Бледная трепонема (Treponema pallidum) — возбудитель сифилиса: микробиология, антигенные свойства, иммунитет, общая информация о диагностике сифилиса. Микроскопическая диагностика сифилиса Материал для исследования на бледную трепонему

  • 75.Трихофития инфильтративно- нагноительная. Этиол,пат-з,клас, клин, диф.Диаг, леч.
  • 78Вирусные дераматозы.Опред,этиол,клин.Разновид,леч.
  • 80.Опоясывающий герпес.Опред,этиол.,клин,диф.Леч.
  • 81.Вирусные бородавки.Опред,этиол,патог,клин,диф,леч.
  • 82.Контагиозный моллюск.Этиол.Патог,клин,диф,леч.
  • 79. Простой герпес.Опред,этиол,патог,клин,диф,леч.
  • 1. История развития венерологии.Основоположники
  • 2. Особенности течения вен.Заб.Прич роста заболев-ти сифилисом в нашей стране и в мире.
  • 3. Общественная и личная профилактика венерич.Болезней
  • 6.Экспериментальный сифилис
  • 4.Бледная спирохета-возбудитель сифилиса,её морфол.Св-ва.
  • 5 Иммунитет при сифилисе.Понятие о реинфекции и суперинфекции.
  • 8. Общая характеристика первичного периода сифилиса.
  • 9.Клиника первичной сифиломы(клинические разновидности твердого шанкра) и сопутствующего бубона.
  • 11. Атипические виды первичной сифиломы.
  • 14. Отличия II свежего от рецидивного сифилиса.
  • 12. Осложнения первичной сифиломы, тактика врача.
  • 10. Дифференциальная диагностика первичного периода сифилиса
  • 13.Вторичный сифилис. Общая характеристика высыпаний при II сифилисе.
  • 15. Сифилитическая розеола, ее разновидности, диф.Диагностика.
  • 17. Папулезные сифилиды слизистых, клиника,диф.Диагностика.
  • 16. Папулезные сифилиды и их разновидности.
  • 18. Пигментный сифилид,клиника,диф.Диагноз.
  • 19. Сифилитическая алопеция, клиника, диф.Диагностика.
  • 20. Пустулезный сифилид, клиника,диф.Диагноз.
  • 21. Поражения внутренних органов и систем при II сифилисе.
  • 22. Причины III сифилиса, общие признаки проявления.
  • 23. Бугорковый сифилид, его варианты, диф.Диагноз.
  • 24. Гуммозный сифилид,варианты, диф.Диагноз.
  • 25. Поражение слизистых при III сифилисе, диф.Диагноз.
  • 26. Поражение внутренних органов и систем при III сифилисе.
  • 27. Сифилис и беременность. Профилактика врожденного сифилиса. Контроль за профилактической работой женских консультаций, родильных домов.
  • 28. Сифилис плода. Пути передачи сифилиса от родителей потомству.
  • 29. Сифилис грудного возраста (врожденный).
  • 30. Сифилис раннего детского возраста (врожденный).
  • 31. Поздний врожденный сифилис.
  • 32. Признаки злокачественного течения сифилиса (по периодам), причины.
  • 35. Клиническое значение серодиагностики по периодам сифилиса (мрс, рв, рит,риф, ифа)
  • 33. Методы обнаружения бледной спирохеты (по периодам).
  • 34. Серодиагностика сифилиса (мрс, рв, рит,риф, ифа). Ложноположительные реакции (острые, хронические). Показания для проведения мрс, рв, рит,риф, ифа.
  • 37. Препораты перициллина в лечении больных сифилисом, осложнения, противопоказания.
  • 36. Основные принципы лечения больных сифилисом. Неспецифическая терапия, показания, методы.
  • 39. Клиника и диагностика острого переднего гонорейного уретрита.
  • 38. Гонококк-возбудитель гонореи. Его морфологические и биологические свойства.
  • 40. Клиника и диагностика тотального гонорейного уретрита.
  • 41. Клиника и диагностика гонорейного простатита.
  • 42. Клиника и диагностика гонорейного эпидидимита.
  • 43. Основные принципы лечения больных гонореей.
  • 44. Негонорейные уретриты у мужчин.
  • 45. Вич инфекция. Определение, распространенность, пути передачи, патогенез, классификация.
  • 46. Кожные проявления вич-инфекции. Особенности неопластических и бактериальных поражений. Саркома Капоши. Диагностика. Профилактика.
  • 47. Кожные проявления вич-инфекции. Особонности вирусных и грибковых поражений при спиДе. Волосатая лейкоплакия слизистой ротовой полости. Себорейный дерматит. Диагностика. Профилактика.
  • 33. Методы обнаружения бледной спирохеты (по периодам).

    Лабораторная диагностика бледной трепонемы

    Для подтверждения диагноза ранних форм сифилиса (первичный и вто­ричный периоды) проводят поиск бледных трепонем в активных эле­ментах сифилиса: в первичной сифиломе, эрозированных папулах и широких кондиломах. Исследование бледных трепонем производят в их нативном состоянии, используя дня этого обычный световой мик­роскоп и затемняя поле зрения так называемым параболоид-конденсо­ром. Биологический материал наносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и просматривают при увеличении J0 (объектив 90, бинокулярная насадка). В затемненном поле зрения при боковом осве­щении лампой в капле серозного экссудата, взятого из очага, выявляют различные светящиеся твердые частицы (лейкоциты, эпителиальные клетки), в том числе бледные трепонемы в виде движущейся нежной спирали или тонкого пунктира, слабо преломляющего свет.

    Для диагностики заболевания используют также пунктах регионар­ного лимфатического узла, данные клинической картины, результаты сирологического исследования крови результаты обследования полового партнера (конфронтация) кдр.

    Трелонему можно обнаружить с помощью ПЦР, Полимеразная цеп­ная реакция (ПЦР) - молекулярно-биологический метод, основанный на способности геномной ДНК Т. pallidum взаимодействовать с компле­ментарными праймерами к фрагменту гена мембранного иммуногена трепонемы, что вызывает амплификацию специфической ДНК. Специ­фичность метода 99%, чувствительность от 70 до 91%. ПЦР-диагностика при сифилисе в настоящее время не относится к обязательным

    34. Серодиагностика сифилиса (мрс, рв, рит,риф, ифа). Ложноположительные реакции (острые, хронические). Показания для проведения мрс, рв, рит,риф, ифа.

    Выделяют наиболее простую реакцию – МРС, которая используется в качестве скрининга, то есть массового обследования. Это исследование крови на сифилис, которое позволяет оценить какие-либо отклонения в организме. Очень часто случается так, что эта реакция может быть ложноположительной.

    В такой ситуации требуется проведение более специфичных тестов, например, в качестве первого этапа диагностического поиска рекомендуется провести реакцию Вассермана. К тому же при различных аллергических заболеваниях может быть положительной как одна, так и другая реакция. Поэтому требуется более детальное обследование. В таких случаях рекомендуется сдать анализы на аллергию ребенку (особенно это касается детей, так у них еще несовершенна иммунная система).

    2. Реакция Вассермана

    Реакция Вассермана представляет собой реакцию микропреципитации. В чистом виде реакция Вассермана в настоящее время не проводится. К образцу биологического материала добавляют кардиолипин, который получен из бычьего сердца. Если человек болеет сифилисом, то происходит соединение сифилис-специфических антител с этим кардиолипином.

    Реакция оценивается в плюсах – от одного до четырех. В норме она должна быть отрицательной. Однако положительная еще не говорит о том, что человек болен сифилисом. В данном случае требуется проведение более специфичных тестов.

    3. РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем) основана на феномене обездвиживания бледных трепонем антителами типа иммобк- лнзинов, имеющимися в сыворотке крови больных сифилисом. В каче­стве антигена для РИБТ используют взвесь бледных трепонем, полученных из тканей яичек от зараженных сифилисом кроликов с признаками си­филитического орхита. Бледные трспонемы (антиген) при контакте с сывороткой крови больного (антитело) прекращают движение, т.е. происходит их иммобилизация. Результаты реакции оценивают в про­центах: РИБТ считают положительной при иммобилизации от 51 до 100% бледных трепонем. слабоположительной - от 31 до 50%. сомни­тельной - от 21 до 30% и отрицательной - от 0 до 20%.

    Иммобилизины появляются в сыворотке крови больных позднее, чем другие антитела, поэтому РИБТ становится положительной позже, чем РИФ. РИБТ наиболее специфична из существующих реакций на сифилис. Ее основное назначение - распознавание ложноположитель­ных результатов VDRL. Это особенно важно тогда, когда сифилис про­текает скрыто без наружных проявлений, но с поражением внутренних органов или нервной системы. Особенное значение имеет РИБТ для распознавания ложноположительных результатов у беременных.

    4. РИФ (реакция иммунофлюоресценции) - более чувствительная реакция, бывает положительной уже в первичном серонеыггионом пери­оде сифилиса у 80% больных. По специфичности РИФ уступает РИБТ, что не пошоляет заменить ею РИБТ, хотя ее техника значительно про­ще. Реакцию ставят в нескольких модификациях: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-абс. (абсорбированная). РИФ-10 более чувствительна, а РИФ- 200 и РИФ-абс. более специфичны. Принцип реакции заключается в том, что специфический антиген (бледные грепонемы) соединяют с сывороткой крови больного (антитела) и ннтивидовой флюоресциру­ющей сывороткой (кроличья сыворотка против глобулинов четовека, соединенная с флюоресцеином - веществом, светящимся в ультрафио­летовых лучах). При положительной реакции в люминесцентном микрос ­копе можно видеть желто-зеленое свечение бледных трепонем, поскольку они оказываются окруженными флюоресцирующими антителами. Све­чение оценивают плюсами, как и при КС’Р Положительную реакцию обозначают двумя, тремя или четырьмя плюсами. При свечении I + и отсутствии свечения реакция считается отрицательной. При вто­ричном сифилисе РИФ положительна почти во всех случаях. Она всегда положительна при латентном сифилисе (99-100%), а при третичных формах и врожденном сифилисе положительна в 95-100% случаев.

    Для диагностики сифилиса можно использовать и иммунофермент- ный анализ (ИФА) с реакцией микропреципитации (РПМ) или реакци­ей пассивной гемаггл юти нации (РПГА). Для клинико-серологического контроля после специфического лечения (для определения эффектив­ности терапии) допускается количественное исследование РМП (изуче­ние титра реакции в динамике).

    4. Иммунодормснтный анализ (ИФА, Elisa). Принцип реакции заклю­чается в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя, с антигеном испытуемой сыво­ротки крови и выявления специфического комплекса антиген-антитело с помощью антивидовой иммунной сыворотки, меченной ферментом Чувствительность и специфичности ИФА аналогичны РИФ.

    37. Препораты перициллина в лечении больных сифилисом, осложнения, противопоказания.

    Препараты для лечения сифилиса. С 1943 г. пенициллин и его соли остаются препаратами первого выбора для регулярного лечения боль­ных сифилисом.

    Чувствительность бледной тренонемы к пенициллину остается высо­кой и нет признаков ее изменений. Однако у пенициллина имеются и определенные недостатки, прежде всего повышенная чувствитель­ность некоторых больных или непереносимость, хотя зарегистриро­ванные случаи анафилаксии при введении пенициллина составляют всего 0,4%. Пенициллин в применяемых дозах не способен проникать через гематобиологические барьеры, что затрудняет его применение в обычных концентрациях для лечения больных с поздними формами сифилиса (включая поздние рецидивы), особенно при поражениях нервной системы и внутренних органов. В подобных случаях или вводят большие дозы пенициллина, или одновременное пенициллином наз­начают препараты, блокирующие его выведение почками. Возникла необходимость в создании резервных методов лечения, которые при высокой эффективности были бы свободны от недостатков, присущих пенициллину.

    К настоящему времени в качестве резервных препаратов для лечения сифилиса используют антибиотики непепициллинового ряда тетрацик­лин (доксициклин), эритромицин, цефтриаксон.

    Тетрациклиновые препараты эффективны при лечении раннего сифи­лиса, по их применение ограничено у беременных из-за взаимодействия с костными тканями эмбриона, которые становятся более хрупкими.

    Эритромицин также достаточно эффективен при лечении первично­го и вторичного сифилиса, но может давать гепатотоксический эффект. Это ограничивает его применение улиц с патологией печени. Ни один из перечисленных препаратов не проникает через гематоэнцефаличес­кий барьер, все препараты нужно принимать долго.

    В соответствии с рекомендациями ВОЗ для лечения больных сифилисом стали применять некоторые цефалоспориньц в том числе цефтизоксим и цефтриаксон. Цефтриаксон может проникать в спинно­мозговой канал, он не оказывает тератогенного действия. Это является достаточным основанием для использования цсфтриаксона при лечении больных с различными формами сифилиса, включая скрытые и поздние, а также при поражении нервной системы.

    36. Основные принципы лечения больных сифилисом. Неспецифическая терапия, показания, методы.

    Лечение больных сифилисом осуществляется в соответствии со специаль­ной инструкцией после установления и обязательного подтверждения диаг­ноза лабораторными исследованиями. Лечение рекомендуется начинать как можно скорее (при ранних активных формах сифилиса - в первые 24 ч). Чем раньше начато лечение, тем благоприятнее прогноз и лучше его результаты. Инструкцией предусмотрены следующие виды лечения противосифшштическими препаратами:

    Специфическое лечение больных сифилисом с подтвержденным ди­агнозом.

    Превентивное лечение лип, находившихся в тесном бытовом или половом контакте с больными сифилисом, проводится, если с момента контакта прошло не более 2 мес. По истечении 2 мес превентивное лече­ние не проводится, а данное лицо ежемесячно подвергается клинико­серологическому контролю п течение 4 мес.

    Профилактическое лечение с целью профилактики врожденною сифилиса проводится беременным, болевшим в прошлом сифилисом, получившим полноценную терапию, но не снятым с учета, а также бере­менным, которые получили полноценное противосифилитичсское лече­ние и сняты с учета по поводу сифилиса. Новорожденным назначают профилактическое лечение, если они родились без клинических и серо­логических симптомов сифилиса от матерей, неполноценно лечивших­ся в прошлом или не успевших получить полностью профилактическое лечение во время беременности.

    Пробное лечение (ex juvan (ibua ) назначают лицам, у которых кли­ническая картина позволяет подозревать поздние третичные сифилити­ческие поражения кожи, костей, суставов, внутренних органов и нерв­ной системы, а лабораторные серологические исследования (КСР, РИБТ и РИФ) не могут подтвердить или отвергнуть такой диагноз.

    Больные гонооеей с невыявленными источниками заражения в слу­чае невозможности установить за ними диспансерное наблюдение (лица без определенного места жительства, работники секс-индустрии и т.д.) подлежат превентивному противосифилитическому лечению в условиях стационара Если госпитализация этих больных невозможна, превен­тивное лечение проводится амбулаторно одним из дюрантных препара­тов пенициллина.

    Допускается проведение так называемого эпидемиологического лечения. При очевидных клинических симптомах сифилиса, положи­тельной мнкрореакции преципитации (VDRL, RPR) и соответствую­щем эпидемиологическом анамнезе лечение начинают немедленно, не ожидая результатов серологических реакций, подтверждающих диагноз.

    За последние годы накоплен большой материал по лечению больных с различными стадиями и формами сифилиса. Основной тенденцией стало сокращение сроков лечения по всем схемам. Повышение разовых и курсовых доз антибиотиков при различных стадиях сифилиса сочета­ется с неспецифической терапией. ВОЗ рекомендует лечение свежего сифилиса с использованием бензатин-пеннциллина.

    39. Клиника и диагностика острого переднего гонорейного уретрита.

    Гонорейный уретрит проявляется выделением из уретры воспали­тельного экссудата и болевыми ощущениями. При остром воспалении отмечаются значительная гиперемия и отечность губок наружного отвер­стия уретры. Из уретры выделяется большое количество желтовато­зеленого или бледно-желтого гноя. Иногда незначительное жжение или зуд предшествует слизисто-гнойным выделениям. Признаки воспале­ния быстро нарастают, и через 1-2 дня формируется передний острый гонококковый уретрит, больные ощущают боль и резь при мочеиспуска­нии. При подостром переднем свежем гонококковом уретрите выделения слизисто-гнойные, необильные, воспаление губок наружного отверстия уретры выражено слабо, а субъективные ощущения незначительные. При торпидном свежем гонококковом уретрите субъективные ощущения отсутствуют, выделения скудные или почти незаметные. Губки наружного отверстия уретры не изменены. Больные в этом случае часто не обраща­ются за медицинской помощыэ и наиболее опасны в эпидемиологичес­ком отношении.

    В дальнейшем при гонорее даже без лечения воспалительная реакция постепенно уменьшается, субъективные расстройства ослабевают. Урет ­рит переходит в подострую, а затем и в хроническую стадию.

    Если гонококки из передней уретры попадают в заднюю уретру, воз­никает острый тотальный уретрит (уретроцистит). Больной испытывает императивные позывы на мочеиспускание, в конце которого возникает резкая боль (терминальная). Количество мочи весьма незначительно. Иногда в конце мочеиспускания появляется капелька крови (терми­нальная гематурия). В отдельных случаях при выраженном воспалении наблюдаются лихорадка, недомогание.

    Диагностика как переднего, так и тотального острого гонококкового уретрита не представляет затруднений. Она основывается на данных анамнеза, типичной картине болезни, двухстаканной пробе мочи и подтверждается лабораторным обнаружением гонококков (микроско­пически и культурально). Если воспалительный процесс ограничен слизистой оболочкой передней уретры, то при последовательном вы­пускании мочи в два стакана моча в первом стакане, смывая из уретры гной, будет мутной, а во втором - прозрачной.

    При тотальном уретрите моча в двух стаканах будет мутной, так как гной из задней уретры из-за несостоятельности внутреннего сфинктера затекает в мочевой пузырь (тотальная пиурия).

    Treponema pallidum - возбудитель сифилиса включен в род Treponema (от лат. trepo - поворачивать, nemo - нить).

    Т. pallidum открыта Ф. Шаудином в 1905 г. Большой вклад в изучение сифилиса внесли И. И. Мечников, П. Эрлих, Д. К. Заболотный и др.

    Морфология . Т. pallidum - спиралевидная нить размером 8-18 × 0,08-0,2 мкм с мелкими, равномерными завитками. Число завитков 12-14. Концы трепонемы заострены или закруглены. Трепонемы подвижны. Обладают четырьмя видами движения. По Романовскому - Гимзе окрашиваются в бледно-розовый цвет, поэтому они называются Т. pallidum - бледная трепонема. Плохое окрашивание объясняется малым содержанием нуклеопротеидов. Спирохеты можно выявлять в препаратах, окрашенных по Бурри, серебрением. Кроме того, их изучают в живом состоянии - в темном поле.

    Возбудители сифилиса спор и капсул не имеют (см. рис. 4).

    Культивирование . Бледные трепонемы очень требовательны к питательным средам. На искусственных питательных средах они растут только в присутствии кусочков мозга или почек кролика и асцитической жидкости. Растут медленно, 5-12 дней при температуре 35-36° С в анаэробных условиях. Бледные трепонемы хорошо размножаются в курином эмбрионе (поперечным делением). При выращивании на искусственных питательных средах трепонемы теряют вирулентность. Такие культуры называются культуральными. Культуры, выращенные в курином эмбрионе, называют тканевыми. Они обычно сохраняют вирулентность.

    Ферментативными свойствами трепонемы не обладают. Однако культуральные штаммы различаются между собой по способности образовывать индол и сероводород.

    Токсинообразование . Не установлено.

    Антигенная структура . Бледная трепонема содержит несколько антигенных комплексов: полисахаридный, липидный и протеиновый. Серогруппы и серовары не установлены.

    Устойчивость к факторам окружающей среды . Бледные трепонемы малоустойчивы. Температура 45-55° С губит их через 15 мин. К низким температурам они устойчивы. При замораживании сохраняются до года. Спирохеты чувствительны к солям тяжелых металлов (ртути, висмута, мышьяка и др.). Обычные концентрации дезинфицирующих веществ губят их в течение нескольких минут. Они чувствительны к бензилпенициллину, бициллину и др. Под влиянием некоторых факторов внешней среды и антибактериальных препаратов трепонемы могут образовывать цисты. В такой форме они длительно находятся в организме в латентном состоянии.

    Восприимчивость животных . В естественных условиях животные сифилисом не болеют. Однако на обезьянах, как показали И. И. Мечников и Э. Ру, можно воспроизвести клиническую картину сифилиса: на месте введения образуется твердый шанкр. В настоящее время показано, что при заражении кроликов, морских свинок на месте введения или в другом месте на коже образуются язвы. На кроликах путем пассажей можно длительное время сохранять выделенный штамм трепонем.

    Источники инфекции . Больной человек.

    Пути передачи . Контакт бытовой (прямой контакт), преимущественно половой путь. Иногда сифилис может передаваться через предметы (посуду, белье). От больной сифилисом матери заболевание передается через плаценту ребенку (врожденный сифилис).

    Патогенез . Входными воротами являются слизистые оболочки половых путей и ротовой полости.

    Первичный период - спирохеты попадают на слизистую оболочку, и после инкубационного периода (в среднем 3 нед) на месте внедрения образуется язва, которая характеризуется плотными краями и дном - твердый шанкр. Образованию твердого шанкра сопутствует увеличение лимфатических узлов. Первичный период продолжается 6-7 нед.

    Вторичный период - возбудители сифилиса по лимфатическим и кровеносным путям распространяются по всему организму. При этом на коже и слизистых оболочках образуются розеолы, папулы, везикулы. Продолжительность этого периода - 3-4 года.

    Третий период - развивается при нелеченом сифилисе. В этот период в органах, тканях, костях, сосудах образуются грануляционные разрастания - гуммы или гуммозные инфильтраты, склонные к распаду. Этот период может продолжаться несколько лет (в скрытой форме). Больной в этот период незаразен. При нелеченом сифилисе (в некоторых случаях), спустя много лет, может наступить поражение центральной нервной системы: при поражении головного мозга - прогрессивный паралич, при поражении спинного мозга - спинная сухотка. Эти заболевания возникают при локализации трепонем в мозговой ткани, что приводит к тяжелым органическим и функциональным изменениям в организме.

    Иммунитет . Естественного иммунитета нет. При заболевании сифилисом развивается "нестерильный" инфекционный иммунитет. Его называют шанкерный, так как при повторном заражении твердый шанкр не образуется, но все последующие периоды развиваются. При сифилисе обнаруживают IgC и IgM, а также реагины IgE, которые в присутствии кардиолипидного антигена связывают комплемент.

    Профилактика . Санитарно-просветительная работа, раннее выявление больных сифилисом. Специфическая профилактика. Не разработана.

    Лечение . Пенициллин, бициллин, биохинол и др.

    Контрольные вопросы

    1. Опишите морфологию спирохет и методы окраски.

    2. Что такое твердый шанкр?

    3. Какой материал для исследования Вы будете брать в разные периоды заболевания сифилисом?

    4. Каков иммунитет при сифилисе?

    Микробиологическое исследование

    Цель исследования: выявление бледной трепонемы и серодиагностика.

    Материал для исследования

    1. Содержимое твердого шанкра (первичный период).

    2. Содержимое розеол, папул, везикул (вторичный период).

    3. Кровь (вторичный, третий и четвертый периоды).

    Основные методы исследования

    1. Микроскопический.

    2. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

    3. Серологический: 1) реакция Вассермана (РСК);

    2) осадочные реакции.

    4. Реакция иммобилизации трепонем (РИТ).

    Серологическая диагностика

    Реакция Вассермана . Реакцию ставят по принципу реакции связывания комплемента (табл. 52). Отличается она тем, что при реакции Вассермана может быть использован неспецифический антиген. Например, липоидный экстракт из бычьего сердца - кардиоантиген. Ввиду неспецифичности антител, реагирующих с этим антигеном, их называют реагинами. Реакция с неспецифическим антигеном объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидными экстрактами, образуют комплекс, который связывает комплемент, и поэтому гемолиз не происходит (в гемолитической системе). Отсутствие гемолиза - положительная реакция - серологически подтверждает диагноз "сифилис". При постановке серологических реакций нужно использовать также специфические антигены из тканевых трепонем и культуральные.

    Примечание. 1) ++++ полная задержка гемолиза; - гемолиз; 2) антиген № 1 неспецифический (липоидная фракция бычьего сердца); 3) антигены № 2 и 3 специфические, приготовленные из культур трепонем.

    Осадочные реакции . 1. Реакция Кана. Сыворотку больного инактивируют при 56° С 30 мин. К антигену (экстракт липидов бычьего сердца) прибавляют 0,6% холестерина для повышения чувствительности реакции (табл. 53).

    Учет результата: появление преципитации отмечается как положительная реакция .

    2. Реакция Закса - Витебского (цитохолевая осадочная реакция) является модификацией реакции Кана. Авторы применили более концентрированный антиген, к которому прибавлен холестерин, что способствует более быстрому образованию преципитата.

    Реакция иммобилизации трепонем (РИТ) . Это наиболее специфичная реакция в диагностике сифилиса.

    В настоящее время разработана методика этой реакции: взвесь трепонем получают из измельченного яичка кролика, зараженного Т. pallidum, и сохраняют в специальной среде, не угнетающей подвижность трепонем. В пробирку вносят 1,7 мл взвеси тканевых трепонем, добавляют 0,2 мл испытуемой сыворотки, 0,1 мл свежего комплемента.

    Контроли: в 1-ю пробирку вместо испытуемой сыворотки вносят сыворотку здорового лица; во 2-ю - наливают инактивированную сыворотку морской свинки. Все пробирки помещают в эксикатор или анаэростат, заполняют их смесью газов (1 объем углекислоты и 19 объемов азота) и ставят в термостат при 35° С. Затем исследуемый материал наносят на стекло и изучают подвижность трепонем в темном поле. Принцип реакции заключается в том, что сыворотка больного сифилисом в присутствии комплемента угнетает движение бледной трепонемы. Определяют процент иммобилизованных трепонем.

    Результат считают положительным, если иммобилизованных трепонем выше 50%; слабоположительным - от 30-50%; отрицательным - ниже 20%.

    Контрольные вопросы

    1. Какой материал используют для лабораторной диагностики сифилиса в разные периоды заболевания?

    2. Каковы методы лабораторного исследования при диагностике сифилиса?

    3. Какими антигенами нужно пользоваться при постановке реакции Вассермана?

    4. Какие ингредиенты необходимы для постановки реакции иммобилизации трепонем (РИТ)? Какой материал берут у обследуемого, что в нем определяют?

    Бледная трепонема - это бактерия рода Treponema, вызывающая инфекционное заболевание сифилис. Длина ее составляет от 8 до 20 мкм, ширина - от 0,25 до 0,35 мкм. Имеет форму спирали и напоминает штопор с количеством завитков 8–12 штук. Такой тип строения называют спирохетой, поэтому эта бактерия известна также как бледная спирохета.

    Длинное тонкое тело позволяет микробу легко проникать в организм человека сквозь слизистые оболочки. В основном заражение происходит через половые органы.

    Что представляет собой трепонема

    Бледная трепонема была открыта в 1905 г. немецкими учеными Гофманом и Шаудином. При исследовании Treponema pallidum (лат. название, используется также написание T. pallidum) не обнаруживается методом окрашивания Грама, поэтому за бактерией закрепилось определение «бледная» (лат. pallidum). Имеет 4 подвида, каждый из которых несет угрозу здоровью человека:

    Трепонема паллидум имеет тело, покрытое слизистой бесструктурной капсулой, трехслойную клеточную стенку, органеллы (вакуоли, рибосомы, мезосомы), цитоплазму. Концы у нее обычно заостренные, на них имеются выросты-блефаропласты, на которых располагается около 10 фибрилл (нитевидных структур) в виде пучков. Благодаря сокращениям клетки и имеющимся фибриллам бледная спирохета быстро передвигается. На пути к своей цели она совершает разнообразные движения: сгибательные, поступательные, вращательные, винтообразные и т. д.

    При неблагоприятных условиях меняются формы бледной трепонемы, она приобретает вид цист и L-форму:

    1. В L-форме трепонемы становятся шаровидными, останавливается их размножение и истончается клеточная стенка, однако рост и синтез ДНК продолжается.
    2. Цисты покрыты защитной оболочкой и могут долго находиться в организме человека в латентном состоянии. Когда условия меняются на благоприятные, цисты становятся зернами, а затем приобретают привычную форму.

    Трепонема паллидум чувствительна к ультрафиолету, боится щелочи, уксуса, спирта. Проявляет устойчивость к низким температурам (выдерживает замораживание до 1 года), но при нагревании свыше 50 °C гибнет в течение 15–20 минут. Вне организма человека может прожить не более 3 суток. Является строгим анаэробом, т. е. для энергетического обмена ей не требуется свободный кислород. Сопротивляемость цист и L-формы в несколько раз сильнее.

    Признаки сифилиса

    Попав в организм человека через слизистую, бактерия продолжает перемещение по лимфатическим и кровеносным сосудам, затем оседает в тканях. Первые признаки заражения обычно появляются через 20–30 дней после проникновения микроба в организм, но иногда это происходит не раньше чем через 3–4 месяца. Выделяют несколько стадий заболевания: первичный сифилис, вторичный и т. д. Каждая из них имеет характерные симптомы.

    Первичный сифилис - стадия, возникающая сразу после заражения, симптомы становятся заметны спустя 10–90 дней. Больной может испытывать слабость, головную боль, боль в костях и мышцах, повышение температуры. Иногда ухудшения самочувствия не наблюдается. Часто увеличиваются лимфоузлы. На месте проникновения белой спирохеты образуется сифилома или - небольшой плотный узел диаметром до 1 см, постепенно трансформирующийся в язву.

    Шанкр бывает единичный или в количестве нескольких штук и возникает не только на слизистых оболочках, но и на кожных покровах рук, бедер, живота и т. д. Шанкры имеют разновидности, называемые аномальными, их наличие часто сбивает с толку при постановке диагноза:

    Вторичная стадия начинается спустя 3 месяца после того, как возбудитель сифилиса проник в организм. Ее длительность может достигать 5 лет. Периодически возникают высыпания на коже (кожные сифилиды), которые проходят сами через несколько недель. Они могут иметь разный вид: белые пятна на шее (« «), гнойники, бледно-розовые пятна на боках и т. д. Зуд и температура отсутствуют. Порой наблюдается локальное облысение. Сифилиды могут поражать слизистую горла в виде ангины и фарингита.

    Третичный сифилис наступает спустя несколько лет​​ после заражения. Происходит разрушение внутренних органов, появляются характерные сифилиды на кожных и слизистых покровах. Слизистую и внутренние органы поражают гуммы - опухоли, приводящие к необратимому распаду тканей. На коже появляются бугорковые и гуммозные сифилиды (см. фото).

    Выявление и лечение заболевания

    Для диагностирования сифилиса проводится комплексное обследование. Сначала пациента осматривает дерматовенеролог на наличие высыпаний на коже и слизистых. Затем проводятся лабораторные исследования материала, взятого из язв и образований у больного. Могут проводиться такие исследования;

    1. Трепонемные серологичекие тесты: РИТБ, РИФ, TPHA, ИФА, иммуноблотинг. Они позволяют выявить антитела к трепономе паллидум.
    2. Нетрепонемные серологические тесты: реакция Вассермана, количественный тест
      VDRL, тест быстрых плазменных реагинов. Определяют наличие антител к фосфолипидам тканей.
    3. Обнаружение трепонемы в очагах поражения: ПЦР, РИФ-Тр, темнопольная микроскопия.

    Важно тщательно изучить все признаки, чтобы понять, что это такое, ведь симптомы сифилиса совпадают с симптомами многих других заболеваний. Если диагноз подтвердился, назначается лечение, тип которого зависит от стадии заболевания.

    Терапия базируется на приеме антибиотиков. Основой препаратов обычно являются пенициллин, тетрациклин или эритромицин. Если же у пациента третичная стадия, то применяются средства на висмуте, отличающиеся сильной токсичностью. Также может практиковаться внутримышечное введение антибактериальных препаратов, пиротерапия.

    Дезинфекция предметов домашнего обихода является обязательной и помогает убить возбудитель за пределами организма зараженного. Кроме того, необходимо провести диагностику и лечение полового партнера.

    Проводят поиск бледных трепонем в активных элементах сифилиса (эрозии, язвы, эрозированные папулы, широкие кондиломы) или путем пункции лимфатических узлов.

    Опыты окрашивания бледных трепонем утратили свое практическое значение в связи с тем, что бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые краски (откуда и название возбудителя - «бледная» трепонема). Кроме того, при окрашивании теряется очень важный дифференциально-диагностический признак бледных трепонем, позволяющий отделить их от вульгарных трепонем - это виды движения (поступательное, вращательное, волнообразное, маятникообразное, V-образное). Важной является также одинаковость размеров завитка, быстрота движения и приведенные выше виды движений. Поэтому во всех лабораториях проводят исследования бледной трепонемы в живом состоянии, используя для этого обычный световой микроскоп с темнопольным конденсором. При отсутствии такого конденсора делают затемнение кружком черной бумаги (диаметр 1,5 см), который вкладывается на нижнюю линзу развинченного конденсора так, чтобы между краями линзы и бумаги оставался свободный ободок (просвет 1,5-2 мм). Пройдя через это приспособление (конденсор), луч света принимает косое направление под острым углом в месте исследуемой капли серума, не попадает в объектив, чем достигается исследование в темном поле.

    Исследование проводится под темнопольным конденсором (объектив х40, окуляр х10-15). На поверхность конденсора наносят каплю вазелинового масла или каплю воды. Сверху на предметный столик помещают препарат и рассматривают его. На темном фоне можно увидеть большое количество разных клеточных элементов и среди них - бледную трепонему , которая имеет вид светлых штопорообразных нитей. Она отличается от других трепонем характерными видами движения, равномерностью завитка. Этот способ очень простой и надежный. Только в том случае, когда видят характерные черты

    Сифилис — хроническое венерическое заболевание, характеризующееся последовательной сменой отдельных периодов болезни. Возбудитель сифилиса был. открыт в 1905 г. немецким ученым Шаудином.

    Морфология и биологические свойства. Treponema pallidum представляет собой тонкую извитую нить размером 15x0,25—0,5 мкм, имеющую 8—14 равномерных витков спирали, расположенных близко друг к другу. С трудом окрашивается анилиновыми красками и поэтому получила название бледной спирохеты. Для окраски используют метод Романовского — Гимзы (спирохеты окрашиваются в бледно-розовый цвет), негативное окрашивание раствором туши (спирохеты остаются неокрашенными и видны на темном фоне). Для выявления спирохет в инфицированных тканях используют метод импрегнации серебром (метод Левадити), при котором трепонемы, окрашенные в черный цвет, видны на фоне желтых клеток ткани. При исследовании материала в темном поле зрения бледная спирохета отличается от сапрофитных спирохет, встречающихся на слизистых оболочках полости рта и половых органов, равномерными завитками, плавными волнообразными движениями.

    Она тоньше других трепонем, способна сгибаться под углом и совершать характерные маятникообразные движения. Культивируется возбудитель сифилиса с трудом, в анаэробных условиях. Для выращивания используют среды, содержащие кроличью или лошадиную сыворотку (среды Уленгута и Терских). При этом культуральные (полученные на питательных средах) штаммы спирохет теряют вирулентность и изменяют антигенную структуру. Трепонемы содержат эндотоксин, имеют сложное антигенное строение.

    Устойчивость. Бледная спирохета вне тканей больного быстро погибает, неустойчива при высушивании, действии обычных дезинфицирующих веществ и высокой температуры; даже при 40°С погибает через 2 ч. К низким температурам более устойчива: выдерживает замораживание до года.

    Патогенность. В естественных условиях животные сифилисом не болеют. Экспериментально удается заразить обезьян, кроликов, хомяков.

    Патогенез и клиника. Входными воротами инфекции являются слизистые оболочки и кожа, имеющие самые незначительные повреждения. Инкубационный период продолжается в среднем 3—4 нед, после чего наступает первичный период сифилиса: на месте внедрения возбудителя появляется небольшая эрозия, приподнятая над кожей, с ровными краями, гладким блестящим дном, розового или красного цвета, часто безболезненная, с плотным инфильтратом у основания, из-за которого она и получила название «твердый шанкр». Возникают недомогание, головная боль. Лимфатические узлы увеличиваются, становятся плотными без видимых признаков воспаления. Они, как правило, не спаяны с окружающими тканями. Через 20—30 дней твердый шанкр заживает.

    Спирохеты из лимфатических узлов проникают в кровь, размножаются и заносятся в органы и ткани и могут вызвать их поражения. Через 6—7 нед от начала заболевания развивается вторичный период сифилиса, характеризующийся генерализацией процесса и появлением обильных и разнообразных высыпаний на коже и слизистых оболочках (сифилиды) розовых или красных тонов, Сифилиды могут возникать в виде розеол, папул, везикул, пустул. Если лечение не проводится, то через 2— 3 года наступает третий период сифилиса — гуммозный. Возникает бугорковый сифилид, или глубокий узловой сифилид (подкожная гумма). На коже и слизистых оболочках появляются плотные шаровидные бугорки. Они могут существовать неопределенно долгое время, а затем рассасываются или изъязвляются с последующим образованием рубца. При образовании сифилитической гуммы в подкожной жировой клетчатке появляется узел, который увеличивается, спаивается с окружающей клетчаткой и с кожей. Над центральной частью гуммы кожа истончается и она вскрывается. Гумма превращается в гуммозную язву с неприятным запахом: дно ее покрыто некротическим распадом. В течение нескольких месяцев язва заживает и на ее месте остается втянутый звездчатый рубец. В последнем, четвертом, парасифилитическом периоде, который может наступить через 10—20 лет после начала заболевания, наблюдаются специфические поражения центральной нервной системы в форме прогрессивного паралича или спинной сухотки.

    Иммунитет. Естественный, врожденный, иммунитет отсутствует: заражение всегда приводит к развитию заболевания. Вопрос о состоянии приобретенного иммунитета до конца не изучен. Во время болезни вырабатывается не¬стерильный иммунитет, носящий характер клеточного, тканевого. Его называют противошанкерным, так как при повторном заражении во время болезни новый шанкр не появляется, а спирохеты распространяются по всему организму, принимая участие в развитии последующих сифилитических поражений.

    Микробиологическая диагностика. Основные методы лабораторной диагностики — микроскопический и серо-логический. В первый период проводят микроскопию серозного содержимого твердого шанкра в темном поле или в мазках, окрашенных по Романовскому — Гимзе. Микроскопическому исследованию подвергают также отделяемое кожных поражений вторичного и третичного периодов. Начиная с 5—6-й недели от момента заражения или на 2—3-й неделе после появления твердого шанкра используют серологические методы диагностики. Применяют РСК (реакцию Вассермана) и осадочные реакции (реакции преципитации) Кана и Закса — Витебского. Реакцию Вассермана ставят с сывороткой больного, используя неспецифические антигены (спиртовой экстракт липоидов из бычьего сердца с добавлением холестерина, или кардиолипиновый антиген), так как оказалось, что глобулины сыворотки больного сифилисом способны соединяться липоидными вытяжками, полученными из различных органов. Наряду с неспедифическими используют специфический антиген, полученный из ткани яичка кролика, зараженного бледной трепонемой. При отсутствии гемолиза реакцию считают положительной, так как очевидно, что комплемент связался со специфической системой антиген — антитело. Осадочные реакции просты по технике постановки. Суть их заключается в том, что при добавлении к сыворотке больного концентрированного липоидного антигена появляются помутнение, а затем и осадок. Ввиду того что антигены в этих реакциях неспецифичны, они могут быть положительны и при других инфекционных заболеваниях (туберкулез, малярия и др.).

    Наиболее специфичной в серологической диагностике сифилиса является реакция иммобилизации трепонем (РИТ). Эта реакция основана на том, что при добавлении сыворотки больного сифилисом к тканевой культуре трепонем (культивируемых в яичнике кролика) они в присутствии комплемента теряют подвижность. Наряду с этой реакцией используется также непрямая РИф. Основными компонентами для постановки этой реакции являются: сыворотка больного (разведенная 1:200), тканевый штамм бледной спирохеты, антивидовая флюоресцирующая сыворотка против глобулинов человека.

    Единственным источником инфекции является человек во все периоды болезни. Путь передачи — непосредственный контакт с больным (чаще всего при половом сношении), реже—через предметы обихода. Возможна передача инфекции новорожденному через плаценту от больной матери.

    Профилактика и лечение. В СССР перед врачами поставлена задача ликвидации сифилиса. Для этого имеются все предпосылки: непрерывный рост благосостояния и культурного уровня жизни трудящихся, а также такие меры борьбы, как привлечение к обследованию и лечению лиц, являющихся источником заражения, и контактировавших с ними, массовые профилактические осмотры, диспансерные методы работы. Существенную роль в профилактике играют раннее выявление источников инфекции, своевременное лечение, ликвидация беспорядочных половых связей. Специфическая профилактика не проводится.

    Для лечения применяют новарсенол, препараты висмута, ртути, пенициллин.



    Похожие публикации