit etmek;
kandaki HIV konsantrasyonunu kontrol etmek;
donör kanının incelenmesi için.

PCR testi tek başına HIV tanısı koymaz ancak tartışmalı durumların çözümüne yönelik ek bir tanı yöntemi olarak gerçekleştirilir.

Ekspres yöntemler

HIV teşhisindeki yeniliklerden biri de sonuçları dakikalar içinde değerlendirilebilen hızlı testlerdir. En etkili ve doğru sonuçlar, kılcal akış prensibine dayanan immünokromatografik testler kullanılarak elde edilir. Üzerine kan veya diğer test sıvılarının (tükürük, idrar) uygulandığı özel şeritlerdir. HIV'e karşı antikorlar mevcutsa, bir dakika sonra testte renkli bir çizgi ve bir kontrol çizgisi belirir - pozitif sonuç. Sonuç negatifse yalnızca kontrol şeridi görünür.

ELISA testlerinde olduğu gibi hızlı testlerin sonuçlarının IB analizi ile doğrulanması gerekir. Ancak bundan sonra HIV enfeksiyonu tanısı konulabilir.

Evde kullanıma yönelik diğer testler henüz FDA tarafından onaylanmamıştır ve sonuçları oldukça şüpheli olabilir.

Hızlı testlerin doğruluğu IV. nesil ELISA testlerinden daha düşük olmasına rağmen, popülasyonun ek testleri için yaygın olarak kullanılmaktadırlar.

Bu makalede, HIV'e nasıl yakalanabileceğinizi ve enfeksiyon kapma olasılıkları hakkında hangi efsanelerin bulunduğunu okuyun.

Hangi doktorla iletişime geçmeliyim?

HIV enfeksiyonu testi yaptırmak için bir terapisti ziyaret etmeniz ve test için sevk almanız gerekir. Ayrıca doğrudan AIDS Önleme ve Kontrol Merkezine gelerek kimliğinizi belirtmeden orada test yaptırabilirsiniz. HIV enfeksiyonundan şüpheleniyorsanız, bir bulaşıcı hastalık uzmanı veya zührevi doktor da sizi bu muayeneye yönlendirecektir.

HIV ELISA hangi durumlarda ve ne zaman yapılır?

İnsan bağışıklık yetersizliği virüsü, tıp uzmanlarının çabalarına rağmen yüksek oranda yayılan tehlikeli bir hastalıktır. Tüm dünyada bu hastalıkla mücadeleye büyük önem veriliyor. Ancak AIDS'e karşı mucizevi bir aşı henüz bulunamadı. Modern tıpta immün yetmezlik virüsünü teşhis etmek için çeşitli yöntemler vardır, ancak bunlar arasında en yaygın olanı enzim immünolojik testidir. HIV ELISA birkaç on yıl önce kullanılmaya başlandı. Bunca yıl boyunca bu teşhis yöntemi geliştirildi. Ve bugün aynı zamanda en doğru olanlardan biri olarak kabul ediliyor. HIV için ELISA testinin güvenilirliği yüksektir. Yüzde doksan altı ile doksan sekiz arasındadır. Yanlış pozitif veya yanlış negatif sonucun hata payı küçüktür. Bu sayede bu tür teşhislerin popülaritesi netleşiyor. ELISA ile HIV nasıl tespit edilir, bu test nerede yaptırılabilir ve nasıl hazırlanılır?

HIV ELISA testinin açıklaması

HIV için ELISA testi, bir kişinin kanındaki bu hastalığa karşı antikorları tespit etmeyi amaçlamaktadır. Bu virüs insan vücuduna girdiğinde aktif faaliyetine hemen başlamaz. Dolayısıyla belli bir noktaya kadar bunu tespit etmek imkansız olabilir. Tıbbi uzmanlar, enfeksiyon şüphesinden en geç birkaç hafta sonra immün yetmezlik virüsü için test yapılmasını önermektedir.

ELISA, HIV'e karşı antikorları yüksek olasılıkla tespit eder. Bu testin kan serumundaki antikorları tespit edebildiğini belirtmekte fayda var. Sadece onların varlığını belirlemez. HIV kanı ELISA ayrıca antikorların toplam spektrumunun belirlenmesine de yardımcı olur. Bu tür bilgiler bir dereceye kadar enfeksiyonun bir hafta içinde meydana geldiği zamanın belirlenmesine yardımcı olur. Bu sadece enfekte kişinin enfeksiyonun hangi koşullar altında meydana geldiğini tahmin edebilmesi için gerekli değildir. ELISA'da HIV'e karşı antikor miktarı tıp uzmanlarının da ihtiyaç duyduğu bilgidir. Onun yardımıyla, hastanın durumunu daha sonra izleyebilir ve virüsün önümüzdeki haftalarda veya aylarda nasıl davranacağını büyük bir doğrulukla belirleyebilirler. Halihazırda tanı konmuş bir hastaya HIV için ELISA testi kullanılarak kan bağışı önerilebilir. Bu prosedür, antikorların kantitatif bileşimini belirlemek ve doğru antiretroviral tedavi rejimini reçete etmek için gereklidir.

Modern tıpta, özellikle ülkemizde HIV için günümüzde 4. nesil ELISA kullanılmaktadır. Bu analiz yıllar içinde geliştirildi ve bugün güvenilirliği yüzde doksan altı ile doksan sekiz arasındadır. Hata küçük ama var. Bu nedenle, güvenli tarafta olmak için, enzim immünolojik tahlili ile tanısı konulan hastalar da immünoblotlama kullanılarak test edilir. Yani HIV için 4. nesil ELISA test sistemleri, immün yetmezlik virüsü tanısı olmayan kişilerin tespit edilme olasılığını artırıyor. Bu durumda tekrarlanan kontrol yapılmaz. Enzim immün testi, immün yetmezlik virüsüne karşı antikorların varlığını gösterirse, hastalar diğer test türlerine yönlendirilir.

ELISA kullanılarak HIV testi nasıl yapılır?

AIDS için ELISA kan testi damardan alınır. İmmün yetmezlik virüsünün tanımlanmasına yönelik bilinen diğer araştırma yöntemlerinde olduğu gibi, enzim immünolojik test testinde biyolojik bir materyal olarak kan serumu kullanılır. Hasta aç karnına tahlile gelir. Bu bağlamda gıda alımı ve alkolden uzak durma konusunda özel bir kısıtlama yoktur. Ancak test öncesi aşırı alkollü içecek tüketimi sonuçları olumsuz etkileyebilir. Bunu herkesin bilmesi gerekiyor.

HIV'e karşı antikorlar ELISA ile birkaç aşamada tespit edilir. Hastanın biyolojik materyaline ek olarak, bu durumda venöz kandır, böyle bir prosedür, immün yetmezlik virüsü proteini ve katı bir baz içeren yapay serum gerektirir. İkincisi, polistiren veya diğer orta derecede gözenekli malzemelerden yapılabilen özel bir tablet kullanır. ELISA'da kan örneklerinin HIV/AIDS açısından incelenmesi, hastanın kanının virüsü içeren proteinle birleştirilmesiyle başlar. Bunun ardından laboratuvar asistanı hastanın kan serumu ile hastalık hücreleri arasındaki reaksiyonu gözlemler. Test malzemesi özel enzimlerle birkaç kez yıkanır. Reaksiyonun kalıcı olması ve antikor üretiminin başlaması, hastanın vücudunda immün yetmezlik virüsü olduğu anlamına gelir. Ancak doktorlar HIV için enzim immünolojik tahliline dayanarak nihai sonuçlara varmıyor. Bu amaçla ek teşhis yöntemleri kullanılır.

3. nesil HIV ELISA'nın günümüzde hala kullanıldığını belirtmekte fayda var. Daha etkili enzimler açısından dördüncü nesil test sistemlerinden biraz farklıdır. Ancak bu analiz daha ucuz olduğundan çoğunlukla kamu kliniklerinde kullanılır.

HIV ELISA testi: testin zamanlaması

Uzmanlaşmış HIV ELISA teşhis laboratuvarları artık tüm büyük şehirlerde mevcuttur. Çeşitli testlerde uzmanlaşmış büyük laboratuvarlar ayrıca enzim immünoassay testini kullanarak testler yürütmektedir. Bugün küçük kasabalarda yaşayan insanların, şüpheli enfeksiyondan bir ay sonra (sonucun güvenilirliği büyük ölçüde test süresine bağlıdır) veya daha uzun bir süre içinde HIV için ELISA testi yapma fırsatına sahip olduklarını belirtmekte fayda var. Bunun için de bölgesel merkezlere gelmelerine gerek yok. İmmün yetmezlik virüsüne yönelik testler tüm kliniklerde ve hatta bazı kırsal ve kasaba polikliniklerinde yapılmaktadır. Ancak küçük tıbbi kurumların çalışanları daha sonra kan serumu örneklerini uzman laboratuvarlara göndermektedir. Her iki durumda da ELISA kullanılarak yapılan HIV testinin sonuçları farklı olmayacaktır. “Başlangıç” testlerinin tek dezavantajı hazırlık sürelerinin daha uzun olmasıdır. Yani mega kent sakinleri testin sonuçlarını ertesi gün, hatta aynı gün öğrenecekler. Küçük kasabalarda test yaptıranlar bazen ELISA sonuçları için bir ila birkaç hafta beklerler.

Bir ay, iki veya birkaç hafta içinde HIV ELISA: ne zaman test yapılmalı?

İnsanların kanlarında bağışıklık yetersizliği virüsünün varlığına yönelik test yaptırmak istediklerinde yaptıkları temel hata, şüphelenilen enfeksiyondan sonra çok erken test yaptırmalarıdır. Tıp uzmanları bu tür kontrolün en az üç hafta sonra yapılmasını önermektedir. HIV için ELISA sonuçları her zaman 4-6 haftada gösterecek mi, göstermeyecek mi? Bu soru sıklıkla tıp uzmanlarına sorulur. Hiç kimsenin olumlu cevap verme ve HIV için ELISA'nın 5 hafta, 6 veya bir ay içinde yüzde yüz göstereceğini beyan etme hakkı yoktur. Her şey vücudun bireysel özelliklerine bağlıdır. Gerçek şu ki, virüs hücreleri kana veya başka bir ortama girdikten sonra hemen aktif harekete geçmiyorlar. İnsan vücudunda çoğalmaya başlamaları ve lökositleri yok etmeye başlamaları belli bir zaman alır. Virüs hücrelerinin kanda yeterli miktarda yayılmadığı bir dönemde HIV enfeksiyonu için ELISA etkisizdir. Bu nedenle iddia edilen enfeksiyondan bir gün, hatta bir hafta sonra böyle bir analiz yapmak anlamsızdır. Bu döneme tıp uzmanları tarafından seronegatif pencere adı verilmektedir. Karakteristik özelliklerinden birine dikkat çekmeye değer. Bu dönemde vücutta immün yetmezlik virüsünün varlığını belirlemek mümkün değildir. Ancak hastalığı henüz tespit edilemeyen bir kişi, virüsü yayabileceği için başkaları için zaten potansiyel olarak tehlikelidir.

HIV için yapılan ELISA kan testi, 3-4 ay içinde bu hastalığın varlığını ortaya çıkaracaktır. Bazı durumlarda, kişi ilk kez korkunç bir tanıyı bu dönemde öğrenir. Vücudun bazı özelliklerine bağlıdır. IFA'nın HIV'i 2 ay, bir ay veya birkaç hafta sonra belirleyip belirlemeyeceği büyük ölçüde vücuda giren virüsün konsantrasyonundan etkilenir. Kan naklinden veya korunmasız temastan bahsediyorsak konsantrasyonunun yüksek olacağı açıktır. Dolayısıyla ELISA kullanarak HIV antikorlarını 5 ay içinde değil çok daha erken belirlemek mümkün olacak. Nadir durumlarda, insanlar korkunç bir tanıyı çok daha sonra öğrenebilirler. HIV ELISA'nın yalnızca bir yıl sonra olumlu sonuç verdiği durumlar olmuştur. Bu, virüs hücrelerinin konsantrasyonuyla belirlenebilir. Neyse ki bu tür vakalar çok nadirdir. Tüm enfekte kişilerin yalnızca %0,5'ini oluştururlar.

HIV 1, 2 için ELISA testini nereden alabilirim?

İddia edilen enfeksiyondan 3 veya 8-10 hafta sonra HIV için ELISA testinin nerede yapılacağı sorusu birçok kişinin ilgisini çekmektedir. Ülkemizde bu işlem ikamet ettiğiniz yerdeki veya geçici ikamet ettiğiniz yerdeki bir klinikte yapılabilir. İşlem ücretsizdir. 12 hafta veya daha önce HIV ELISA testi yaptırmak için bir pratisyen hekimden veya virologdan sevk almanıza gerek yoktur. Bu hastalık için test yaptırmak istiyorsanız resepsiyon görevlisine bilgi vermelisiniz. Pasaportunuzu ve zorunlu sağlık sigortanızı yanınızda bulundurmalısınız. Bu arada, son zamanlarda kimlik doğrulama işlemini anonim olarak gerçekleştirebilirsiniz. Bağışıklık yetersizliği virüsüne yönelik bu tür testler de ücretsizdir. Hastaya, hazır olduktan sonra sonuçları öğrenebilmesi için bireysel bir numara verilir.

HIV ELISA nedir ve özellikleri

Testlere girerken her zaman yalnızca güvenilir yanıtlar almak istersiniz. Özellikle immün yetmezlik testi yapıldığında. Bu durumda HIV testlerinin doğruluğu önemlidir, çünkü kişinin ve ailesinin gelecekteki sağlığı buna bağlıdır. HIV testi hemen hemen her klinik laboratuvarda yapılmaktadır. Bunun için az miktarda kan bağışlamak ve sonuç çıkana kadar birkaç gün beklemek yeterlidir. HIV için ELISA testi, virüse karşı antikorların tespit edilmesine yardımcı olan ve enfekte kişinin vücudundaki varlığını doğrulayan en yaygın analiz yöntemidir.

ELISA nedir?

Bu araştırma yöntemi, antikorların tespitine dayanan, enzime bağlı bir immünosorbent tahlili kullanır. Bu yöntem, antikorun hangi antijenle ilişkili olduğunu görmenizi sağlayan immünokimyasal bir reaksiyona sahiptir. Bu analiz en doğru ve kullanışlı olanlardan biri olarak kabul edilir. Viral yük sonrası PCR yönteminin doğru cevap alamadığı durumlarda bile kullanılır.

En yaygın heterojen ELISA varyantı. İçinde hastanın kanı antijenle karıştırılır ve moleküler zincirin oluşturulmasına yardımcı olmak için antikorlar eklenir. Virüs proteininin tespit edilebildiği ve HIV'in insan vücudunda var olduğu kanıtlanabildiği yer burasıdır.

ELISA ne zaman yapılır?

Virüs olası enfeksiyondan hemen sonra gözle görülmediğinden çoğalması ve tespit edilmesi biraz zaman alır. Yalnızca araştırma daha güvenilir bir cevap verebilir. Virüsün vücuttaki konsantrasyonuna ve nasıl girdiğine bağlı olarak ortaya çıkması birkaç hafta veya birkaç ay sürebilir. Kimse tam olarak ne zaman ortaya çıkacağını bilmiyor; enfekte olan her kişinin kendine özgü bir zaman çerçevesi var.

Bu nedenle ELISA testinin birkaç kez yapılması önerilir. Temel olarak 6 hafta sonra, 3 ay sonra ve altı ay sonra yapılması tavsiye edilir. Tam olarak virüsün vücuda girmesinden tespit edildiği ana kadar olan bu dönem seronegatif pencere olacaktır. Bu nedenle pencere döneminde HIV için ELISA testi yapılır. Yabancı doktorlar altı aylık testi göz ardı ederek 3 ay sonra HIV testi yapılmasını öneriyor. Ancak çoğu şey ELISA'nın kendisine ve nesline bağlıdır. Üstelik insanlar bu süre zarfında HIV'in kendini göstermeyeceğinden sürekli endişeleniyor ve korkuyorlar. Gerçekten emin olmak ve kendinizi rahatlatmak için bu testi üç kez yapıyorlar.

ELISA'nın özellikleri

Bu araştırma yöntemi birkaç on yıl önce keşfedildi. Aslında ELISA'nın ilk nesli o kadar hassas değildi ve farklı zamanlarda birden fazla test yapılmasını gerektiriyordu. Sonuçta ELISA ile HIV'in tespit edilmesine yalnızca yüksek viral yük yardımcı oldu. Pek uygun olmadı; uzun süre sağlığım konusunda endişe ve sürekli korku içinde yaşamak zorunda kaldım.

Bu nedenle ELISA o zamandan beri yerinde durmadı. Şu anda bile virüsün daha hızlı ve daha doğru araştırılması ve tespit edilmesi için yeni fırsatlar arayarak gelişmeye devam ediyor. Bu, enfeksiyonun daha erken tespit edilmesine ve enfeksiyonun daha erken bastırılması için ilaç almaya başlanmasına yardımcı olacaktır.

Şu anda zaten 4 nesil ELISA var. Nesil ne kadar yüksek olursa analiz o kadar doğru ve hızlı olur. Modern ELISA testleri, virüs antikorlarından önce ortaya çıkan p24 antijeninin tespit edilmesine yardımcı olur. Bu, virüsün tezahürünü önceki yıllara göre daha erken görmemizi sağlıyor. Belki bir süre sonra HIV'i enfeksiyonun başlangıcında tespit edebilecek birkaç nesil daha ortaya çıkacaktır.

ELISA testi pozitif ise

ELISA'nın HIV pozitif olduğu durumlarda paniğe kapılmamalısınız. Belki kişi teste girmeden önce hazırlık tavsiyelerine uymamıştır veya akut viral enfeksiyon geçirmiştir. Bu kadar istenmeyen olumlu sonuçlar verebilecek şey budur.

Böyle bir durumda, diğer araştırma yöntemleriyle ek bir tekrar testi önerilmektedir. İmmünoblotlama yöntemi genellikle bireysel viral proteinlere karşı antikorları aramak için kullanılır. Böyle bir çalışmanın güvenilirliği oldukça yüksektir ve virüsün vücutta varlığını veya yokluğunu doğru bir şekilde belirlememizi sağlar.

ELISA'ya hazırlık

HIV için ELISA testinin doğru ve doğru olması için doktorların teste hazırlanma konusundaki tavsiyelerini dinlemeniz tavsiye edilir. Bu, yanlış pozitif sonuçların ve gereksiz endişelerin önlenmesine yardımcı olur. Bu nedenle vücudun önceden hazırlanması önemlidir.

Testten önceki gün hemen alkollü içecek içilmesi tavsiye edilmez. İdeal olarak, bu birkaç gün sürer. Ayrıca testten önce çok fazla yemek yemeyin. Son yemek, test için kan bağışından 8 saat önce mümkündür. Genellikle sabahları alırlar, bu nedenle son öğün akşam yemeğidir. Ve sabahları aç karnına kan bağışlıyorlar.

Bir kişinin akut viral bir hastalığı varsa, testlerinin güvenilirliği keskin bir şekilde azalacaktır. Bu konuda bir doktora danışmanız veya kısa bir süre sonra, vücut akut viral bir hastalığın kalıntı etkilerinden tamamen kurtulduğunda bir test yapmanız önerilir. Ancak testin tekrarlanması durumunda virüsün varlığını veya yokluğunu güvenilir bir şekilde kontrol etmek için farklı bir yöntem kullanılabilir.

Hamilelik ve ELISA

Hamile kadınların HIV için ELISA testi de dahil olmak üzere bazı testlerden geçmesi gerekir. Ancak bu seferin kendine has özellikleri var çünkü hamilelik HIV sonuçlarının doğruluğunu etkileyebilir. Sağlıklı görünen bir kadının HIV testinin pozitif çıkmasının nedeni budur.

Ancak sağlığınız ve doğmamış çocuğunuzun iyiliği konusunda umutsuzluğa kapılmayın ve endişelenmeyin. Bu tür hatalı testlerin nedeni laboratuvar personelinin hatası değil, annenin özel durumundan kaynaklanıyor olabilir. Şu anda vücudunda meydana gelen bazı süreçler sonucu önemli ölçüde etkilemektedir.

Bir kadının vücudu bebeğin vücudunu yabancı bir cisim olarak algılar ve ona karşı antikorlar üretmeye başlar. Süre oldukça kısaysa ve zaten çok fazla antikor varsa, sıklıkla düşükler meydana gelebilir. Bu nedenle hamileliğin en başında kayıt olmanız tavsiye edilir.

Ayrıca bir kadının bu harika döneminde bağışıklık sistemi gibi vücudu da bir miktar zayıflar ve kronik hastalıklar bundan yararlanarak sağlığını daha güçlü etkilemeye çalışır.

Bu gibi durumlardan dolayı hatalı pozitif sonuçlar ortaya çıkar. Ama endişelenme. Testi tekrar yapmanız yeterlidir ve her şey netleşecektir.

HIV testi nerede yapılır?

ELISA araştırma yöntemi yaygın olduğundan her laboratuvarda kullanılmaktadır. Bu nedenle herkes HIV için kan bağışı yapacağı yeri kendisi seçiyor. Test randevu saatini ve adresini bilmeniz yeterlidir.

Dilerseniz AIDS Merkezini ziyaret edip orada test yaptırabilirsiniz. Çünkü bu kurumun çalışmaları özellikle bu hastalığa ve onunla ilgili sorunların çözümüne yöneliktir. Buradaki araştırma diğer laboratuvarlardaki araştırmalardan farklı değil.

Analizin alınması ortalama 5 gün sürer. Ama bazı laboratuvarlar bunu 3 günde yapabiliyor. Yanıtın daha uzun süre ertelendiği durumların olabileceğini anlamakta fayda var. Ancak bu, sonucun mutlaka olumlu olacağı anlamına gelmez. Belki laboratuvardaki bazı durumlar veya çok sayıda test akışı bunun hızlı bir şekilde yapılmasına izin vermiyordur.

ELISA testi pozitifse, tekrar test reçete edilir. Bu her zaman hasta ve sağlık personelinin insan faktörü açısından olası hataları ortadan kaldırmak için yapılır. Bu durumda farklı bir yöntem kullanılarak araştırma yapılabilir.

Tekrarlanan analiz olumlu sonuç verirse, bir doktora danışmalısınız. Uygun tedaviyi reçete edecek ve enfekte kişinin durumunu izleyecektir. İlaçlar ve dozaj her kişi için ayrı ayrı seçilir. Her şey viral yüke ve vücudun özelliklerine bağlıdır.

Testlerden şüphe duyulursa, kişi bunları birkaç laboratuvara götürebilir ve sonuçları aldığında bunları karşılaştırabilir. Ancak hata durumları oldukça nadirdir ve sonuçlar genellikle güvenilirdir. Partnerlerden birine HIV tanısı konursa diğer partnerin de teste tabi tutulması tavsiye edilir.

Uygun tedavi ile virüsün yayılımı baskılanır ve kişi huzur içinde yaşayabilir. Hastalığını anlatmazsa kimse bilmeyecek çünkü doktorların tıbbi gizliliği açıklama hakkı yok. Ancak sevdiklerinizi ve yakınlarınızı tüm güvenlik önlemlerini alarak korumanız tavsiye edilir.

ELISA kullanarak HIV analizi: doğruluk, güvenilirlik

İnsan immün yetmezlik virüsü ciddi bir tanıdır. Teşhisteki hatalar feci sonuçlara yol açabilir. HIV ELISA en erişilebilir araştırma yöntemidir. Ne kadar etkili olduğunu bulmanız gerekiyor.

ELISA nedir?

ELISA - enzim immünolojik testi. ELISA yönteminin amacı biyolojik materyaldeki antikorları veya spesifik antijenleri tespit etmektir. Yöntemi kullanarak sıvıdaki virüslerin ve diğer büyük moleküllerin varlığını izleyebilirsiniz. Araştırma gıda endüstrisinde, tarımda ve tıbbın çeşitli alanlarında kullanılmaktadır. Enzim immünolojik testi cinsel yolla bulaşan hastalıkların tanısında yaygın olarak kullanılmaktadır. HIV ve diğer cinsel yolla bulaşan enfeksiyonların tespit edilmesine yardımcı olur. Bu durumda "sandviç" yöntemi kullanılır - bu, antijenleri tespit etmek için ELISA'nın bir çeşididir.

“Antijen-antikor”, yabancı bir molekülün penetrasyonunun göstergesi olan antikorların varlığını belirleyen sistemin adıdır. Bu "etiketleri" tanımlamak için biyolojik bileşen enzimlerle işlenir. Enzim immünolojik testi antikorları % doğrulukla belirler, hata önemsizdir. %2-4'tür.

ELISA - HIV tanısı için bir yöntem

I. HIV için ELISA testi tanının ilk aşamasıdır. En yüksek virüs hücresi konsantrasyonu, enfekte bir kişinin kanında görülür. İmmün yetmezlik virüsünün antijenleri, p24, p15, p17, p31 proteinleri ve gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160 glikoproteinleridir. Viral proteini tespit etmek için damardan bir miktar kan alınır. ELISA kan testi için gönderilen numune, enzim immünoassay reaktifleriyle işleme tabi tutulur. Kan bağışı kesinlikle aç karnına yapılır. Testten 2 gün önce yağlı yiyecekler yemeniz veya alkol almanız önerilmez. 14 gün boyunca antiviral ilaçları almayı bırakmalısınız.

Serum kandan izole edilir. Çok sayıda küçük deliği olan (96 adet) özel bir tablete uygulanır. Biyolojik materyale bir viral protein eklenir. Plaka birkaç kez enzimlerle yıkanır. Böyle bir tedavi sırasında antikorlar ve antijenler üretilmeye başlarsa bu, virüsün kanda zaten mevcut olduğu anlamına gelir.

ELISA yönteminin avantajları:

nispeten düşük maliyet;
reaktiflerin yüksek stabilitesi;
duyarlılık;
kısa sürede gerçekleştirilen;
İnsan faktörünün minimum etkisi.

Modern ELISA test sistemleri uluslararası standartlara göre üretilmektedir. Bu da yöntemin doğruluğunu artırır.

Virüs kana girdikten sonra gelişimin latent (gizli) aşaması başlar. Tehlikeli moleküllerin çoğalmaya başlamasından ve antikorların henüz oluşmamasından önceki döneme “seronegatif pencere süresi” denir. Bu aşamada HIV testi yaptırmanın bir anlamı yok. Enfeksiyon meydana gelirse sonuç yanlış negatif olacaktır. Virüsün kendini ne kadar çabuk ortaya çıkardığı, vücuda kaç tane tehlikeli hücrenin girdiğine bağlıdır. Korunmasız cinsel ilişki veya kontamine kan nakli durumunda bu süre minimum düzeyde olacaktır. HIV ELISA'nın yüksek güvenilirliği için test üç kez gerçekleştirilir. İnsan immün yetmezlik virüsü için ELISA'nın alınması için son tarihler:

6 haftada,
3 ay içinde,
altı ay sonra.

HIV için 4. nesil ELISA, enfeksiyonun erken aşamalarında en bilgilendirici olan bir yöntemdir. Şüphelenilen enfeksiyondan 1 ay sonra bile yapılabilir. 4. nesil HIV testi, 3. nesil muadiline göre pahalıdır. Bu nedenle kamu sağlık kurumlarında ek tanı yöntemi olarak kullanılmaktadır. Test 3 ücretsiz olarak yapılır; sonuçları net bir cevap veremezse terapist sizi 4. nesil ELISA testine yönlendirecektir.

Önemli! Enfeksiyondan hemen sonra kişi bulaşıcı hale gelir. Henüz teşhisini bilmese bile başkaları için tehlikelidir!

II. ELISA ile HIV antijenleri tespit edilirse ek araştırma yapılması gerekir. Bunlar polimeraz zincir reaksiyonunu (PCR) içerir. Bu yöntemin güvenilirliği %80'dir. PCR kan, meni ve vajinal akıntıyı test eder. Biyolojik sıvı tıbbi bir reaktörde parçalanıyor ve ardından enzimlerle işleniyor. Sonuç olarak, sıvı ortamdaki HIV hücrelerinin konsantrasyonuna ilişkin veriler elde edilir. Büyük hata (%20) nedeniyle sonuç pozitifse ek olarak immünoblotlama yapılır.

III. Tanının bir sonraki aşaması Combo testidir (veya immünoblotlama). Bu oldukça hassas bir testtir (%98 güvenirlik) ve ELISA sonuçlarının 6 ay sonra şüpheli çıkması durumunda gerçekleştirilir.

ELISA sonuçlarının kodunun çözülmesi

İlk ve tekrarlanan ELISA sonucu pozitif olsa bile kişinin enfekte olduğu düşünülemez. HIV testinde hatalar olabilir. Yanlış pozitif sonucun nedenleri:

kronik hastalıklar,
uzun süreli bulaşıcı hastalıklar,
gebelik.

HIV için immünoblotlama testi pozitif (reaktif) sonuçla sonuçlanırsa, kişi HIV ile enfekte kabul edilir ve negatif test, kişinin sağlıklı olduğu anlamına gelir. HIV için reaktivite veya viral yük, kan ünitesindeki antijen sayısıyla karakterize edilir. Norm, 5000 hücreden virüse karşı antikor sayısı olarak kabul edilir. Sayı bu sınırlar içinde veya altındaysa virüs aktif değildir. Pozitif HIV durumu daha da doğrulansa bile, kişi sağlığındaki değişiklikleri uzun süre (yıllar) fark etmeyecektir. Reaktivite hücrelerden azsa bu normale yakındır. Sayıları arttığında hemen antiviral tedaviye başlanmalıdır.

Şifre çözme süresi 24 ila 48 saat arasında değişir. Acil olarak bilgi almanız gerekiyorsa (ameliyat gerekiyorsa) süre 2 saate indirilir. İl tıp merkezleri her zaman gerekli reaktiflere sahip değildir. Başvuru yerinde numune alındıktan sonra bölge merkezine nakledilir. Bu durumda sonuç 1-2 hafta içinde öğrenilebilir.

Bir enzim immün testinin sonucu, antikorları ve antijenleri listeleyen bir tablodur. Her birinin karşısında “+” veya “-” işareti vardır. Bazen kan ünitesi başına niceliksel bir gösterge belirtilir.

Ayrı bir sütun antijen avidite indeksini gösterir. Yüzde rakamı enfeksiyonun ne zaman gelişmeye başladığını açıkça ortaya koyuyor.

ELISA pozitifse ne yapmalı

3. ve 4. nesil enzim immünolojik testleri, bir kişinin sağlıklı olduğunu yüksek bir güvenle (%98) gösterir. Pozitif HIV durumunu doğrulamak yeterli değildir. İlk ve tekrarlanan testler sırasında kanda HIV antijenleri tespit edilirse, kişi immünblog için yönlendirilir. Araştırmalar bir kişinin HIV pozitif olduğunu ortaya çıkardığında doktora başvurması gerekir. Viral yükü belirleyecek ve kayıttan sonra tedaviyi seçecektir. Zamanla virüs hücreleri reçete edilen ilaçlara uyum sağlar. Tedavinin etkinliğini izlemek için periyodik olarak ELISA testi yapılır.

Bazen immünbloglama yanlış negatif sonuç gösterir. İmmün yetmezlik virüsünün 6 ay (veya daha uzun süre) boyunca kendini göstermemesi son derece nadirdir. Bu, az miktarda virüs hücresinin kana girmesi durumunda mümkündür. Toplam vaka sayısının %0,5'inde enfeksiyon ancak bir yıl sonra teşhis edilebilmektedir. Vakaların %99,5'inde altı ay içinde ELISA testi güvenilir bir sonuç verecektir. Yüksek doğruluk oranına sahip çalışmalarda bile hala %2'lik bir hata şansı vardır. İnsan faktörünü unutmamalıyız. İnsanlar hata yapma eğilimindedir. Dışlamak için test 2 farklı kurumda yapılabilir.